【摘要】：骨髓單個核細(xì)胞(bone marrow mononuclear cells, BMMCs)移植能夠促進(jìn)組織或器官的再生及損傷的修復(fù),特別是在急性損傷肝臟的再生及修復(fù)方面可以發(fā)揮良好的治療作用；但是,在臨床實踐中這種治療潛能需要進(jìn)一步提高,才能夠使BMMCs移植治療肝臟疾病得以發(fā)揮更加重要的作用。肝細(xì)胞生長因子(hepatocyte growth factor, HGF)在肝細(xì)胞的發(fā)育過程中發(fā)揮了重要作用。在相關(guān)動物模型的研究中已經(jīng)證實：HGF能夠減輕肝臟的纖維化。為了探索聯(lián)合應(yīng)用HGF及BMMCs移植是否能夠促進(jìn)損傷肝臟的再生,我們進(jìn)行了此項實驗研究。在本實驗中,我們采用了經(jīng)典的四氯化碳腹腔注射的方法構(gòu)建了Balb/c小鼠急性肝臟損傷模型,然后將構(gòu)建好的急性肝臟損傷模型小鼠作為受體組隨機(jī)分為四組,即：①BMMCs+HGF組：急性肝臟損傷模型小鼠尾靜脈輸注經(jīng)PKH26熒光染料預(yù)先標(biāo)記的BMMC(5x106 cells/mice),同時腹腔注射HGF(50ng/kg.d×7 d);②MMCs組：急性肝臟損傷模型小鼠僅經(jīng)尾靜脈輸注PKH26熒光染料預(yù)先標(biāo)記的BMMC(5×106 cells/mice);③HGF組：急性肝臟損傷模型小鼠僅給予腹腔注射HGF (50 ng/kg.d×7d);④對照組：急性肝臟損傷模型小鼠僅給予腹腔注射0.9%生理鹽水(0.3ml/d×7 d)。將同批次健康的Balb/c小鼠作為供體組。無菌操作下采用密度梯度離心的方法分離提取BMMCs,經(jīng)PKH26熒光染料標(biāo)記后移植給受體組。然后,在移植前后的第0、1、2、3及4周分別進(jìn)行免疫組織化學(xué)檢測及免疫熒光檢測來判斷肝臟組織形態(tài)學(xué)變化；通過檢測血清生化指標(biāo)來觀察肝臟功能恢復(fù)情況；進(jìn)而分析應(yīng)用HGF與BMMCs移植在肝臟損傷修復(fù)過程中能否起到“疊加”作用。實驗結(jié)果表明：經(jīng)PKH26預(yù)標(biāo)記的BMMCs能夠在受體組的肝臟中檢測到,而且這些移植的細(xì)胞能夠同時表達(dá)核增殖抗原及白蛋白。經(jīng)體示學(xué)的方法比較證實了,BMMCs+HGF組小鼠肝臟的核增殖抗原及白蛋白的表達(dá)均較其它3組明顯增加。血清肝功能檢測證實,BMMCs+HGF組小鼠血清ALT及AST在移植后的不同時間點均較對照組明顯好轉(zhuǎn)。單因素方差分析結(jié)果表明P0.05,統(tǒng)計學(xué)上具有顯著性差異。本研究創(chuàng)新點主要是發(fā)現(xiàn)應(yīng)用HGF聯(lián)合BMMCs移植能夠促進(jìn)小鼠急性損傷肝臟再生及修復(fù)。
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號】：R575.3

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 Claudia Lange;Helge Bruns;Dietrich Kluth;Axel R Zander;Henning C Fiegel;;Hepatocytic differentiation of mesenchymal stem cells in cocultures with fetal liver cells[J];World Journal of Gastroenterology;2006年15期

2 ;Stromal cell derived factor-1 enhances bone marrow mononuclear cell migration in mice with acute liver failure[J];World Journal of Gastroenterology;2009年21期

本文編號：2731417