【摘要】： 目的:本實驗擬通過建立大鼠顱腦外傷致應激性潰瘍模型,探討(1)胃粘膜血流量、胃液PH值與胃粘膜損傷指數的關系;(2)中樞白介素6在應激大鼠下丘腦的表達,以及參與應激性潰瘍發(fā)生的機制;(3)c-Jun氨基末端激酶(JNK)信號通路激活是否參與了應激性潰瘍的形成,以及其通路抑制劑能否減輕胃粘膜的損傷。 方法:采用液壓打擊法建立大鼠顱腦外傷并發(fā)應激性潰瘍模型,將20只雄性SD大鼠隨機等分為對照組、致傷1小時組、致傷6小時組和致傷12小時組,每組5只,測定各組大鼠胃液PH值、胃粘膜血流量、胃粘膜損傷指數,并觀察胃粘膜大體及光鏡下組織病理學變化。采用免疫組化、Westernblot的方法檢測致傷后下丘腦中樞性白介素6的表達與分布;致傷后胃粘膜p-JNK的表達與分布。設立抑制劑組,通過觀測抑制劑組胃液PH值、胃粘膜血流量、胃粘膜損傷指數以及胃粘膜大體及光鏡下組織病理學變化,明確抑制劑能減輕胃粘膜損傷的作用。 結果:(1)致傷后1小時即出現(xiàn)胃粘膜損傷,并且胃粘膜損傷指數隨時間的延長而不斷增加,損傷程度不斷加重;致傷后1小時有血流量的暫時性增加,處于波峰,此后逐漸下降,6小時后趨于平穩(wěn),但致傷后6小時和12小時組仍較對照組降低;致傷后1小時胃液PH值明顯降低,此后PH值繼續(xù)下降,到致傷后6小時處于最低點,致傷后12小時胃液PH值較致傷后1小時和6小時有升高,但各組較對照組仍有明顯降低;應激性潰瘍大鼠胃液PH值與胃粘膜損傷指數不呈完全線性負相關,但各實驗組胃液PH值較對照組有明顯減低,而胃粘膜血流量與胃粘膜損傷指數呈負相關。(2)IL-6免疫反應陽性細胞廣泛分布于應激大鼠下丘腦水平的神經細胞中,在室旁核附近分布尤為密集。(3)免疫組化發(fā)現(xiàn)在潰瘍損傷部位組織上皮細胞p-JNK呈強烈陽性反應,c-Jun氨基末端激酶(JNK)信號通路抑制劑SP600125干預能顯著減輕胃粘膜的損傷。 結論:(1)本實驗通過液壓打擊致顱腦外傷后建立了腦外傷后應激性潰瘍模型。(2)應激性潰瘍大鼠胃液PH值與胃粘膜損傷指數不呈完全線性負相關,但各實驗組胃液PH值較對照組有明顯減低,而胃粘膜血流量與胃粘膜損傷指數呈負相關。(3)中樞IL-6在液壓打擊致應激性潰瘍大鼠下丘腦室旁核(PVN)附近有明顯表達,其可能是通過室旁核(PVN)介導中樞膽堿能神經元的興奮,HPA軸的激活以及5-HT系統(tǒng)的代謝增強,參與應激過程中應激性潰瘍發(fā)生的某種病理生理機制。(4)在應激性潰瘍中c-Jun氨基末端激酶(JNK)信號通路被激活,參與了應激性潰瘍的發(fā)生。(5)JNK信號通路抑制劑SP600125可改善應激性潰瘍大鼠胃粘膜的損傷,JNK信號通路抑制劑作為一種有效的手段,有可能對今后應激性潰瘍的治療提供了新的治療思路,為臨床藥物的開發(fā)提供了重要指引,可能預示著新的治療策略。
【圖文】：

液壓打擊致應激性潰瘍大鼠下丘腦工L一6表達及胃粘膜JNK信號通路改變的至顱腔，作用于顱腦組織。壓力大小可由打擊錘的高度調節(jié)，并通過壓力波器_匕顯示。AIJF一21型激光血流儀:八dvanCe公司產品。Dll一140動物呼吸機:浙江醫(yī)科大學儀器實驗廠一制造。手術器械包:長征醫(yī)院神經外科實驗室自備。天平石蠟切片機牙科鉆

避免損傷硬腦膜。在前自和人字縫尖附近顱骨外板上固定2枚小螺絲釘，牙托水泥固定打擊管后，縫皮待實驗(見圖1一2)。ld后用液壓打擊腦外傷動物模型裝置以1.satm作打擊致傷，，調整打擊錘高度，通過液壓裝置快速地向硬腦膜外腔注入一定量的生理鹽水，突然改變密閉顱腔內恒定的壓力，使腦組織產生移位和變形，導致顱腦損傷。分別于傷后lh、6h、12卜處死。對照組動物除不致傷外，其余步驟與致傷組完全相同。圖1一2埋置打擊管大鼠側面觀(習瞳于L、呼吸變化觀測致傷組、對照組大鼠呼吸禾一!睦孔變化，呼吸抑制明顯者予以DII一lt10動物呼吸機輔助呼吸。(回胃粘膜血流量的測定麻醉后，正中線剖腹并游離出胃，插入ALF一21型激光血流儀探頭，分別于胃前后壁、大小彎、幽門前區(qū)、貢門下6點測胃粘膜血流量(GMBF)，取其均值，單位為m一/min· /1009組織。(動胃液四值的測定致傷模型制作完成后，將大鼠用1%戊巴比妥鈉(4()。 :g/kg)腹腔內注射麻醉
【學位授予單位】：第二軍醫(yī)大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2008
【分類號】：R573.1;R651.15

【參考文獻】

相關期刊論文 前10條

1 周婷婷,張峻,楊昭徐,崔培林;巰基物質對大鼠顱腦外傷后的胃細胞保護作用[J];北京醫(yī)學;2004年04期

2 楊紅,張席錦;大鼠腦內5-羥色胺在應激性潰瘍形成中的作用[J];生理學報;1985年05期

3 張建福,鄭芳,詹茂程,孫東,閻長棟;電刺激室旁核對大鼠應激性胃粘膜損傷的影響[J];生理學報;1992年06期

4 張建福,鄭芳,詹茂程;側腦室注射去甲腎上腺素對大鼠應激性胃潰瘍的影響[J];徐州醫(yī)學院學報;1992年03期

5 陳鋼;;應激性胃潰瘍[J];延邊醫(yī)學院學報;1990年01期

6 張建福,鄭芳,詹茂程;側腦室注射NE和ACh和電刺激室旁核對大鼠應激性胃粘膜損傷的影響[J];中國應用生理學雜志;1993年01期

7 解相禮,張光霽,張洪俊,朱誠,丁吉元,李勁松;重型顱腦傷后急性胃粘膜損傷的實驗研究[J];中華創(chuàng)傷雜志;1996年03期

8 劉信龍，江基堯，楊中堅，戴莉萍;大鼠腦傷后神經行為和記憶障礙的實驗研究[J];中華神經外科雜志;1994年05期

9 李力仙,王天佑,鐘震宇;液壓打擊法復制分級顱腦損傷的研究[J];中華實驗外科雜志;1999年03期

10 周偉,徐小虎,祝家鎮(zhèn);大鼠腦干機械性損傷模型的建立[J];中山醫(yī)科大學學報;1997年01期

本文編號：2688435