小鼠腸道菌群失衡與恢復重建對腸道黏膜形態(tài)及血清細胞因子的影響
發(fā)布時間:2020-06-28 11:53
【摘要】:目的: 1.通過觀察小鼠腸道菌群失衡及菌群恢復重建后小鼠腸道黏膜形態(tài)的變化,探討腸道菌群對腸道黏膜形態(tài)的影響。 2.通過分析小鼠腸道菌群失衡與恢復重建后小鼠血清中細胞因子分泌量的變化,探討腸道菌群對機體免疫系統(tǒng)調節(jié)的作用機制。 方法: 1.采用抗生素頭孢曲松鈉灌胃的方式建立小鼠腸道菌群失衡模型。以頭孢曲松鈉終濃度為8g/kg/d的劑量,連續(xù)灌胃8天,分析腸道菌群,建立小鼠菌群失衡模型。 2.通過雙歧桿菌、乳酸桿菌、梭桿菌、類桿菌、大腸桿菌、葡萄球菌、鏈球菌、消化球菌、韋榮球菌、腸球菌等10種腸道優(yōu)勢菌群定量回灌的方法以求菌群重建。 3.通過正常小鼠糞便定量回灌的方法以求菌群重建。 4.通過自然恢復的方法使菌群自己恢復重建。 5.將正常對照組與菌群失衡組、菌群回灌組、糞便回灌和自然恢復組小鼠進行比較,利用HE染色及電鏡技術觀察各組腸道黏膜絨毛形態(tài)的變化。 6.將正常對照組與菌群失衡組、菌群回灌組、糞便回灌和自然恢復組小鼠進行比較,利用ELISA法檢測各組血清中細胞因子IL-1β、IL-6和TNF-α分泌量變化。 結果: 1.與正常對照組小鼠比較,菌群失衡后小鼠腸道黏膜形態(tài)受到破壞,經(jīng)過三周的菌群重建,與自然恢復組相比,菌群回灌和糞便回灌組小鼠腸道黏膜形態(tài)得到較好改善,呈恢復趨勢。菌群回灌組小鼠恢復速度優(yōu)于糞便回灌組小鼠。 2.與正常對照組小鼠比較,菌群失衡后小鼠血清細胞因子IL-1β、IL-6和TNF-α分泌量明顯增多(P0.05)。經(jīng)三周的菌群重建,與菌群失衡組相比,菌群回灌和糞便回灌組小鼠血清中細胞因子IL-1β、IL-6和TNF-α分泌量明顯減少(P0.05)。與自然恢復組相比,兩周時菌群回灌和糞便回灌組小鼠血清中細胞因子IL-1β、IL-6和TNF-α分泌量明顯減少(P0.05)。 結論: 1.優(yōu)勢菌群回灌和糞便回灌重建法均可實現(xiàn)菌群失衡后腸道黏膜形態(tài)的快速恢復。 2.優(yōu)勢菌群回灌和糞便回灌重建法均能有效抑制菌群失衡后血清中IL-1β、IL-6和TNF-α細胞因子分泌。 3.在黏膜形態(tài)恢復和免疫因子調節(jié)中,優(yōu)勢菌群回灌法比糞便回灌法起效快。
【學位授予單位】:大連醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2012
【分類號】:R574
【圖文】:
132.2 菌群失衡與恢復重建對上皮細胞結構的影響經(jīng)電子顯微鏡制樣法處理樣本后在透射電子顯微鏡下進行觀察,可見正常對照組小鼠腸上皮細胞頂端的微絨毛結構完整,排列規(guī)則整齊,形成刷狀緣;細胞間連接緊密;細胞質內有大量的線粒體和粗面內質網(wǎng)存在。與正常對照組比較菌群失衡組小鼠,小腸上皮頂端的微絨毛結構完整性遭到破壞,排列不規(guī)整,部分脫落,稀疏且長短不一;細胞間連接間隙增寬;細胞內線粒體及粗面內質網(wǎng)出現(xiàn)腫脹;菌群回灌和糞便回灌組小鼠在菌群恢復過程中,腸黏膜上皮微絨毛逐漸恢復整齊,形成刷狀緣;細胞間連接間隙也隨著時間的推移逐漸恢復緊密;胞質內的內質網(wǎng)和線粒體腫脹逐漸得到緩解并慢慢恢復到正常水平。從圖片上可以看出,自然恢復 1 周(10x10) 自然恢復 2 周(10x10) 自然恢復 3 周(10x10)圖 1 光鏡下菌群失衡與恢復重建小鼠小腸絨毛形態(tài)改變
C1 菌群回灌 1 周(2.5x104) C2 菌群回灌 2 周(2.5x104) C3 菌群回灌 3 周(2.5x104)D1 糞便回灌 1 周(2.5x104) D2 糞便回灌 2 周(2.5x104) D2 糞便回灌 2 周(2.5x104)
【學位授予單位】:大連醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2012
【分類號】:R574
【圖文】:
132.2 菌群失衡與恢復重建對上皮細胞結構的影響經(jīng)電子顯微鏡制樣法處理樣本后在透射電子顯微鏡下進行觀察,可見正常對照組小鼠腸上皮細胞頂端的微絨毛結構完整,排列規(guī)則整齊,形成刷狀緣;細胞間連接緊密;細胞質內有大量的線粒體和粗面內質網(wǎng)存在。與正常對照組比較菌群失衡組小鼠,小腸上皮頂端的微絨毛結構完整性遭到破壞,排列不規(guī)整,部分脫落,稀疏且長短不一;細胞間連接間隙增寬;細胞內線粒體及粗面內質網(wǎng)出現(xiàn)腫脹;菌群回灌和糞便回灌組小鼠在菌群恢復過程中,腸黏膜上皮微絨毛逐漸恢復整齊,形成刷狀緣;細胞間連接間隙也隨著時間的推移逐漸恢復緊密;胞質內的內質網(wǎng)和線粒體腫脹逐漸得到緩解并慢慢恢復到正常水平。從圖片上可以看出,自然恢復 1 周(10x10) 自然恢復 2 周(10x10) 自然恢復 3 周(10x10)圖 1 光鏡下菌群失衡與恢復重建小鼠小腸絨毛形態(tài)改變
C1 菌群回灌 1 周(2.5x104) C2 菌群回灌 2 周(2.5x104) C3 菌群回灌 3 周(2.5x104)D1 糞便回灌 1 周(2.5x104) D2 糞便回灌 2 周(2.5x104) D2 糞便回灌 2 周(2.5x104)
【參考文獻】
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1 陳思
本文編號:2732979
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