【摘要】：目的:了解重慶地區(qū)乙型肝炎病毒(HBV)基因型的分布情況并進(jìn)行精確定量分析,并探討HBV基因型及前C區(qū)突變與慢性乙型肝炎病情的關(guān)系。 方法:采用熒光分型定量PCR(GQ-PCR)法對(duì)152份血清標(biāo)本進(jìn)行HBV基因分型并定量,分析基因型在各肝病組的比例;巢式PCR擴(kuò)增前C區(qū),測(cè)序分析前C區(qū)nt1896位點(diǎn)。 結(jié)果:152株血清標(biāo)本成功分型148株(97.37%),其中B基因型109例(男88例,女21例)(定量值范圍:4~12 log10copies/ml,均值和標(biāo)準(zhǔn)差:7.94±1.44log_(10)copies/ml),C基因型10例(男6例,女4例)(定量值范圍: 5~10 log10copies/ml ,均值和標(biāo)準(zhǔn)差: 8.12±1.64 log10copies/ml),基因B+C混合型29例(男24例,女5例)(定量值范圍:4~10 log)_(10)copies/ml,均值和標(biāo)準(zhǔn)差:7.45±1.59 log10copies/ml)。檢出率分別為73.65%(男74.58%,女70.00%)、6.76%(男5.08%,女13.30%)、19.59%(男20.34%,女16.70%)。B基因型在肝硬化組、肝癌組、慢性乙型重型肝炎組和慢性乙型肝炎(輕-中度)組的比例分別為38.53%、12.84%、33.03%和15.60%;C型在肝硬化組、肝癌組、慢性乙型重型肝炎組和慢性乙型肝炎(輕-中度)組的比例分別為70.00%、10.00%、20.00%和0;B+C混合型在在肝硬化組、肝癌組、慢性乙型重型肝炎組和慢性乙型肝炎(輕-中度)組的比例分別為62.07%、6.90%、20.69%和10.34%。B+C混合型在肝硬化中比例顯著高于B型(χ2=5.16,P0.05)。B、C型及B+C混合型在肝癌組、慢性乙型重型肝炎組和慢性乙型肝炎(輕-中度)組的分布無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。隨機(jī)檢測(cè)50例血清標(biāo)本,其中10例出現(xiàn)了G1896A位點(diǎn)的變異,這10例中4例為B型,6例為B+C混合型,兩者突變率比較:B+C混合型較B型高(χ~2=4.51,P0.05)。 結(jié)論:重慶地區(qū)HBV優(yōu)勢(shì)基因型以B型和B+C混合型為主,與前幾年相比較,C型有下降趨勢(shì)�；蛐偷姆植寂c性別無關(guān)(P0.05)。HBV載量在B、C型及混合型三者之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。B+C混合型較B型更容易引起肝硬化(P0.05),但基因型似乎與慢性乙型重型肝炎沒有關(guān)聯(lián)(P0.05),由于C基因型樣本偏少,有待擴(kuò)大樣本進(jìn)一步論證。B+C混合型有比B型更高的突變率。熒光分型定量PCR(GQ-PCR)法靈敏度和特異性均高于傳統(tǒng)的直接測(cè)序分型法,能夠同時(shí)準(zhǔn)確的對(duì)臨床標(biāo)本進(jìn)行HBV基因分型及定量檢測(cè),有望替代傳統(tǒng)的基因分型方法。
【圖文】：

線（10 倍梯度稀釋的 5 個(gè)不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品擴(kuò)增后所得ard curve（Amplification product of ten times gradientproduct in five different concentrations）

圖 1:標(biāo)準(zhǔn)曲線（10 倍梯度稀釋的 5 個(gè)不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品擴(kuò)增后所得標(biāo)準(zhǔn)曲線）Figure 1：Standard curve（Amplification product of ten times gradient diluted standardproduct in five different concentrations）
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號(hào)】：R512.62

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本文編號(hào)：2674783