發(fā)布時間：2020-05-21 18:08

【摘要】：目的：觀察烏司他丁對重癥急性胰腺炎大鼠T淋巴細胞凋亡的影響,證實烏司他丁的直接免疫調節(jié)效應；通過分析烏司他丁對重癥急性胰腺炎大鼠脾淋巴細胞氧化應激水平及線粒體凋亡信號通路等的影響,闡釋其改善T淋巴細胞凋亡的分子機制。 方法：清潔級Wistar大鼠36只,隨機分為(n=12)：(1)假手術對照(Sham)組；(2)重癥急性胰腺炎(SAP)模型組；(3)烏司他丁治療組。采用膽胰管逆行注入5%�；悄懰徕c的方法制備大鼠SAP模型,烏司他丁治療組在制作SAP模型后經尾靜脈緩慢注射烏司他丁1萬U/Kg體重。術后24小時首先采用直接免疫熒光法對CD4+和CD8+T淋巴細胞進行標記,再應用Annexin-V/PI雙染法標記凋亡細胞,流式細胞儀檢測各組大鼠CD4+、CD8+T淋巴細胞比例及各亞群凋亡細胞比例；以2,7-二氫二氯熒光素二乙酸酯(DCFH-DA)為熒光探針檢測各組大鼠淋巴細胞內活性氧水平,羥胺法檢測血清超氧化物歧化酶活力,硫代巴比妥酸法檢測血清丙二醛含量；以羅丹明123為探針,流式細胞儀檢測各組大鼠淋巴細胞線粒體膜電位,采用酯化鈣黃綠素和氯化鈷共孵育的方法檢測線粒體通透性轉換孔開放水平。 結果：1、與假手術對照組相比,SAP模型組CD4+T淋巴細胞比例、CD4+/CD8+T淋巴細胞比值均顯著下降(P0.01),同時CD4+T、CD8+T淋巴細胞亞群凋亡細胞比例均顯著升高(P0.01),尤以CD4+T淋巴細胞為著,烏司他丁治療組CD4+T淋巴細胞的凋亡比例顯著降低(P0.01), CD4+T淋巴細胞比例和CD4+/CD8+T淋巴細胞比值則顯著回升(P0.01);2、SAP模型組淋巴細胞內ROS熒光強度及血清MDA含量顯著高于假手術對照組(P0.01),血清SOD活力則顯著低于假手術對照組(P0.01),烏司他丁治療組淋巴細胞內ROS水平和血清MDA含量顯著下降(P0.01),血清SOD活力則顯著回升(P0.01);3、SAP模型組線粒體通透性轉換孔異常開放的淋巴細胞比例較假手術對照組顯著升高(P0.01),線粒體膜電位降低的淋巴細胞比例增多(P0.01),烏司他丁治療組線粒體通透性轉換孔的異常開放和線粒體膜電位下降的淋巴細胞比例顯著下降(P0.01)。 結論：1、烏司他丁通過減少SAP大鼠CD4+T淋巴細胞的異常凋亡,改善機體免疫抑制狀態(tài),起到直接的免疫增強效應；2、烏司他丁可顯著降低SAP大鼠脾淋巴細胞內ROS水平,提高血清SOD活力及降低血清MDA含量,從而通過有效提高機體對氧自由基的清除能力,降低淋巴細胞凋亡程度,減輕氧化應激對SAP大鼠免疫功能的影響；3、烏司他丁通過打斷ROS與線粒體損害間的惡性循環(huán),阻斷線粒體凋亡信號通路,從而實現其減少淋巴細胞凋亡,改善機體免疫功能的作用。
【學位授予單位】：天津醫(yī)科大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2012
【分類號】：R576

【參考文獻】

相關期刊論文 前10條

1 譚朝華,徐軍美,楊昭云,楊東林,呂志平;烏司他丁對急性肺損傷兔炎性細胞因子及氧自由基的影響[J];中國醫(yī)師雜志;2004年10期

2 皇娜;朱佳麗;鄧小明;李金寶;婁景勝;薄祿龍;吳友平;陳峰;;烏司他丁對膿毒癥小鼠生存率及淋巴細胞凋亡的影響[J];第二軍醫(yī)大學學報;2011年08期

3 仲吉英;楊承祥;肖平;;烏司他丁在體外循環(huán)心臟手術中對細胞免疫功能的影響[J];第四軍醫(yī)大學學報;2007年01期

4 孫勇;孫曙光;王靜;王良喜;毛學飛;鄧向東;潘曉峰;吳杭慶;;谷氨酰胺聯合烏司他丁對嚴重燒傷患者營養(yǎng)狀況及免疫功能的影響[J];廣東醫(yī)學;2010年23期

5 雷賓峰;陳銘伍;冼磊;何巍;馮旭;周華富;;烏司他丁對心臟不停跳心內直視術機體免疫功能的影響[J];廣西醫(yī)科大學學報;2008年03期

6 勝利;安利峰;史霖;王軍陽;范桂香;袁育康;;烏司他丁抗衰老的免疫機制[J];武漢大學學報(醫(yī)學版);2006年05期

7 胡洪生;鄔善敏;朱光輝;;鈴蟾肽對梗阻性黃疸腸道的保護作用[J];武漢大學學報(醫(yī)學版);2007年03期

8 劉慶杰;白宏英;劉春嶺;曾志磊;李楠;;烏司他丁對腦缺血-再灌注大鼠腦組織細胞色素C、凋亡誘導因子表達及凋亡細胞數的影響[J];臨床神經病學雜志;2012年01期

9 蔡循,陳國強,陳竺,王振義;線粒體跨膜電位與細胞凋亡[J];生物化學與生物物理進展;2001年01期

10 魏志剛;趙浩亮;李輝宇;韓振國;;烏司他丁在肝臟缺血再灌注損傷中的作用[J];山西醫(yī)藥雜志;2007年11期

，

本文編號：2674690