【摘要】：引言： 氧化應(yīng)激與多種惡性腫瘤的發(fā)生有關(guān)，大量研究表明它是慢性乙型肝炎病毒（HBV）和丙型肝炎病毒（HCV）感染、酒精、金屬蓄積（如鐵、銅）、非酒精性脂肪性肝炎（NASH）等不同病因?qū)е赂渭毎℉CC）發(fā)生的共同機制，氧化應(yīng)激誘導的ε-dA加合物過多生成可能促進慢性肝臟疾病患者HCC的發(fā)生。 目的： (1)檢測HCC及鄰近癌旁肝組織的氧化應(yīng)激狀態(tài)； (2)檢測對照肝組織、鄰近癌旁肝組織及HCC組織中ε-dA的表達； (3)評估ε-dA與p53蛋白表達的關(guān)系； (4)評估癌旁肝組織中ε-dA的表達是否與肝臟的炎癥活性和纖維化程度有關(guān)。 方法： 對32例HCC患者的HCC組織和（或）癌旁肝組織的總抗氧化能力（T-AOC）、總超氧化物歧化酶（SOD）活力、還原型谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）等氧化應(yīng)激指標進行檢測；用免疫組織化學方法檢測對照肝組織、癌旁肝組織和HCC組織中ε-dA、p53蛋白和增殖細胞核抗原（PCNA）的表達；對癌旁肝組織進行炎癥和纖維化評分。 結(jié)果： HCC組織的T-AOC和總SOD活力均低于癌旁肝組織（p＜0.05vs.p＜0.0001），但HCC組織的GSH和MDA含量與癌旁肝組織無明顯差異；ε-dA在HCC組織中的陽性表達率明顯高于對照肝組織（47.6±20.6%vs.7.9±7.5%，p＜0.0001）和癌旁肝組織（47.6±20.6%vs.29.4±15.8%，p＜0.001）；HCC組織的T-AOC、總SOD活力和ε-dA的表達均與肝癌細胞分化程度有關(guān)；HCC組織中ε-dA與p53蛋白的表達有明顯相關(guān)性(r=0.5162,p＜0.01)；癌旁肝組織中ε-dA的表達與肝臟的炎癥活性及纖維化程度有關(guān)；HCC組織中PCNA的陽性表達率（47.6±10.9%）顯著高于癌旁肝組織（34.1±8.2%，p＜0.0001）和對照肝組織（25.8±7.7%，，p＜0.0001）。 結(jié)論： 氧化應(yīng)激誘導ε-dA加合物的過多生成，它可能通過誘導p53蛋白突變、促進細胞惡性增殖，進而促進HCC的發(fā)生；ε-dA加合物可以在慢性肝炎和肝纖維化"肝硬化組織中持續(xù)積聚，這可能增加具有癌變傾向的慢性肝臟疾病患者HCC的發(fā)生風險。
【圖文】：

華 中 科 技 大 學 碩 士 學 位 論 文肪酸 反 應(yīng)， 生成 脂 質(zhì)過 氧 化產(chǎn) 物 （如 4- H NE 、M D A） ， 4- H NE 與脫 氧 腺苷 、 脫氧 胞 苷 反 應(yīng)生 成ε - DN A 加 合 物ε - dA 和ε - dC [8 ]。在 大 腸桿 菌 和哺 乳 動物 細 胞( 如 猿猴 腎 細胞 ) 中的 研 究發(fā) 現(xiàn) [9 ] ，ε - DN A 加合 物 具有 高 度 的 致突 變 特 性（ 如 誘 導 p5 3 突 變） ，主 要 引起 堿 基 對 替換 突 變。 例 如 ， ε - dA 可 以 引 起A T →G C 轉(zhuǎn) 換突 變 、A T →T A 和A T → CG 顛 換突 變 [1 0 ,1 1 ] ；ε- dC 可以 引 起C G →T A 轉(zhuǎn)換 突 變 、C G →A T 顛 換突 變 [1 2 ,1 3 ]。將 ε - dA 整 合 到H e La 細胞 、 29 3細 胞 （ 人 胚 腎上 皮 細胞 ） 及 大 腸癌 H C T 1 1 6 細胞 的 任意 一 條D N A 單 鏈中 ，都 可 以 觀 察到 相 似的 突 變， 而 且在 He La 細 胞 中ε - dA 比 8- 氧 -脫 氧 鳥苷 （ 8- o xo - dG ， 一種 氧 化 性 DN A 損 傷 標記 物 ） 具有 更 強的 致突 變 能 力 [ 1 4] 。這 些 突 變可 以 增 加 基因 組 的 不 穩(wěn)定 性 ， 對惡 性 腫瘤 的 發(fā) 生具 有 促 進作 用 [1 5] （見 圖 1） ， 這 可 能 是氧 化 應(yīng)激 促 進H C C發(fā) 生 的重 要 機制 之一 。

枸櫞 酸 鈉緩 沖 液（ 0 .0 1M ，p H 6 .0 ） 的 配 制 ：枸 櫞 酸三 鈉 3g ， 檸 檬 酸 0. 4g ， 雙 蒸 水 1L ，充分 混勻 。 3． 病 理 學 染 色 及 評 分通過 HE 染 色和 M a s so n染 色 對組 織 標 本進 行 病理 學分 析 。根 據(jù)H C C 的 病理 分 化 程 度， 將 腫 瘤分 為 2 組 [1 9] ：組 Ⅰ 包 括高 分 化、 高 - 中 分 化 和中 分 化 ，組 Ⅱ 包 括中 - 低 分化 和 低分 化 。另 外， 根 據(jù)D e s me t 慢性 肝 炎 評 分系 統(tǒng) 對癌 旁肝 組 織的 炎癥 活 性和 纖維 化 程 度 進行 評 分 [2 0] （見 圖 2 ）。 炎 癥 評分 （ A） 如 下 ： 0分 ， 輕 微 慢性 肝 炎 ；1 分 ， 輕度 慢 性 肝炎 ；2 分 ，中 度 慢 性 肝炎 ； 3 分 ，重 度 慢 性肝 炎 。肝 纖維 化 評 分 （F ） 如 下 ：0 分 ， 無肝纖 維 化； 1 分 ， 匯 管區(qū) 纖 維化 但無 纖 維 間 隔形 成 ；2 分， 匯 管 區(qū) 纖維 化 且 有 少量 纖 維 間隔 形成 ； 3分 ， 大 量纖 維 間隔 形成 但 無 肝 硬化 ； 4分 ，肝 硬 化 。 我們 根 據(jù) 炎 癥評 分 ， 將癌 旁肝 組 織分 為 2 組 ：組 Ⅰ 包括 A0 ＋ A 1 ，組 Ⅱ 包括 A2 ＋ A3 ；根 據(jù) 肝纖 維化 評 分 ， 將癌 旁 肝 組織 分 為 2組 ： 組 Ⅰ 包括 F 0 ＋F 1 ＋F 2 ， 組 Ⅱ 包括 F 3 ＋F 4 。
【學位授予單位】：華中科技大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2012
【分類號】：R575

【共引文獻】

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1 Radan Bruha;Karel Dvorak;Jaromir Petrty;;Alcoholic liver disease[J];World Journal of Hepatology;2012年03期

2 ;Risk factors for alcohol-related liver injury in the island population of China: A population-based case-control study[J];World Journal of Gastroenterology;2008年14期

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1 李愛華;白樺脂醇對酒精性脂肪性肝病大鼠的治療作用及機制研究[D];吉林大學;2011年

2 孫平;維生素D受體基因多態(tài)性與酒精性肝病相關(guān)性研究[D];蘭州大學;2009年

3 王畢娟;酒精性肝病患者淋巴細胞染色體損傷與氧化應(yīng)激的關(guān)系[D];蘭州大學;2010年

本文編號：2705865