發(fā)布時(shí)間：2020-06-28 21:06

【摘要】：目的:研究慢性乙型肝炎(Chronic Hepatitis B, CHB)患者不同免疫狀態(tài)下外周血CD4~+、CD8~+T淋巴細(xì)胞(T lymphocyte,T cells)表面程序性死亡受體1(programmed death 1, PD-1)的表達(dá),并探討其與血清乙型肝炎病毒脫氧核糖核酸(hepatitis B virus deoxyribonucleic acid,HBV DNA)載量、丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(alanineaminotransferase,ALT)水平之間的關(guān)系。 方法:收集111名CHB患者的外周血,根據(jù)免疫狀態(tài)的不同將CHB患者分為三個(gè)研究組:免疫耐受期組(immune-tolerant:HBeAg陽性,HBV DNA107copies/ml,ALT正常)24例,免疫活化期組(immune-reactive:HBeAg陽性,HBV DNA陽性,ALT持續(xù)升高)64例,HBeAg陰性CHB(HBeAg-negative CHB:HBeAg陰性,HBV DNA陽性, ALT持續(xù)升高)23例,同時(shí)收集11名健康獻(xiàn)血者外周血作為對照組。采用流式細(xì)胞術(shù)檢測上述4組人群外周血CD4~+, CD8~+T淋巴細(xì)胞表達(dá)PD-1的細(xì)胞百分比,以實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測血清HBV DNA載量,同時(shí)檢測血清ALT水平。 結(jié)果:免疫活化期組、HBeAg陰性CHB組外周血CD4~+、CD8~+T淋巴細(xì)胞表達(dá)PD-1的細(xì)胞百分比顯著高于免疫耐受期組及健康對照組(P均0.05);HBeAg陰性CHB組外周血CD8~+T淋巴細(xì)胞表達(dá)PD-1的細(xì)胞百分比明顯高于免疫活化期組(P0.05)。相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)不同免疫狀態(tài)下CHB患者外周血表達(dá)PD-1的CD4~+、CD8~+T淋巴細(xì)胞百分比與HBV DNA載量及ALT水平均無相關(guān)性。 結(jié)論:CHB患者外周血T淋巴細(xì)胞的PD-1表達(dá)與機(jī)體的免疫狀態(tài)相關(guān)。肝臟的炎癥損傷是影響外周血T淋巴細(xì)胞PD-1表達(dá)的重要因素,血清HBV DNA載量不是外周血T淋巴細(xì)胞PD-1表達(dá)的主要影響原因。
【學(xué)位授予單位】：南京醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號(hào)】：R512.62
【圖文】：

圖 1 外周血 CD8+T 淋巴細(xì)胞設(shè)門策略：通過前向和側(cè)向散射光設(shè)定淋巴細(xì)胞的 P1 區(qū)（A），收集 P1 區(qū)細(xì)胞，即外周血淋巴細(xì)胞；同時(shí)分析 P2 區(qū)中 CD3+細(xì)胞（B），P1、P2 交集即為 CD3+淋巴細(xì)胞；再分析 CD3+T 淋巴細(xì)胞中 CD8+細(xì)胞，P3 區(qū)即 CD3+CD8+T 淋巴細(xì)胞（C）；最后分析表達(dá) PD-1 的 CD3+CD8+T 淋巴細(xì)胞百分比，即 P區(qū)（D）。. 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析采用 SPSS 17.0 軟件（SPSS Inc.，Chicago，Illinois）進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)資料數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s），方差齊性檢驗(yàn)采用 Levene 檢驗(yàn)，方齊則對多樣本資料采用單因素方差分析及 LSD-t 檢驗(yàn)比較組間差異，方差不則采用 Mann-Whitney U 檢驗(yàn)比較組間差異，相關(guān)性分析采用 Pearson 相關(guān)

圖 2 三組 CHB 患者血清 HBV DNA 載量的關(guān)系各組之間外周血表達(dá) PD-1 的 CD4+T 淋巴細(xì)胞百分比關(guān)疫活化期組、HBeAg 陰性 CHB 組 CD4+T 淋巴細(xì)胞表面 PD-1 的免疫耐受期組及健康對照組（P<0.05），其中免疫耐受期組與對4+T 淋巴細(xì)胞表面 PD-1 的表達(dá)沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。HBeAg 陰性 CT 淋巴細(xì)胞表面 PD-1 表達(dá)要高于免疫活化期組，但兩組之間差異義（見圖 3）。

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