本文關(guān)鍵詞：自身免疫性肝炎小鼠腹腔巨噬細胞功能改變及其在治療中的作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：研究自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis, AIH)模型小鼠腹腔巨噬細胞表面抗原遞呈分子MHCⅡ、CD40表達的變化及巨噬細胞吞噬功能的改變,以及氫化可的松琥珀酸鈉和復(fù)方甘草酸苷對AIH模型小鼠腹腔巨噬細胞吞噬功能的影響并研究其意義,從而探討AIH的發(fā)病機制及復(fù)方甘草酸苷對于AIH治療作用的免疫學(xué)機制,為AIH的治療以及復(fù)方甘草酸苷的應(yīng)用開辟新的前景。 方法：(1)造模：4-6周齡的雌性C57BL/6小鼠,以同種系S-100肝抗原與弗氏完全佐劑充分乳化后分別于第一天及第7天兩次予小鼠腹腔注射建立AIH的動物模型,對照組采用同劑量的生理鹽水與弗氏佐劑的混合液,并于免疫后第4周末處死小鼠；(2)提取、分離、培養(yǎng)小鼠腹腔巨噬細胞：提取后置培養(yǎng)箱培養(yǎng)后,用不含小牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)液漂洗,然后加含小牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)液在培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)以備用；(3)配制藥物及體外細胞加藥：含小牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)液分別將氫化可的松琥珀酸鈉和復(fù)方甘草酸苷濃度分別調(diào)配至1mg/m1,對照組僅加入培養(yǎng)液,培養(yǎng)箱中培養(yǎng)30min,然后加入異硫氰酸熒光素(fluorescein isothiocyanate, FITC)標記的大腸桿菌(escherichia coli, E.coli)共孵育；(4)巨噬細胞表面抗原遞呈分子測定：加入不含F(xiàn)ITC標記E.coli共孵育,用流式細胞儀測定抗原呈遞分子MHCⅡ及其協(xié)同共刺激分子CD40在正常小鼠及AIH模型小鼠巨噬細胞表面的表達情況,從而判斷巨噬細胞的抗原遞呈能力；(5)AIH小鼠腹腔巨噬細胞吞噬功能的測定：小鼠腹腔巨噬細胞與FITC標記的E.coli共孵育1小時,用熒光顯微鏡檢測吞噬細菌的細胞數(shù)量和吞噬細菌的總數(shù),并用流式細胞儀檢測驗證吞噬細菌的細胞數(shù)量,分析AIH加藥組與未加藥組和對照組巨噬細胞吞噬功能的差異。 結(jié)果：(1)流式細胞術(shù)檢測AIH模型小鼠腹腔巨噬細胞表面抗原提呈分子MHCⅡ表達較對照組明顯減低,(對照組VS AIH模型組為：0.762±0.049vs.0.362±0.035,P=0.000),兩組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義；AIH模型小鼠腹腔巨噬細胞表面抗原提呈分子CD40的表達也顯著低于對照組,(對照組VS.AIH模型組為：0.885±0.025vs.0.409±0.018,P=0.000),兩組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義；(2)熒光顯微鏡檢觀察AIH模型小鼠腹腔巨噬細胞吞噬率及吞噬指數(shù)顯著低于對照組(吞噬率：0.208±0.046vs.0.465±0.081,P=0.000；吞噬指數(shù)：0.390±0.105vs.0.848±0.091,P=0.000)；氫化可的松琥珀酸鈉能提高AIH模型小鼠腹腔巨噬細胞吞噬率及吞噬指數(shù)(吞噬率：0.208±0.046vs.0.428±0.073,吞噬指數(shù)：0.390±0.105vs.0.798±0.065),復(fù)方甘草酸苷也使AIH腹腔巨噬細胞吞噬率及吞噬指數(shù)明顯升高(吞噬率：0.178±0.039vs.0.375±0.094,吞噬指數(shù)：0.353±0.078vs.0.702±0.084),與AIH小鼠未加藥腹腔巨噬細胞吞噬率及吞噬指數(shù)比較均具有統(tǒng)計學(xué)差異；(3)利用流式細胞儀驗證對照組小鼠、AIH小鼠腹腔巨噬細胞未加藥組及加氫化可的松琥珀酸鈉組、復(fù)方甘草酸苷組的吞噬率(分別為：0.368±0.067,0.184±0.020,0.351±0.047,0.342±0.020),結(jié)果進一步驗證了熒光顯微鏡實驗結(jié)果,即AIH模型小鼠腹腔巨噬細胞吞噬率顯著降低,氫化可的松琥珀酸鈉和復(fù)方甘草酸苷均能提高AIH模型小鼠腹腔巨噬細胞吞噬率。 結(jié)論：①AIH小鼠腹腔巨噬細胞表面抗原遞呈分子MHCⅡ、CD40表達減低,巨噬細胞抗原遞呈功能減低,可能是AIH發(fā)病的重要一環(huán)。②AIH小鼠腹腔巨噬細胞吞噬率及吞噬指數(shù)也顯著低于對照組,氫化可的松琥珀酸鈉處理后的AIH小鼠腹腔巨噬細胞的吞噬率及吞噬指數(shù)顯著提高,對研究AIH的發(fā)病機制具有重要意義。③復(fù)方甘草酸苷也能顯著提高AIH小鼠腹腔巨噬細胞的吞噬率及吞噬指數(shù),其可能為AIH的治療提供一個嶄新的應(yīng)用前景。
【關(guān)鍵詞】：自身免疫性肝炎 巨噬細胞 抗原遞呈 甘草酸苷 吞噬功能 氫化可的松
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R575.1
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-10
• ~.略語/符號說明10-12
• 前言12-16
• 研究現(xiàn)狀、成果12-15
• 研究目的、方法15-16
• 一、AIH小鼠腹腔巨噬細胞表面MHCⅡ、CD40分子的表達16-24
• 1.1 實驗對象和方法16-17
• 1.1.1 實驗對象及主要試劑16
• 1.1.2 實驗方法16-17
• 1.1.3 統(tǒng)計學(xué)方法17
• 1.2 實驗結(jié)果17-20
• 1.2.1 小鼠腹腔巨噬細胞表面MHCⅡ分子的表達17-19
• 1.2.2 小鼠腹腔巨噬細胞表面CD40分子的表達19-20
• 1.3 討論20-23
• 1.4 小結(jié)23-24
• 二、氫化可的松琥珀酸鈉對AIH小鼠腹腔巨噬細胞吞噬功能的影響24-33
• 2.1. 實驗對象和方法24-25
• 2.1.1 實驗對象和分組24
• 2.1.2 實驗方法24-25
• 2.1.3 統(tǒng)計學(xué)方法25
• 2.2 實驗結(jié)果25-29
• 2.3 討論29-31
• 2.4 小結(jié)31-33
• 三、復(fù)方甘草酸苷對AIH小鼠腹腔巨噬細胞吞噬功能的影響33-40
• 3.1. 實驗對象和分組33-34
• 3.1.1 主要試劑33
• 3.1.2 實驗方法33-34
• 3.1.3 統(tǒng)計學(xué)方法34
• 3.2 實驗結(jié)果34-37
• 3.3 討論37-39
• 3.4 小結(jié)39-40
• 結(jié)論40-41
• 參考文獻41-46
• 發(fā)表論文和參加科研情況說明46-47
• 綜述47-54
• 綜述參考文獻50-54
• 致謝54

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張明發(fā);沈雅琴;;甘草酸及其苷元甘草次酸的糖皮質(zhì)激素樣作用[J];現(xiàn)代藥物與臨床;2011年01期

2 王綺夏;邱德凱;馬雄;;2010年美國肝病學(xué)會自身免疫性肝炎指南解讀[J];中國肝臟病雜志(電子版);2011年03期

3 李蘊銣;王文冰;張黎穎;歐蔚妮;謝雯;魏來;;甘草酸類藥物治療自身免疫性肝炎療效分析[J];臨床肝膽病雜志;2007年02期

4 金建軍,王建軍,夏德全,周康,胡德昌;甘草酸二銨對慢活肝的療效及免疫調(diào)節(jié)作用[J];洛陽醫(yī)專學(xué)報;1995年02期

5 王英杰;范慧英;路云環(huán);;復(fù)方甘草酸苷對銀屑病患者T細胞免疫功能的影響[J];中國麻風(fēng)皮膚病雜志;2007年06期

6 賈繼東;段維佳;;自身免疫性肝病的診治進展[J];中國繼續(xù)醫(yī)學(xué)教育;2010年03期

7 孫泉紅,彭景ii;MHC II類分子表達調(diào)控的研究進展[J];生理科學(xué)進展;2004年01期

8 朱曉紅;羌韌;;甘草酸苷與熊去氧膽酸在自身免疫性肝炎及原發(fā)性膽汁性肝硬化治療中的應(yīng)用[J];齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2012年22期

9 李新芳,孟富敏,潘福生,林衛(wèi),蘭中芬,王風(fēng)蓮,駱勤,王越;18β—甘草次酸鈉對炎癥和免疫功能的影響[J];中國藥理學(xué)通報;1990年02期

10 劉震霞;劉洋;劉翠英;;甘草酸苷制劑聯(lián)合熊去氧膽酸治療自身免疫性肝炎及原發(fā)性膽汁性肝硬化的臨床觀察[J];中國醫(yī)藥導(dǎo)報;2011年20期

  本文關(guān)鍵詞：自身免疫性肝炎小鼠腹腔巨噬細胞功能改變及其在治療中的作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

，

本文編號：266096