【摘要】： 第一部分肝纖維化實驗模型的建立 目的構建穩(wěn)定、可靠、肝纖維化實驗動物模型,研究模型肝臟病變的進展情況和常規(guī)影像學表現(xiàn),為影像學功能成像定量評價做準備。 方法50只雄性清潔級Sprague-Dawley鼠,30只普通級雄性新西蘭大白兔,隨機分為實驗組(新西蘭大白兔n=20；SD大鼠n=40)和對照組(新西蘭大白兔n=10;SD大鼠n=10)。采用CCL4(四氯化碳)腹腔注射法誘導肝纖維化鼠模型,血吸蟲尾蚴腹貼法誘導肝纖維化兔模型。肝纖維化鼠模型在20W時,肝纖維化兔模型在8W、10W、12W分別行MDCT和MRI檢查。以HE染色、Masson三色染色、透射電鏡觀察兩種肝纖維模型肝臟病變,并對其纖維化程度和炎癥進行分級分期。 結果肝纖維化兔模型4W時僅肝臟觀察到炎性浸潤,6W時出現(xiàn)急性蟲卵結節(jié),8W時觀察到肝纖維化膠原沉積,10W及12W膠原沉積明顯加重。病理學證實兩種肝纖維化模型成功建立,兩種模型纖維化程度相似,但是炎癥評分肝纖維化鼠明顯高于肝纖維化兔,具有統(tǒng)計學意義。肝纖維化鼠鏡下脂肪變較肝纖維化兔明顯。MDCT和MRI掃描可以顯示兩種肝纖維化模型肝體積縮小、腹水等間接征象。MDCT后處理重建計算肝臟體積,兩種模型組體積小于對照組,并具有統(tǒng)計學差異。肝纖維化兔模型MRI掃描多次觀察發(fā)現(xiàn)門脈分支擴張、門脈壓力增高表現(xiàn),并隨時間而進展加重。 結論結合兩種肝纖維化模型,有助于了解復雜的人類自然病程。MDCT和MRI掃描可以觀察到肝纖維化模型肝體積縮小、腹水、門脈壓力增高等間接表現(xiàn),但無法提供定量評價指標。 第二部分兩種肝纖維化動物模型DTI定量研究 目的兩種肝纖維模型行DTI掃描并與病理分級行相關分析,初步探討了DTI在肝纖維化定量研究的可行性及應用價值。 方法CC14誘導肝纖維化SD大鼠模型10只,同期對照5只及血吸蟲腹貼法誘導新西蘭大白兔肝纖維化模型18只,同期對照10只。肝纖維化鼠模型在造模后20W及斷頭處死后4h內(nèi)離體肝組織,肝纖維化兔模型在造模后8W、10W、12W分別行DTI掃描(EPI, TR/TE=1600/68.1,6個方向,b=500s／mm2),完成掃描后以HE染色、Masson三色染色、透射電鏡觀察兩種肝纖維模型肝臟病變,并對其纖維化程度和炎癥進行分級分期。掃描圖像經(jīng)AW4.2工作站處理,計算并分析肝纖維化鼠模型和對照的在體和離體ADC值和各向異性值(FA),肝纖維化兔模型各個時期的ADC值和各向異性值(FA),并與病理分級行相關性分析,采用SSPS13.0進行統(tǒng)計分析,顯著水平取0.05。 結果病理學證實兩種肝纖維化模型均發(fā)生肝纖維化改變,兩種模型纖維化程度分布相似,但是炎癥評分肝纖維化鼠明顯高于肝纖維化兔,具有統(tǒng)計學意義,肝纖維化鼠鏡下脂肪變較肝纖維化兔明顯。兩種肝纖維化模型中ADC值和FA值改變一致,均表現(xiàn)為ADC值較對照組降低,FA值較對照組升高。具有統(tǒng)計學意義指標為肝纖維化鼠在體ADC值,肝纖維化兔ADC值。肝纖維化兔模型ADC值隨著模型時間進展而減低,并且不同病理分級之間差別具有統(tǒng)計學意義。兩種肝纖維化模型ADC值與肝纖維化分級之間存著負相關,并具有統(tǒng)計學意義。(肝纖維化鼠在體ADCr=-0.607P=0.016；肝纖維化兔,r=-0.765 P=0.01) 結論兩種肝纖維化模型病理分期與ADC值均有相關性,ADC值可成為定量評價肝纖維化指標。 第三部分兩種肝纖維化動物模型1H-MRS定量研究 目的兩種肝纖維模型行1H-MRS掃描并與病理分級行相關分析,初步探討了1H-MRS在肝纖維化定量研究的可行性及應用價值。 方法CC14誘導肝纖維化SD大鼠模型10只,同期對照5只及血吸蟲腹貼法誘導新西蘭大白兔肝纖維化模型18只,同期對照10只。肝纖維化鼠模型在造模后20W,肝纖維化兔模型在造模后8W、10W、12W分別行1H-MRS掃描(PRESS, TR/TE=1500/35, FOV=16×16cm, NEX8,不抑水,時間2分12秒),完成掃描后以HE染色、Masson三色染色、透射電鏡觀察兩種肝纖維模型肝臟病變,并對其纖維化程度和炎癥進行分級分期。掃描圖像經(jīng)sage后處理,分別測量兩種肝纖維化模型糖原和葡萄糖復合物(Glyu)、膽堿(Cho)、谷氨酰胺和谷氨酸復合物(Glx)、甘油三酯及其化合物(Lip)、水(Water)的平均峰高,并計算Fat%百分比[FAT=Lip/(lip+water)×100%],并與病理分級行相關性分析,采用SSPS13.0進行統(tǒng)計分析,顯著水平取0.05。 結果病理學證實兩種肝纖維化模型均發(fā)生肝纖維化改變,兩種模型纖維化程度分布相似,但是炎癥評分肝纖維化鼠明顯高于肝纖維化兔,具有統(tǒng)計學意義,一肝纖維化鼠鏡下脂肪變較肝纖維化兔明顯。兩種肝纖維化模型MRS均可以觀察到Cho峰隨著纖維化分期升高表現(xiàn),Cho峰高在兩種模型中均有統(tǒng)計學差異,并與肝纖維化分級呈正相關(肝纖維化鼠r=0.642,P0.01；肝纖維化兔,r=0.643,P0.01)。肝纖維化鼠模型Fat高于肝纖維化兔。 結論兩種肝纖維化模型病理分期與Cho峰高均有相關性,Cho峰可成為定量評價肝纖維化指標。 第四部分兩種肝纖維化動物模型T2*MAP定量研究 目的兩種肝纖維模型行T2*Map掃描并火焰原子光譜法測定肝鐵含量相對照,并與病理分級行相關分析,初步探討了T2*Map在肝纖維化定量研究的可行性及應用價值。 方法CC14誘導肝纖維化SD大鼠模型10只,同期對照5只及血吸蟲腹貼法誘導新西蘭大白兔肝纖維化模型18只,同期對照10只。肝纖維化鼠模型在造模后20W,肝纖維化兔模型在造模后8W、10W、12W分別行T2*Map掃描(GRE,TR=100,FA=40,FOV=10×10cm,矩陣160×128,NEX6),完成掃描后以HE染色、Masson三色染色、透射電鏡觀察兩種肝纖維模型肝臟病變,并對其纖維化程度和炎癥進行分級分期。掃描圖像經(jīng)AW4.2工作站后處理,分別測量兩種肝纖維化R2*值并與火焰原子光譜法測定肝鐵含量相對照,并與病理分級行相關性分析,采用SSPS13.0進行統(tǒng)計分析,顯著水平取0.05。 結果病理學證實兩種肝纖維化模型均發(fā)生肝纖維化改變,兩種模型纖維化程度分布相似,但是炎癥評分肝纖維化鼠明顯高于肝纖維化兔,具有統(tǒng)計學意義,肝纖維化鼠鏡下脂肪變較肝纖維化兔明顯。采用Spearman's法對肝鐵鐵含量和R2*值行相關性分析,兩者呈明顯正相關,r=0.966,P0.01,肝纖維化鼠模型肝鐵含量明顯高于肝纖維化兔模型,而兩者的對照組差別不大。兩種肝纖維化模型R2*值較對照升高,并具有統(tǒng)計學意義。肝纖維化兔R2*值隨模型進展時間升高,并與肝纖維化分級呈正相關(r=0.807,P0.01)。 結論兩種肝纖維化模型R2*值較對照升高,R2*值可成為定量評價肝纖維化模型鐵沉積指標。肝纖維化鼠模型肝鐵含量較肝纖維化兔模型高,可能與其炎癥和脂肪變程度較重相關。 第五部分T2*MAP定量研究的臨床初步應用 目的利用T2*Map掃描研究肝鐵含量并與火焰原子光譜法測定肝鐵含量相對照,初步探討了T2*Map對肝鐵含量進行定量研究的可行性及應用價值。 方法肝內(nèi)占位26例患者術前三天內(nèi)行T2*Map掃描(FGRE, TR=100, FA=40,FOV=40×40cm,層厚7mm,層間距l(xiāng)mm,矩陣160×128,NEX2)。掃描圖像經(jīng)AW4.2工作站后處理,分別測量肝內(nèi)腫瘤及腫瘤旁肝組織R2*值并與火焰原子光譜法測定腫瘤旁肝組織鐵含量相對照。采用SSPS13.0進行統(tǒng)計分析,顯著水平取0.05。 結果術后病檢證實原發(fā)性肝癌23例(中低分化11例,中分化8例,中高分化4例),血管瘤1例,局灶性結節(jié)增生2例。采用Spearman法對組織鐵含量和R2*值行相關性分析,兩者呈正相關(r=0.567,P=0.003)。肝癌患者癌旁肝組織的肝鐵含量明顯高于良性病變患者,但無統(tǒng)計學意義。肝癌組織的R2*低于癌旁組織,具有統(tǒng)計學意義。原發(fā)性肝癌病理分級之間的R2*值的差異,無統(tǒng)計學意義。 結論R2*值可成為定量評價肝鐵沉積指標。肝癌組織的R2*值低于癌旁組織,可作為鑒別肝內(nèi)占位的量化指標之一。
【圖文】：

華中科技大學博士學位論文分期間無相關(FAr=0.363P=0.184，離體FA廠0.364P=0.182)。表2肝纖維化鼠肝臟的ADC值(x10一3mmZ/s)和FA值模型F值t值P值.0八，

本文編號：2705364