【摘要】： 目的 探討血小板活化因子受體(PAF-R)拮抗劑BN52021在大鼠重癥急性胰腺炎(SAP)早期病程中的作用和機(jī)制。 方法 1.用免疫組織化學(xué)染色方法研究PAF-R在Wistar大鼠胰腺的定位和分布。 2.用胰膽管插入逆行注射�；悄懰徕c制備SAP大鼠模型;用藥代動(dòng)力學(xué)方法研究BN52021治療大鼠SAP的最佳量效關(guān)系。 3.用RT-PCR和Western blot方法分別研究PAF-R和核因子κB單體(NF-κBp65) mRNA和蛋白質(zhì)在SAP大鼠胰腺組織的動(dòng)態(tài)變化以及BN52021的影響。 結(jié)果 1.冰凍切片中顯示在Wistar大鼠正常胰腺組織微血管內(nèi)皮細(xì)胞有PAF-R表達(dá);石蠟切片中顯示胰島細(xì)胞有PAF-R表達(dá),主要分布于細(xì)胞漿和細(xì)胞核,核膜著色較深,但是血管內(nèi)皮細(xì)胞著色較淺。 2.血清淀粉酶、PLA2、腹水、胰腺組織病理學(xué)和胰腺組織PAF-R mRNA表達(dá)的結(jié)果顯示在2.5 mg/kg、5.0 mg/kg、10.0 mg/kg BN52021三個(gè)劑量中,5.0mg/kg BN52021靜脈注射給Wistar大鼠治療SAP具有最佳的量效關(guān)系(P0.05);這些結(jié)果也顯示SAP模型制備是成功的。 3.PAF-R mRNA結(jié)果顯示,SAP模型(SAP組)和BN52021治療后(BN組)均是動(dòng)態(tài)變化的,早期逐漸上升,在3h達(dá)到高峰,以后逐漸降低,除1h和2h外其余各時(shí)相點(diǎn)與假手術(shù)動(dòng)物(SO組)相比有顯著性差異(P0.05),除6h外BN組與SAP組各時(shí)相點(diǎn)之間無(wú)顯著性差異;PAF-R蛋白質(zhì)結(jié)果顯示,SAP組和BN組PAF-R蛋白質(zhì)與PAF-R mRNA的變化趨勢(shì)基本是一致的,先升后降,除1h外其余各時(shí)相點(diǎn)與SO組有顯著性差異(P0.05),BN組與SAP組各時(shí)相點(diǎn)之間無(wú)顯著性差異。 4.NF-κBp65mRNA結(jié)果顯示,SAP組和BN組均是動(dòng)態(tài)變化的,呈雙峰改變,SAP組雙峰頂分別在1h和24h,BN組雙峰頂分別在1h和12h,于6h降至最低,SAP組在2h、3h、12h和24h較SO組顯著增加(P0.05),BN組在1h較SAP組顯著增加(P0.05),BN組各時(shí)相點(diǎn)較SO組顯著升高(P0.05);NF-?Bp65蛋白質(zhì)結(jié)果顯示,SAP組在1h,3h和6h較SO組顯著升高(P0.01),在2h,12h和24h較SO組也顯著升高(P0.05),BN組各時(shí)相點(diǎn)較SO組顯著升高(P0.05),在1h,3h和6h較SAP組顯著降低(P0.05)。 結(jié)論 1.研究發(fā)現(xiàn)PAF-R不僅定位分布于Wistar大鼠胰腺微血管內(nèi)皮細(xì)胞,也定位分布于其胰腺胰島細(xì)胞胞漿和細(xì)胞核內(nèi)。 2.經(jīng)胰膽管插入逆行注射�；悄懰徕c制備SAP大鼠模型是可靠的;用5.0mg/kg BN52021靜脈注射治療Wistar大鼠SAP具有最佳的量效關(guān)系。 3.PAF-R在SAP大鼠胰腺組織表達(dá)是動(dòng)態(tài)變化的,PAF-R可能參與了SAP的發(fā)病機(jī)制,對(duì)SAP病情的發(fā)生發(fā)展起一定的作用;BN52021可降低SAP血清淀粉酶和改善其病理變化,但對(duì)胰腺組織PAF-R的表達(dá)無(wú)顯著影響。分析認(rèn)為,BN52021治療SAP大鼠并不是通過(guò)調(diào)控胰腺組織PAF-R的表達(dá)量,而是通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)性抑制上升的PAF與同時(shí)表達(dá)量上升的PAF-R結(jié)合,從而影響PAF-R的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo),實(shí)現(xiàn)它的治療作用。 4.NF-kB是PAF-R信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路下游的關(guān)鍵成分。NF-kBp65在SAP大鼠胰腺組織表達(dá)是動(dòng)態(tài)變化的,NF-kBp65可能參與了SAP的發(fā)病機(jī)制,對(duì)SAP病情的發(fā)生發(fā)展起一定的作用;BN52021在早期可降低NF-κBp65蛋白質(zhì)的表達(dá),從而發(fā)揮一定的治療作用。
【學(xué)位授予單位】：第三軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2008
【分類(lèi)號(hào)】：R576
【圖文】：

胰腺冰凍切片示血管×200Fig1-1Frozensectionofpancreasinsham

圖 1-1 胰腺冰凍切片示血管×200Fig1-1 Frozen section of pancreas in shamoperation group圖 1-2 胰腺組織×200Fig1-2 Paraffin section of pancreas in shamoperation group

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2718446