【摘要】：目的：通過觀察以化濁解毒法組方對二甲基亞硝胺（DMN）致大鼠肝纖維化模型中肝組織Ⅰ型膠原蛋白（ColⅠ)、Ⅲ型膠原蛋白（Col Ⅲ)的表達(dá)，以及血清中單核細(xì)胞趨化蛋白1（MCP-1）和白細(xì)胞介素-13（IL-13）含量的影響，評價化濁解毒方對大鼠肝纖維化的調(diào)節(jié)作用，探討其可能的作用機(jī)制，為化濁解毒法治療肝纖維化提供進(jìn)一步的實驗依據(jù)，從方證相關(guān)的角度，為以濁毒論治肝纖維化提供分子水平的依據(jù)。 方法：清潔級SD雄性大鼠70只，體重200g±20g，于購入并自適應(yīng)喂養(yǎng)一周后隨機(jī)分為四組，即正常對照組，模型對照組，復(fù)方鱉甲軟肝片組，化濁解毒法組方高、中、低三個劑量組。除正常對照組外，其余各組大鼠均按每次10mg/kg于同一時刻給予腹腔注射1%DMN,以制備大鼠肝纖維化模型。第1周連續(xù)注射3天；第2到6周每周連續(xù)注射2天,共13次。在造模的第2、4周末分別處死模型組大鼠各4只，觀察肝組織病理切片纖維化程度。至第4周末,大鼠中度肝纖維化模型建立。于造模第5周開始，正常對照組、模型對照組大鼠灌胃給予10ml/kg·d生理鹽水，其余各組大鼠按相應(yīng)劑量進(jìn)行等體積灌胃給藥，連續(xù)給藥至實驗結(jié)束。至第8周末，處死全部受試大鼠，取大鼠新鮮肝臟組織，運用RT-PCR法檢測肝臟組織中ColⅠ、Col Ⅲ的含量，運用ELISA法檢測大鼠血清中MCP-1、IL-13的含量。 結(jié)果： 1各組大鼠的一般情況：正常對照組大鼠無死亡情況，模型對照組大鼠死亡3只，化濁解毒方高劑量組死亡2只。正常對照組大鼠進(jìn)食良好，毛色光澤，精神飽滿，體重有所增加，反應(yīng)靈敏好動，大便呈顆粒狀。其余各組大鼠均有不同程度的進(jìn)食減少，皮毛稀疏，精神萎靡不振，體重減輕，便溏等。給予化濁解毒方和復(fù)方鱉甲軟肝片以后，大鼠的一般情況均得到不同程度的改善。 2化濁解毒方對大鼠肝組織中ColⅠ水平的影響 與正常對照組相比，模型對照組ColⅠ表達(dá)明顯增多，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P 0.01)。與模型對照組相比，化濁解毒方中劑量組ColⅠ表達(dá)明顯降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P 0.01)；化濁解毒方低劑量、復(fù)方鱉甲軟肝片組ColⅠ表達(dá)降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P 0.05)；化濁解毒方高劑量組ColⅠ表達(dá)降低不明顯，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05)。 3化濁解毒方對大鼠肝組織中Col Ⅲ水平的影響 與正常對照組相比，模型對照組Col Ⅲ表達(dá)明顯增多，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P 0.01)。與模型對照組相比，化濁解毒方中劑量組Col Ⅲ表達(dá)明顯降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P 0.01)；化濁解毒方低劑量、復(fù)方鱉甲軟肝片組Col Ⅲ表達(dá)降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P 0.05)；化濁解毒高劑量方組Col Ⅲ表達(dá)降低不明顯，，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05)。 4化濁解毒方對大鼠血清中MCP-1水平的影響 與正常對照組相比，模型對照組MCP-1表達(dá)明顯增多，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P 0.01)；與模型對照組相比，除化濁解毒方高劑量組外（P0.05)，各治療組MCP-1表達(dá)均明顯降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P 0.01)；復(fù)方鱉甲軟肝片MCP-1表達(dá)較化濁解毒方高、低劑量組降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P 0.01，P 0.05)。 5化濁解毒方對大鼠血清中IL-13水平的影響 與正常對照組相比，模型對照組IL-13表達(dá)明顯增多，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P 0.01)；與模型對照組相比，各給藥組大鼠血清IL-13表達(dá)均明顯降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P 0.01)；復(fù)方鱉甲軟肝片IL-13表達(dá)較化濁解毒方高劑量組顯著降低（P 0.01)；化濁解毒方中劑量組IL-13表達(dá)與高、低劑量相比顯著降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P 0.01，P 0.05)。 結(jié)論： 1化濁解毒方能夠改善肝纖維化大鼠的一般情況。 2化濁解毒方可以不同程度的改善肝纖維化大鼠肝組織ColⅠ、ColⅢ的情況，以中劑量效果最為明顯。 3化濁解毒方可減少血清中細(xì)胞因子MCP-1及IL-13的表達(dá)，發(fā)揮抗肝纖維化的作用。 4MCP-1、IL-13參與了以濁毒論治肝纖維化的過程，可能是相關(guān)實驗和治療的重要指標(biāo)與途徑之一。
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R575.2

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 姜方偉,梁存;活血化瘀用于肝硬化[J];光明中醫(yī);2004年04期

2 吳其愷,楊大國,王植芳,王松,李慧涓;中西醫(yī)結(jié)合治療病毒性黃疸型肝炎135例[J];湖北中醫(yī)雜志;2000年08期

3 梁健;周小瀟;鄧鑫;;肝腎同源理論在肝纖維化治療中的指導(dǎo)作用[J];湖南中醫(yī)雜志;2012年03期

4 張敏;吳萬春;;阻斷RAAS系統(tǒng)對肝纖維化大鼠枯否細(xì)胞MCP-1的影響[J];臨床消化病雜志;2009年04期

5 楊竹芳;李剛;孟卉秦;;安絡(luò)化纖丸治療肝纖維化的臨床分析[J];內(nèi)蒙古中醫(yī)藥;2012年14期

6 黃偉煒;陳一明;宮曉光;劉寧;伍海鷹;王保春;常順伍;;綠原酸對阻塞性黃疸大鼠肝纖維化的治療作用及其機(jī)制[J];環(huán)球中醫(yī)藥;2012年08期

7 扈榮;傅旭春;沈麗美;白海波;;百令疏肝膠囊治療免疫損傷性肝纖維化的實驗研究[J];浙江大學(xué)學(xué)報(理學(xué)版);2012年05期

8 朱云清;宗偉;郭雪艷;邱婷;衣蕾;林斌;梁彤;蔣宏偉;;丹參多酚酸鹽注射液與替比夫定對比治療慢性乙型肝炎肝纖維化63例[J];陜西醫(yī)學(xué)雜志;2012年07期

9 劉永剛,陳厚昌,蔣毅萍;姜黃素抗肝纖維化的實驗研究[J];時珍國醫(yī)國藥;2002年05期

10 馬立彬;鄧剛;王鳴;劉曉城;;甘草酸二胺抗大鼠腎間質(zhì)纖維化作用及其機(jī)制[J];華中科技大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2007年06期

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 熊麗霞;IL-13對成纖維細(xì)胞膠原蛋白合成的影響及其分子調(diào)控機(jī)制[D];南昌大學(xué);2007年

2 李小月;芍藥苷對小鼠日本血吸蟲病肝纖維化IL-13信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2010年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 鄧燕紅;姜黃素衍生物對四氯化碳誘導(dǎo)肝纖維化的治療作用[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2012年

本文編號：2693047