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大鼠胰腺腺泡細胞TAP與HMGB1表達的相關(guān)性

發(fā)布時間:2020-06-11 09:46
【摘要】: 目的:研究TAP直接作用于大鼠胰腺腺泡細胞時是否誘導(dǎo)了HMGB1的表達釋放,從細胞領(lǐng)域初步探討急性胰腺炎早期的TAP與晚期的HMGB1之間是否存在著正向的必然聯(lián)系,以及EP對HMGB1的抑制作用。 方法:將12只SD大鼠處死后,取出胰腺分離胰腺腺泡細胞,將所得細胞懸液等分為3組,對照組(A組)、TAP組(B組)、EP組(C組)。B組、C組加入不同劑量TAP(lnmol/L、2nmol/L、3nmol/L),C組同時加入EP(28mmol/L),在3h、6h、12h、24h分別取細胞采樣。實時定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測HMGB1mRNA表達;蛋白印跡法(Western-blot)檢測HMGB1蛋白質(zhì)的表達。并進行HMGB1mRNA、蛋白的表達與TAP濃度及作用時間的相關(guān)性分析。 結(jié)果:與A組比較,B組、C組各樣品中HMGB1mRNA、蛋白表達隨TAP濃度升高上調(diào);與B組比較,C組各樣品中HMGB1mRNA、蛋白表達下調(diào)(P0.05);B組組內(nèi)比較顯示,各樣品中HMGB1mRNA、蛋白表達隨TAP濃度升高及作用時間延長而升高(P<0.05),且以12h時升高顯著(P0.01)。HMGB1mRNA、蛋白的表達與TAP濃度及作用時間呈高度正相關(guān)(0.7≤r1,P0.05)。 結(jié)論:TAP可直接誘導(dǎo)胰腺腺泡細胞內(nèi)HMGB1的釋放。急性胰腺炎早期的TAP與晚期的HMGB1之間存在著時間與濃度的正向聯(lián)系。EP可抑制HMGB1的釋放。
【圖文】:

腺泡細胞,顯微照相,分離提純


1胰腺腺泡細胞的純度及存活率使用膠原酶法分離胰腺組織,獲得細胞懸液,使用離心法純化腺泡細胞,不同時間鏡下觀察細胞形態(tài)并照相(如圖1一5)。圖1分離提純后的大鼠胰腺腺泡細胞顯微照相(40倍) Figure1MicrograPhSofisolatedmousePancreatieaeini(4OX)圖2分離提純后的人鼠胰腺腺泡細胞顯微照相(200倍) Figure2MierographSofisolatedmousepanereatieaeini(200又).

腺泡細胞,顯微照相,分離提純,離心法


膠原酶法分離胰腺組織,獲得細胞懸液,使用離心法純化腺下觀察細胞形態(tài)并照相(如圖1一5)。圖1分離提純后的大鼠胰腺腺泡細胞顯微照相(40倍)Figure1MicrograPhSofisolatedmousePancreatieaeini(4OX)
【學(xué)位授予單位】:遵義醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2010
【分類號】:R576

【參考文獻】

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本文編號:2707723

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