TLR4介導的BV2細胞抗HCV固有免疫應答機制初步研究
發(fā)布時間:2020-05-09 21:26
【摘要】:目的通過觀察HCV刺激后小鼠小膠質細胞(BV2細胞)TLR4表達變化及其下游細胞因子IFN-α、IFN-β、IL-6、IL-12分泌變化,進而分析兩者變化的相關性,初步探討TLR4是否介導參與中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)抗HCV固有免疫應答及其可能機制。 方法用含20%HCV陽性血清的培養(yǎng)液刺激BV2細胞,,為HCV實驗組,并設置正常血清組和空白對照組。應用實時熒光定量PCR(RT-qPCR)方法檢測刺激6h、12h、18h、24h后TLR4mRNA的相對表達;應用流式細胞術(FCM)、酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)分別檢測刺激24h后TLR4蛋白及IFN-α、IFN-β、IL-6、IL-12表達水平;通過觀察TLR4阻斷后各組細胞IFN-α、IFN-β、IL-6、IL-12分泌變化分析兩者的相關性。采用單因素方差分析進行多組均數(shù)的比較,P0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。 結果在BV2細胞中有TLR4mRNA和TLR4蛋白的表達;HCV實驗組TLR4mRNA和TLR4蛋白均高于正常血清組及空白對照組,差異有統(tǒng)計學意義(P0.01),且HCV實驗組TLR4mRNA表達24h內(nèi)呈遞增趨勢;HCV實驗組IFN-α、IFN-β、IL-6、IL-12分泌明顯高于正常血清組及空白對照組,差異有統(tǒng)計學意義(P0.01);HCV實驗組TLR4阻斷后IFN-α、IFN-β、IL-6、IL-12分泌明顯減少,差異有統(tǒng)計學意義(P0.01),正常血清組和空白對照組阻斷TLR4前后無明顯變化(P0.05)。 結論HCV陽性血清刺激可引起體外培養(yǎng)的BV2細胞TLR4表達上調,激活細胞因子IFN-α、IFN-β、IL-6、IL-12等分泌發(fā)揮抗病毒作用,因此TLR4可能介導參與了CNS抗HCV固有免疫應答過程。
【學位授予單位】:寧夏醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2012
【分類號】:R512.63
本文編號:2656761
【學位授予單位】:寧夏醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2012
【分類號】:R512.63
【參考文獻】
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本文編號:2656761
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