【摘要】：腸易激綜合征(IBS)和炎癥性腸病(IBD,包括潰瘍性結(jié)腸炎UC和克羅恩病CD)均為常見的人類腸道疾病,病因至今未明。盡管它們?cè)诩膊∑鹨�、發(fā)病機(jī)制及臨床癥狀和治療上有較大差別,但兩者與腸道菌群之間都有著密切不可分的關(guān)系。本研究利用基于16S rDNA的變性梯度凝膠電泳(DGGE)分析患者與健康人糞便樣品中優(yōu)勢(shì)菌群相似度及優(yōu)勢(shì)菌的種類和數(shù)量,以Shannon多樣性指數(shù)和均勻度指數(shù)評(píng)估患者糞便菌群結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性；通過相對(duì)定量Real-time PCR技術(shù)分析研究糞便中與兩種疾病發(fā)生或癥狀可能相關(guān)的11種細(xì)菌(雙歧桿菌、彎曲桿菌、球形梭菌、脫硫弧菌、腸球菌、大腸桿菌、普拉梭菌、乳桿菌、瘤胃球菌、韋榮氏球菌、鏈狀雙歧桿菌)的含量；測(cè)定患者和健康人糞便樣品中乙酸、丙酸、丁酸、異丁酸和異戊酸等5種短鏈脂肪酸(SCFA)含量,分析其與疾病的相關(guān)性。IBS患者糞便優(yōu)勢(shì)菌群與健康人個(gè)體間存在較大的差異�；颊呷后w內(nèi)的個(gè)體間優(yōu)勢(shì)菌群相似度(20.3%-60.2%)略高于健康人群體(9.5%～65.8%),有“趨同”現(xiàn)象,但患者與健康人群體間個(gè)體的相似度(7.0%-54.1%)較低；活動(dòng)期IBS患者糞便優(yōu)勢(shì)菌群的多樣性和均勻度指數(shù)(分別為1.89和0.65)均低于健康人(分別2.32和0.77),差異極顯著(P0.01),菌群穩(wěn)定性差；優(yōu)勢(shì)菌種數(shù)與健康人無明顯差異,但優(yōu)勢(shì)菌總量極顯著減少(P0.001)�；颊叽嬖趪�(yán)重的腸道菌群失調(diào)現(xiàn)象�；颊呒S便菌群中的雙歧桿菌顯著減少(P0.01),鏈狀雙歧桿菌和乳桿菌含量略高于健康人；與SCFAs代謝有關(guān)的普拉梭菌、瘤胃球菌、韋榮氏球菌等菌種均有顯著減少(P0.05)；與H2S代謝有關(guān)的脫硫弧菌數(shù)量明顯低于健康人(P0.01)；彎曲桿菌、腸球菌、大腸桿菌、球形梭菌等條件致病菌無過度生長現(xiàn)象。我們推測(cè),IBS發(fā)生與條件致病菌過度生長無關(guān),可能與菌群失調(diào)相關(guān),有益菌大量減少及SCFAs代謝量降低可能是IBS發(fā)生的重要因素。UC患者與健康人個(gè)體間的優(yōu)勢(shì)菌群結(jié)構(gòu)相似度(3.0%-50.1%)低于患者群體內(nèi)相似度(5.5%-69.2%),更遠(yuǎn)低于健康人群體內(nèi)相似度(17.7%～80.1%),患者優(yōu)勢(shì)菌群結(jié)構(gòu)存在“分支”現(xiàn)象�；颊呒S便優(yōu)勢(shì)菌群多樣性和均勻度指數(shù)(分別為2.54和0.92)均顯著低于健康人個(gè)體(分別為2.83和0.94),菌群結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定；優(yōu)勢(shì)菌種類顯著減少,優(yōu)勢(shì)菌總量有大幅下降現(xiàn)象(P=10-6,α=0.01)�；颊叽嬖跇O為嚴(yán)重的腸道菌群失調(diào)現(xiàn)象�；颊呒S便菌群中雙歧桿菌顯著減少,但乳桿菌和鏈狀雙歧桿菌無明顯變化；未發(fā)現(xiàn)有彎曲桿菌、大腸桿菌、球形梭菌和腸球菌等條件致病菌數(shù)量上的顯著增加,但患者優(yōu)勢(shì)菌群整體數(shù)量呈大幅下降,上述細(xì)菌在菌群中所占比例可能會(huì)有較大的增加；SCFAs代謝相關(guān)細(xì)菌普拉梭菌、瘤胃球菌等絕對(duì)數(shù)量顯著減少,韋榮氏球菌也略低于健康人,對(duì)SCFA產(chǎn)量會(huì)有較大的影響。我們推測(cè),菌群嚴(yán)重失調(diào)所導(dǎo)致的菌群整體數(shù)量大幅下降、雙歧桿菌等有益菌大量減少、條件致病菌相對(duì)含量增加及SCFAs在結(jié)腸內(nèi)代謝量的減少可能與UC發(fā)生相關(guān)。CD患者群體內(nèi)的糞便優(yōu)勢(shì)菌群相似度(0～30.1%)低于健康人群體(2.9%-45.6%),且出現(xiàn)“分支”現(xiàn)象,與UC相似。患者糞便優(yōu)勢(shì)菌群多樣性和均勻度指數(shù)(分別為2.59和0.93)均與健康人(分別為2.70和0.95)無明顯差異；優(yōu)勢(shì)種類及數(shù)量無明顯變化,其中雙歧桿菌數(shù)量的減少相對(duì)較為明顯(P=0.0533,α=0.05)�；颊邿o明顯的腸道菌群失調(diào)現(xiàn)象�；颊呒S便菌群中的雙歧桿菌、大腸桿菌、瘤胃球菌、韋榮氏球菌、鏈狀雙歧桿菌、腸球菌、乳桿菌均無數(shù)量上的明顯變化；彎曲桿菌和脫硫弧菌顯著減少；球形梭菌和普拉梭菌數(shù)量減少極顯著。我們推測(cè),CD的發(fā)生與菌群失調(diào)無關(guān),可能與普拉梭菌的顯著減少有重要關(guān)系。短鏈脂肪酸在IBS、UC、CD三種疾病患者糞便中均有顯著減少。IBS患者糞便中丁酸、丙酸、異丁酸和異戊酸濃度極顯著減少,其中以丁酸為最明顯(P=0.0017,α=0.01),它們?cè)贗BS發(fā)生中的作用可能是與黏膜低度炎癥有關(guān)；UC患者糞便中乙酸、丙酸、丁酸、異丁酸和異戊酸含量均有極顯著減少,其中丁酸濃度的差異最為顯著(P=0.0048,α=0.01),其次是異丁酸,乙酸差異最小(P=0.0150,α=0.01),丁酸代謝障礙可能與UC發(fā)生有重要相關(guān)；CD患者糞便中乙酸、丙酸和丁酸均有極顯著減少,以乙酸為最顯著(P=0.0004,α=0.01),它們含量的減少可能不是疾病發(fā)生的直接原因,而是降低了對(duì)黏膜免疫系統(tǒng)異常激活的抑制作用,使疾病發(fā)生的可能性提高。與疾病發(fā)生相關(guān)的是SCFAs在結(jié)腸內(nèi)的絕對(duì)含量,而與其相對(duì)比例無關(guān)。
【學(xué)位授予單位】：南京大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號(hào)】：R574
，

本文編號(hào)：2696157