【摘要】：暴發(fā)性肝衰竭(FHF)是一種急性的嚴重肝功能衰竭，病情兇險，預后極差，目前仍然是醫(yī)學上最難解、最棘手的癥候之一，在我國以常見的重型病毒性肝炎為典型代表，死亡率達到90%[1]。目前肝衰竭的治療手段主要有內(nèi)科藥物治療、人工肝治療和肝移植治療。內(nèi)科治療尚無特效藥且療效有限，肝移植因供體來源短缺、免疫排斥、移植費用高等諸多因素的限制，人工肝其療效和安全性已經(jīng)得到一定程度的肯定，但肝細胞來源困難使國內(nèi)外生物人工肝研究都陷入了低谷。 近年來，干細胞研究的快速發(fā)展為解決肝衰竭治療的細胞來源問題帶來了新的希望。MSCs最初在骨髓中發(fā)現(xiàn)[2-3]，因其具有自我復制以及多向分化潛能、造血支持和促進干細胞植入、免疫調(diào)控等特點而日益受到人們的關注，已經(jīng)被應用于多種疾病的組織修復治療與研究中。因此采用干細胞移植來修復、治療急慢性肝衰竭患者，幫助病患度過危險期并等待肝移植或直接修復衰竭的肝臟是一個經(jīng)濟又理想的方法。 本課題以MSCs的多向分化潛能和已能分化為肝細胞的實驗為依據(jù)，以近年來的被證明的免疫調(diào)節(jié)功能為重要線索，以肝衰竭的免疫發(fā)病機制為基礎，進行以肝細胞和MSCs進行二維共培養(yǎng)的實驗，設計在建立合理的細胞損傷和動物肝衰竭模型的基礎上，探索MSCs-肝細胞共培養(yǎng)上清對體外培養(yǎng)L02細胞的影響，以及MSCs-肝細胞共培養(yǎng)上清對肝衰竭動物的治療情況。研究結果顯示，共培養(yǎng)上清對L02有明顯的刺激增殖和損傷保護作用，表現(xiàn)為L02增殖活躍，，總蛋白合成量增加；加入上述細胞上清的酒精損傷L02細胞AST、LDH釋放和細胞凋亡顯著低于未加細胞上清的對照組。同時，動物實驗的結果也顯示MSCs-肝細胞共培養(yǎng)上清能有效降低KM小鼠的死亡率，有效改善大鼠的肝功能。共培養(yǎng)組的KM小鼠的死亡率為30%，明顯優(yōu)于單獨培養(yǎng)組，而對照組的小鼠的死亡率達到了80%。采用抗體陣列的方法對不同的細胞培養(yǎng)上清的成分進行了初步鑒定，結果顯示MSCs-肝細胞共培養(yǎng)上清中的IL-1、IL-6、IL-8等細胞因子的量明顯高于單獨培養(yǎng)的肝細胞上清、MSCs培養(yǎng)上清中的細胞因子的量。
【圖文】：

無菌灌流肝細胞Fig2.1SterileperfusionHepatoctyescells

肝細胞懸液Fig2.2Hepatoctyescells
【學位授予單位】：重慶理工大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2012
【分類號】：R575.3

【參考文獻】

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2 鄒春毅;魏麗艷;李穎;李益文;孫勇;唐旭;;人工肝支持系統(tǒng)治療重型肝病、肝衰竭的療效及影響因素分析[J];透析與人工器官;2008年03期

3 馮國華;王旭霞;趙署光;劉美媛;張曉蘭;聞勤生;;不同途徑移植脂肪間充質(zhì)干細胞在肝內(nèi)定居數(shù)量的比較[J];西南國防醫(yī)藥;2008年01期

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5 李秀東;陳玉丙;陳強;宋祥福;張紅梅;范洪學;;小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞對異基因肝移植模型大鼠淋巴細胞的免疫抑制及損傷修復作用的研究[J];中國老年學雜志;2008年05期

本文編號：2681521