【摘要】： 目的：研究TAP直接作用于大鼠胰腺腺泡細胞時是否誘導(dǎo)了HMGB1的表達釋放,從細胞領(lǐng)域初步探討急性胰腺炎早期的TAP與晚期的HMGB1之間是否存在著正向的必然聯(lián)系,以及EP對HMGB1的抑制作用。 方法：將12只SD大鼠處死后,取出胰腺分離胰腺腺泡細胞,將所得細胞懸液等分為3組,對照組(A組)、TAP組(B組)、EP組(C組)。B組、C組加入不同劑量TAP(lnmol/L、2nmol/L、3nmol/L),C組同時加入EP(28mmol/L),在3h、6h、12h、24h分別取細胞采樣。實時定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測HMGB1mRNA表達；蛋白印跡法(Western-blot)檢測HMGB1蛋白質(zhì)的表達。并進行HMGB1mRNA、蛋白的表達與TAP濃度及作用時間的相關(guān)性分析。 結(jié)果：與A組比較,B組、C組各樣品中HMGB1mRNA、蛋白表達隨TAP濃度升高上調(diào)；與B組比較,C組各樣品中HMGB1mRNA、蛋白表達下調(diào)(P0.05)；B組組內(nèi)比較顯示,各樣品中HMGB1mRNA、蛋白表達隨TAP濃度升高及作用時間延長而升高(P＜0.05),且以12h時升高顯著(P0.01)。HMGB1mRNA、蛋白的表達與TAP濃度及作用時間呈高度正相關(guān)(0.7≤r1,P0.05)。 結(jié)論：TAP可直接誘導(dǎo)胰腺腺泡細胞內(nèi)HMGB1的釋放。急性胰腺炎早期的TAP與晚期的HMGB1之間存在著時間與濃度的正向聯(lián)系。EP可抑制HMGB1的釋放。
【圖文】：

1胰腺腺泡細胞的純度及存活率使用膠原酶法分離胰腺組織，獲得細胞懸液，使用離心法純化腺泡細胞，不同時間鏡下觀察細胞形態(tài)并照相(如圖1一5)。圖1分離提純后的大鼠胰腺腺泡細胞顯微照相(40倍) Figure1MicrograPhSofisolatedmousePancreatieaeini(4OX)圖2分離提純后的人鼠胰腺腺泡細胞顯微照相(200倍) Figure2MierographSofisolatedmousepanereatieaeini(200又).

膠原酶法分離胰腺組織，獲得細胞懸液，使用離心法純化腺下觀察細胞形態(tài)并照相(如圖1一5)。圖1分離提純后的大鼠胰腺腺泡細胞顯微照相(40倍)Figure1MicrograPhSofisolatedmousePancreatieaeini(4OX)
【學(xué)位授予單位】：遵義醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號】：R576

【參考文獻】

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1 王連才;馬清涌;陳香麗;;一種改進的簡便經(jīng)濟的大鼠胰腺腺泡細胞分離提純方法[J];第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2008年03期

2 曾自立;加鹽信行;津山新一郎;井通田香熾;村田長芳;;用形態(tài)學(xué)方法研究出生后大鼠胰腺泡細胞的分化[J];廣東解剖學(xué)通報;1991年02期

3 劉澤軍,魏明競;淀粉酶測定進展[J];國外醫(yī)學(xué).臨床生物化學(xué)與檢驗學(xué)分冊;1992年01期

4 邊興艷;MTT比色法及其應(yīng)用[J];國外醫(yī)學(xué)(臨床生物化學(xué)與檢驗學(xué)分冊);1998年02期

5 張召輝,李璽,夏安周,路逵陽,陳復(fù)興;胰腺組織單細胞懸液制備方法的比較研究[J];河北醫(yī)學(xué);2005年02期

6 姚詠明,盛志勇;高遷移率族蛋白-1在膿毒癥發(fā)病中的作用與意義[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2002年09期

7 于麗敏,郝立宏,盧步峰,楊佩滿;臺盼蘭排染法用于細胞凋亡或壞死觀察的可靠性研究[J];解剖科學(xué)進展;1997年03期

8 冷斌;劉洪臣;鄂玲玲;劉宇;吳霞;;人牙齦成纖維細胞原代培養(yǎng)方法的比較研究[J];口腔頜面修復(fù)學(xué)雜志;2007年02期

9 王敬春;苗術(shù);黃海濤;;流式細胞儀在細胞凋亡檢測中的應(yīng)用[J];齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2007年08期

10 高利平,方海立;鈣超載與細胞損傷[J];四川醫(yī)學(xué);2004年09期

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1 吳杭格;新生豬胰腺干細胞的分離培養(yǎng)與鑒定[D];吉林農(nóng)業(yè)大學(xué);2008年

2 龍麗蕓;人外泌汗腺上皮細胞原代培養(yǎng)的改良[D];南昌大學(xué);2009年

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本文編號：2707723