【摘要】：目的： 探討雨蛙肽聯(lián)合脂多糖誘導(dǎo)小鼠重癥急性胰腺炎（severe acute pancreatitis，SAP）的方法和Treg（CD4~+CD25~+FoxP3~+T調(diào)節(jié)淋巴細(xì)胞）及IL-4(白介素-4)對重癥急性胰腺炎時枯否細(xì)胞(Kupffer cells)M2極化狀態(tài)的調(diào)節(jié)作用，并對二者的作用進(jìn)行比較。 方法： 1.正常組為小鼠腹腔注射生理鹽水（NS）； SAP組為腹腔注射雨蛙肽聯(lián)合脂多糖。SAP組分三組：造模后9h、12h和24h組，比較該三組與正常組胰腺組織病理變化。2.比較正常組與模型組（SAP8h+NS組）肝臟炎癥因子的基因表達(dá)水平。3.模型組按照尾靜脈注射溶液的不同分三組：①重癥急性胰腺炎生理鹽水對照組（SAP16h+NS組）；②重癥急性胰腺炎IL-4治療組（SAP16h+IL-4組）；③重癥急性胰腺炎Treg治療組（SAP16h+Treg組）。實時熒光定量RT-PCR檢測肝臟炎癥因子IL-1β、TNF-α和IL-10mRNA表達(dá)水平；免疫熒光技術(shù)檢測肝臟枯否細(xì)胞不同狀態(tài)的標(biāo)志性蛋白CD163、CCR7的表達(dá)。 結(jié)果： (1) HE病理結(jié)果證實造模24h后胰腺細(xì)胞水腫、間質(zhì)水腫，浸潤的炎癥細(xì)胞較其他組明顯增多，并可見部分胰腺腺細(xì)胞片狀壞死。(2)模型組IL-1β、TNF-α mRNA的表達(dá)顯著高于正常組（P0.1）。(3)重癥急性胰腺炎Treg治療組和重癥急性胰腺炎IL-4治療組IL-1β mRNA的表達(dá)顯著低于重癥急性胰腺炎生理鹽水對照組（P0.1)）；重癥急性胰腺炎Treg治療組IL-1β mRNA的表達(dá)顯著低于重癥急性胰腺炎IL-4治療組（P0.05）；重癥急性胰腺炎Treg治療組、重癥急性胰腺炎IL-4治療組TNF-α mRNA的表達(dá)顯著低于重癥急性胰腺炎生理鹽水對照組（P0.1）；重癥急性胰腺炎Treg治療組TNF-αmRNA的表達(dá)顯著低于重癥急性胰腺炎IL-4治療組（P0.1）；重癥急性胰腺炎IL-4治療組的IL-10mRNA的表達(dá)顯著高于重癥急性胰腺炎生理鹽水對照組和重癥急性胰腺炎Treg治療組（P0.1）。 結(jié)論： 雨蛙肽聯(lián)合脂多糖成功誘導(dǎo)小鼠SAP。由于枯否細(xì)胞在SAP病情發(fā)展中起著重要作用，IL-4和Treg促進(jìn)枯否細(xì)胞M2極化，下調(diào)了TNF-α、IL-1β和CCR7，上調(diào)了IL-10和CD163，提示IL-4和Treg對SAP具有一定的治療作用。
【學(xué)位授予單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R576
【圖文】：

華 中 科 技 大 學(xué) 碩 士 學(xué) 位 論 文結(jié)果造模 24h 后重癥急性胰腺炎動物模型成功光鏡下正常組為正常胰腺組織。造模后 9h 組胰腺水腫，炎癥細(xì)胞浸潤；12h組胰腺細(xì)胞水腫明顯，炎癥細(xì)胞浸潤增多，24h 組胰腺細(xì)胞水腫，間質(zhì)水腫，炎癥細(xì)胞浸潤明顯增多，部分腺細(xì)胞片狀壞死。證明腹腔注射雨蛙肽聯(lián)合脂多糖24h 后 SAP 模型成功 (圖 1)。

華 中 科 技 大 學(xué) 碩 士 學(xué) 位 論 文組肝臟炎癥因子表達(dá)上調(diào)1）模型組 IL-1β、TNF-α 的水平明顯升高，與正常組相比差異顯著[I27 01±0.004 19VS 0.000 56±0.000 15，P<0.05)、TNF-alpha (0.022 56±0 0.000 31±0.000 07，P<0.1)]。

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本文編號：2715743