【摘要】：前言 重型肝炎的預(yù)后差,病死率高,肝性腦病是嚴(yán)重的并發(fā)癥,其中伴有不同程度的腦水腫,可直接導(dǎo)致死亡。但合并腦水腫的發(fā)生機(jī)制不很清楚,其中血腦屏障滲透性的增高是主要的表現(xiàn),具體發(fā)生機(jī)制有待深入的研究。 實(shí)驗(yàn)材料與方法 重型肝炎組:29例患者臨床死亡后經(jīng)肝組織學(xué)檢查證實(shí)為重型肝炎。對(duì)照組:20例為交通意外死亡者,經(jīng)尸檢確認(rèn)不存在嚴(yán)重的肝組織炎癥。 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:雄性Balb/c小鼠,6-8周齡,體重18-22g,SPF級(jí),由中國醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物中心提供。 實(shí)驗(yàn)方法 腦組織HE染色,光鏡下觀察腦組織病理形態(tài)學(xué)變化及腦組織水腫程度分級(jí)。電鏡下觀察腦組織BBB的超微結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。 重型肝炎患者腦組織TJ蛋白ZO-1免疫組織化學(xué)染色。 實(shí)驗(yàn)性Balb/c小鼠急性肝壞死后腦組織TJ蛋白ZO-1免疫組織化學(xué)染色、Western blot方法檢測(cè)腦組織ZO-1的相對(duì)含量和Real Time QRTPCR方法檢測(cè)ZO-1 mRNA的相對(duì)含量。 TNFα干預(yù)后檢測(cè)實(shí)驗(yàn)性Bslh/c小鼠急性肝壞死后腦組織上述相同內(nèi)容的變化。
【圖文】：

上述免疫組織化學(xué)染色結(jié)果經(jīng)圖象分析系統(tǒng)測(cè)得光密度值(OD值)，與正常對(duì)照組進(jìn)行均數(shù)比較后顯示，重型肝炎患者腦組織20一1的陽性顯色減弱，有統(tǒng)計(jì)學(xué)上的差異(圖1)，P<0.01。Balb/C小鼠腦組織20一1蛋白的免疫組化:NS組中可見到幾乎整張切片上，沿血管EC內(nèi)膜或胞漿內(nèi)很強(qiáng)的陽性反應(yīng)。肝衰竭組中，2小時(shí)血管內(nèi)陽性染色明顯減弱，6和9小時(shí)在整張切片上未見到棕褐色染色(照片4A、4B)。圖象分析系統(tǒng)測(cè)得光密度值(OD值)，與正常對(duì)照組進(jìn)行均數(shù)比較后顯示，F(xiàn)HF小鼠腦組織20一1的陽性顯色減弱，有統(tǒng)計(jì)學(xué)上的差異(圖2)

225KDa處有明顯的條帶，在肝衰竭組中，20一1蛋白的表達(dá)減弱，h2時(shí)為0.77土0.03，在6h和gh時(shí)更為明顯(分別為0.54土0.07和0.44土0.06)，各時(shí)間點(diǎn)較對(duì)照組均有顯著性差異(P<0.01)(圖3)。圖3各組不同時(shí)間腦組織20一1蛋白相對(duì)含量4.20一1mRNA的表達(dá)電泳結(jié)果和OD值結(jié)果顯示，從組織樣品中提取出的To以NRA純度較好。A260/A280約2.0左右。R械T汕eCPR檢測(cè)結(jié)果顯示，以構(gòu)建的NRA作為標(biāo)準(zhǔn)品可以得到較好的擴(kuò)增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線和融解曲線，標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)大于0.98，可以在寬廣的范圍內(nèi)進(jìn)行準(zhǔn)確定量，擴(kuò)增效率0.8<e<1.;2融解曲線峰形單一，mT值在87土1之間，說明反應(yīng)特異性好，陰性對(duì)照未檢出，，說明反應(yīng)體系無污染(圖4A、4B)。RealTimeCPR檢測(cè)結(jié)果顯示
【學(xué)位授予單位】：中國醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2006
【分類號(hào)】：R575.3

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本文編號(hào)：2699926