【摘要】：研究背景和目的 急性胰腺炎(AP)是一種潛在的致死性疾病,臨床上大多為自限性輕型胰腺炎,但仍有10%～20%患者進(jìn)展為重癥胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)。SAP是當(dāng)今胰腺病學(xué)研究難題,源其起病急,病情重,發(fā)展迅速,早期常出現(xiàn)急性并發(fā)癥。雖然近年來對SAP的治療和監(jiān)護(hù)取得了一些進(jìn)展,但其死亡率仍高達(dá)20%～40%。 AP引起的肝、腎損害不但會加重AP病情,而且直接影響其預(yù)后,甚至可以發(fā)展至肝、腎功能衰竭,導(dǎo)致死亡。在一項(xiàng)對急性重癥胰腺炎相關(guān)多器官功能衰竭(multiple organ failure,MOF)的患者的回顧性研究中,具有最高死亡率的是肝衰竭患者(83%);并發(fā)急性腎功能衰竭的患者死亡率亦高達(dá)45%～50%;而聯(lián)合器官衰竭中,又以肝腎衰竭死亡率最高,達(dá)到91%。因此,研究SAP繼發(fā)肝、腎損傷的治療已經(jīng)成為研究熱點(diǎn)之一。 在SAP的發(fā)病機(jī)制中,“炎性介質(zhì)釋放學(xué)說”備受關(guān)注和重視。認(rèn)為吞噬細(xì)胞過度刺激中性粒細(xì)胞導(dǎo)致細(xì)胞因子和炎癥介質(zhì)的釋放,造成不同程度的全身性炎癥反應(yīng),進(jìn)而導(dǎo)致多器官功能障礙綜合癥(Multiple organ dysfunction syndrome,MODS)。目前研究表明,在各種細(xì)胞因子中,腫瘤壞死因子(TNF-a)是引起SAP病理機(jī)制中是最重要的炎癥因子之一。 TNF-a作為SAP時(shí)各種細(xì)胞因子中的第一位因子,參與誘導(dǎo)IL-1p、IL-6、IL-8及自身基因的表達(dá),刺激各種炎癥細(xì)胞,造成細(xì)胞因子及炎癥介質(zhì)的失控性釋放,引起級聯(lián)反應(yīng),從而引起胰腺組織壞死、血管內(nèi)皮損傷以及血管通透性增加,最終造成微循環(huán)障礙和組織器官的損傷乃至衰竭。 而圍繞著SAP相關(guān)肝、腎損傷的機(jī)制和治療有著眾多的研究,其中TNF-a扮演著重要的角色。它可對肝細(xì)胞和腎小管直接損傷,亦通過刺激各種細(xì)胞因子的釋放,產(chǎn)生細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)效應(yīng),促成全身炎癥反應(yīng)綜合征(Systemic inflammatory response syndrome,SIRS),引起肝、腎功能障礙。 2001年,BhaticM首次提出了AP“治療窗”的新思路,認(rèn)為在AP發(fā)作和器官功能衰竭之間存在一個(gè)可供抗炎癥介質(zhì)治療的“治療窗”,運(yùn)用炎癥介質(zhì)靶向治療有可能逆轉(zhuǎn)MODS的發(fā)生發(fā)展。 有研究表明,抗TNF-a抗體的早期應(yīng)用可使SAP模型72h生存率由15%增至85%,且高淀粉酶血癥、胰腺出血和脂肪壞死均明顯減輕。 本實(shí)驗(yàn)的前期研究提示,應(yīng)用4.5%濃度�；悄懰徕c(NaTc)逆行注射建立SAP動物模型,建模后6h為SAP并MODS模型的TNF-a反應(yīng)高峰及肝腎功能損害高峰,為ANP并MODS模型的抗炎癥介質(zhì)治療窗 英夫利昔單抗(Infliximab)是一種基因重組的人鼠嵌合TNF-a的免疫球蛋白的G1亞類單克隆抗體。本研究單/聯(lián)用Infliximab單抗和奧曲肽(Octreotide),觀察對急性壞死性胰腺炎(Acute necrotizing pancreatitis,ANP)并MODS模型中肝、腎損害的實(shí)驗(yàn)療效,旨在首次闡明在抗炎癥介質(zhì)治療窗應(yīng)用Infliximab和Octreotide對ANP并MODS模型中肝腎損害的改善價(jià)值,為今后大規(guī)模臨床研究的開展,提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法 雌性SD大鼠40只隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組、Octreotide組、Infliximab治療組和Infliximab+Octreotide治療組,每組各8只大鼠。采用Aho法并加以改良,經(jīng)胰膽管逆行注射濃度為4.5%牛磺膽酸鈉(NaTc)制備ANP并MODS大鼠模型;假手術(shù)組僅翻動胰腺,十二指腸后關(guān)腹。治療組于建模后6h抗炎癥介質(zhì)治療窗早期,經(jīng)鼠尾靜脈注射Infliximab、Octreotide等藥物。 各組大鼠觀察至建模后24h處死,經(jīng)鼠尾靜脈采血分別檢測血清TNF-a、TB、ALT、肌酐等指標(biāo);取胰腺組織制作病理切片,于光鏡下觀察胰腺組織并進(jìn)行病理評分。肝、腎組織大體觀察后制作光鏡和電鏡病理切片。由兩位專一病理醫(yī)師觀察光鏡切片,根據(jù)病理評分標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評分。由兩位專一電鏡老師觀察肝,腎組織超微結(jié)構(gòu)的改變。 結(jié)果 1、各治療組與建模組比較: (1)肝腎功能生化指標(biāo)及血清AMS、TNF-a、胰腺病理評分比較:各治療組AMS、TNF-a、ALT、TB、肌酐及胰腺病理評分較建模組均顯著降低(P0.05)。 (2)肝、腎組織病理改變的觀察及光鏡病理評分結(jié)果比較:各治療組肝、腎組織大體、光鏡及電鏡觀察,病變損害程度輕,且光鏡病理評分各治療組較建模組評分顯著降低(P0.05)。 2、各治療組間比較: (1)肝腎功能生化指標(biāo)及血清AMS、TNF-a、胰腺病理評分比較:A、聯(lián)合治療組TNF-a、AMS、肝腎功能生化指標(biāo)及胰腺病理評分較Infliximab組和Octreotide組顯著降低(P0.05);B、血清AMS在各治療組間比較無顯著性差異(P0.05)。 (2)肝、腎組織病理改變的觀察及光鏡病理評分結(jié)果比較:A、三組治療組在肝、腎組織大體標(biāo)本觀察病變損害程度相近;B、三組治療組在肝、腎光鏡病理和電鏡超微結(jié)構(gòu)觀察,聯(lián)合治療組病變損害程度輕微。C、聯(lián)合治療組光鏡病理評分較Infliximab組和Octreotide組評分顯著降低(P0.05)。 結(jié)論 1、早期使用Infliximab單抗可顯著降低ANP并MODS模型的TNF-a水平,對肝腎損害具有顯著的防治效應(yīng)。 2、Infliximab和Octreotide聯(lián)用可顯著提高Infliximab對ANP并MODS模型肝腎損害的療效。
【圖文】：

圖 18：（×8900）對照組肝細(xì)胞：細(xì)胞核呈圓形，核膜完整，，染色質(zhì)均勻，可見核仁，細(xì)胞器豐富，可見溶酶體，線粒體，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等。圖 19：（×10000）建模組肝細(xì)胞：細(xì)胞核壞死性病灶，核內(nèi)染色質(zhì)邊集，核內(nèi)呈空網(wǎng)格樣，核仁溶解。細(xì)胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)溶解性病灶，灶內(nèi)細(xì)胞器模糊，可見低或中等密度的絮狀物質(zhì)。圖 20：（×8000）Octreotide：可見肝細(xì)胞核不規(guī)則，核固縮。細(xì)胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)多處灶性溶解性病灶。圖 21（×10000）infliximab 組：肝細(xì)胞核膜有破損，核內(nèi)染色質(zhì)分布尚均勻，可見核仁。

圖 18：（×8900）對照組肝細(xì)胞：細(xì)胞核呈圓形，核膜完整，染色質(zhì)均勻，可見核仁，細(xì)胞器豐富，可見溶酶體，線粒體，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等。圖 19：（×10000）建模組肝細(xì)胞：細(xì)胞核壞死性病灶，核內(nèi)染色質(zhì)邊集，核內(nèi)呈空網(wǎng)格樣，核仁溶解。細(xì)胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)溶解性病灶，灶內(nèi)細(xì)胞器模糊，可見低或中等密度的絮狀物質(zhì)。圖 20：（×8000）Octreotide：可見肝細(xì)胞核不規(guī)則，核固縮。細(xì)胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)多處灶性溶解性病灶。圖 21（×10000）infliximab 組：肝細(xì)胞核膜有破損，核內(nèi)染色質(zhì)分布尚均勻，可見核仁。
【學(xué)位授予單位】：廣州醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號】：R576;R459.7

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 谷俊朝,秦兆寅,紀(jì)宋正,黎一鳴,康亞安,王西京;腫瘤壞死因子在大鼠急性壞死性胰腺炎發(fā)病機(jī)制中的作用[J];肝膽胰外科雜志;1997年02期

2 ;Pathogenesis of acute lung injury in rats with severe acute pancreatitis[J];Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International;2005年04期

3 賈林;黃耀星;;重癥急性胰腺炎相關(guān)全身炎癥反應(yīng)綜合征及其“治療窗”新概念[J];廣州醫(yī)藥;2008年02期

4 程寶泉;劉春濤;鐘寧;李文捷;張尚忠;;重癥急性胰腺炎急性腎損傷機(jī)制探討[J];山東大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2007年02期

5 徐嫻,孫士其,張軍,張予蜀;急性胰腺炎血清sTNF-R、IFN-γ、IL-6、IL-8、NO、NOS水平與其嚴(yán)重程度的研究[J];胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志;2003年03期

6 陳浩;李非;程韻楓;孫家邦;;大鼠重癥急性胰腺炎病情演變中中性白細(xì)胞的作用[J];世界華人消化雜志;2001年07期

7 劉暉;王喜艷;徐新建;陳啟龍;溫浩;;高滲鹽水對重癥急性胰腺炎大鼠胰腺組織TNF-α、IL-10 mRNA表達(dá)的影響[J];中華肝膽外科雜志;2005年10期

8 錢家鳴;;再談我國急性胰腺炎的病因與治療[J];中華內(nèi)科雜志;2007年12期

9 ;Regulating effects of arsenic trioxide on cell death pathways and inflammatory reactions of pancreatic acinar cells in rats[J];Chinese Medical Journal;2007年08期

10 倪泉興;張妞;張群華;張延齡;向陽;鄭頌國;羅建民;;生長抑素和生長激素聯(lián)合防治急性壞死性胰腺炎肺損傷的研究[J];中華實(shí)驗(yàn)外科雜志;1998年05期

本文編號：2678611