【摘要】：目的應(yīng)用四氯化碳(CCI4)皮下注射方法,建立兔肝硬化動(dòng)物模型。觀察IV型膠原酶門脈灌注對(duì)肝硬化程度的影響,并檢測肝組織α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)表達(dá)與血清基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制物-1 (TIMP-1)變化,了解對(duì)于肝星狀細(xì)胞激活的影響。 方法雄性新西蘭大白兔隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組。實(shí)驗(yàn)組臀部皮下注射50%CCI。橄欖油0.23ml/kg,每周2次,對(duì)照組注射等量橄欖油。分別于4周、8周、12周末檢測各組兔肝臟功能,12周末進(jìn)行肝組織活檢檢查組織病理學(xué)變化。12周后各組動(dòng)物均建立門靜脈給藥通路,將已形成肝硬化并門靜脈插管成功的33只兔隨機(jī)分為兩組(組1,組2),組1為16只、組2為17只。組1經(jīng)門靜脈給藥通路注入0.1%Ⅳ型膠原酶1.5ml,組2注入等量0.9%氯化鈉,5次/周,共4周。將造模對(duì)照組中門靜脈插管成功的30只兔同樣隨機(jī)分為兩組(組3,組4),每組15只,處理方法同前。4周后,將各組動(dòng)物分別采血檢測血清TIMP-1后處死,留取肝臟組織,觀察其病理學(xué)變化,標(biāo)本固定后,行α-SMA免疫組織化學(xué)染色,行積分光密度、面密度分析。 結(jié)果隨時(shí)間延長,實(shí)驗(yàn)組兔肝臟纖維化程度逐漸加重,血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(GGT)明顯升高。12周末出現(xiàn)白蛋白/球蛋白比例倒置,可觀察到典型肝硬化病理表現(xiàn),兔肝組織出現(xiàn)典型的假小葉結(jié)構(gòu),動(dòng)物死亡率20%,造模成功率83%。對(duì)照組肝臟功能正常,肝臟組織學(xué)結(jié)構(gòu)正常。肝硬化動(dòng)物肝臟α-SMA表達(dá)顯著增強(qiáng);門脈灌注0.1%Ⅳ型膠原酶肝硬化動(dòng)物肝臟纖維化程度明顯降低,但與對(duì)照組相比,實(shí)驗(yàn)組α-SMA積分光密度為8.460±4.238,對(duì)照組為4.090±2.506,二者相比有顯著性差異-證明實(shí)驗(yàn)組肝臟α-SMA表達(dá)顯著增強(qiáng),血清TIMP-1為6.752±0.763ng/ml,較對(duì)照組6.165±0.072ng/ml顯著升高(P0.05)。 結(jié)論CCI4皮下注射可成功地建立兔肝硬化動(dòng)物模型,該方法成功率高,可用于相關(guān)實(shí)驗(yàn)研究。采用門脈灌注0.1%Ⅳ型膠原酶可顯著降低肝纖維化程度,但血清TIMP-1值及肝組織α-SMA表達(dá)可顯著增高,可能與肝臟肝星狀細(xì)胞激活有關(guān)。
【學(xué)位授予單位】：中國人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號(hào)】：R575.2

【引證文獻(xiàn)】

相關(guān)博士學(xué)位論文 前1條

1 許惠仙;草蓯蓉環(huán)烯醚萜苷對(duì)大鼠肝臟癌前病變保護(hù)機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究[D];延邊大學(xué);2012年

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本文編號(hào)：2645086