發(fā)布時間：2020-04-28 14:01

【摘要】：目的:觀察肝細胞脂變過程中甲狀腺素受體β1(TRβ1)及SUMO蛋白表達的變化情況,探討TRβ1類泛素化修飾是否參與肝脂沉積過程,以期為臨床NAFLD發(fā)病機制提供新的切入靶點。方法:1.免疫組化證實NAFLD人的肝組織中TRβ1與SUMO蛋白表達情況;2.體外培養(yǎng)人正常肝細胞WRL68細胞,用不同濃度的游離脂肪酸(Free fatty acid,FFA)(油酸:棕櫚酸=2:1)誘導(dǎo)WRL68細胞脂肪變,選出最佳誘導(dǎo)濃度及時間,建立脂肪肝細胞模型;3.將WRL68細胞分為兩組:正常對照組(Control組)及FFA誘導(dǎo)脂肪肝細胞組;分別于6H及24H用自動生化儀檢測細胞中甘油三脂及膽固醇的含量、油紅O染色評估肝細胞脂質(zhì)沉積程度;4.采用Western blot檢測觀察WRL68細胞中TRβ1及SUMO蛋白的表達情況。結(jié)果:1.NAFLD患者肝組織中TRβ1與SUMO1及SUMO3的蛋白表達較正常人明顯升高。2.肝細胞脂質(zhì)沉積結(jié)果顯示:用不同濃度FFA(0.0mM、0.25mM、0.5mM)分別處理WRL68細胞6H、24H及48H,誘導(dǎo)肝細胞脂肪變。成功建立脂肪肝細胞模型,結(jié)合油紅染色結(jié)果及細胞內(nèi)TG、TC值,FFA誘導(dǎo)濃度以0.5mM為最佳,且誘導(dǎo)后24H為觀察表型現(xiàn)象最佳時間。3.Western blot檢測WRL68細胞結(jié)果顯示:FFA誘導(dǎo)組TRβ1及SUMO1及SUMO3較Control組表達量明顯升高,且隨著誘導(dǎo)時間的增加表達量增加。結(jié)論:1.NAFLD肝組織中的TRβ1及SUMO1及SUMO3表達增加。2.肝細胞脂變過程中TRβ1及SUMO1及SUMO3表達增加,SUMO化修飾TRβ1參與了肝細胞脂變。
【圖文】：

第 3 章 實驗結(jié)果第 3 章 實驗結(jié)果3.1 NAFLD 患者肝組織中 TRβ1 與 SUMO 蛋白的表達NAFLD 患者鏡下肝組織成全肝小葉細胞空泡變性,排列紊亂，組織中 TRβ1 與 SUMO1 及 SUMO3 的蛋白表達，較正常人明顯升高與正常組相較，，差異具有顯著統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01），尤其是 TR的表達（見圖 3-1）。

與正常組相較，差異具有顯著統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01），尤其是 TR的表達（見圖 3-1）。A B圖 3-1 TRβ1 在正常對照組及 NAFLD 尸檢患者肝組織中的表達情況（IHC 10×40）A：正常對照組；B：NAFLD 尸檢患者肝組織中 TRβ1 的表達量明顯增多
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R575.5

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本文編號：2643545