發(fā)布時(shí)間：2020-05-23 15:15

【摘要】： 目的:觀察骨形態(tài)發(fā)生蛋白-7(BMP-7)對(duì)人肝星狀細(xì)胞系LX-2中TGFβ信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的影響,并觀察丹參素對(duì)LX-2 BMP受體表達(dá)的影響,探討B(tài)MP信號(hào)通路對(duì)肝纖維化的影響機(jī)制。 方法:體外培養(yǎng)人肝星狀細(xì)胞LX-2。分組處理48h后CCK-8法檢測(cè)BMP-7對(duì)LX-2增殖的影響;免疫細(xì)胞化學(xué)染色法檢測(cè)BMP-7,以及丹參素對(duì)TGFβ1處理的LX-2活化和Ⅰ型膠原表達(dá)的影響;RT-PCR法檢測(cè)BMP-7對(duì)TGFβ1處理的LX-2內(nèi)TGFβⅠ、Ⅱ型受體(TβRⅠ,Ⅱ),BMPⅡ型受體(BMPRⅡ),Smad3、7mRNA表達(dá)的影響,RT-PCR法檢測(cè)丹參素對(duì)TGFβ1處理的LX-2內(nèi)BMPRⅡmRNA表達(dá)的影響。 結(jié)果:經(jīng)TGFβ1處理后,LX-2的增殖無(wú)明顯改變。BMP-7(20-80 ng/ml)處理后,LX-2細(xì)胞的增殖被抑制,隨BMP-7濃度增加抑制作用增強(qiáng)(P0.01)。TGFβ1可促進(jìn)LX-2表達(dá)α-SMA和I型膠原(P0.01),加入BMP-7(20-80 ng/ml)處理48 h后可抑制細(xì)胞表達(dá)α-SMA和I型膠原,抑制作用隨處理濃度增強(qiáng)而增強(qiáng)(P0.01, P0.05) ;丹參素(0.0625-0.25mmol/L)也可濃度依賴性地抑制TGFβ1誘導(dǎo)的LX-2活化和I型膠原表達(dá)(P0.01)。TGFβ1可增加TβRⅠ、TβRⅡ、Smad3 mRNA表達(dá),減少Smad7 mRNA表達(dá)。BMP-7可減少Smad3 mRNA表達(dá)(P0.01),增加Smad7 mRNA表達(dá)(P0.01),但對(duì)TβR mRNA表達(dá)的影響無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。丹參素則可濃度依賴性地增加BMPRⅡmRNA的表達(dá)(P0.01)。 結(jié)論:BMP-7可抑制HSC的增殖和TGFβ1誘導(dǎo)的HSC活化,減少I型膠原的表達(dá),其機(jī)制可能為抑制TGFβ/Smad通路中Smad3表達(dá),增加Smad7表達(dá);丹參素可通過(guò)增加BMPRⅡ的表達(dá)抑制HSC活化和膠原表達(dá)。
【圖文】：

圖 1 正常對(duì)照組 LX-2 增殖情況 (×40)Fig1 Proliferation of LX-2 cells , normalcontrol (×40)圖 2 TGFβ 組 LX-2 增殖情況(×40)Fig2 Proliferation of LX-2 cells treated withTGFβ (×40)

圖 5 正常對(duì)照組 LX-2 細(xì)胞 α-SMA 免疫化學(xué)染色(×200)Fig5 Cell immunocytochemical staining forα-SMAin LX-2. normal control (x200)圖6 TGFβ組LX-2細(xì)胞α-SMA免疫化學(xué)染色(×200)Fig6 Cell immunocytochemical staining forα-SMAin TGFβ treated LX-2. (x200)
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號(hào)】：R575.2;R285.5

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