【摘要】： 背景/目的：幽門螺桿菌（Helicobacter Pylori，H.pylori）是Marshall 和Warren于1982年成功分離的一種螺旋狀革蘭氏陰性桿菌，它的發(fā)現(xiàn)是 現(xiàn)代胃腸病學(xué)的里程碑之一。至今世界一半以上的人口屬于H.Pylori感染 人群，H.pylori是慢性胃炎、消化性潰瘍的主要致病因子，并且在胃腺癌 及胃黏膜相關(guān)性淋巴樣組織（MALT）淋巴瘤的發(fā)病中也起著重要作用。 不同的H.pylori菌株之間存在著毒力因子的差異，，但在同一環(huán)境中，不同 人群對同一類H.pylori菌株的感染其結(jié)局也不盡相同，顯然H.pylori感染 后人體免疫反應(yīng)對H.pylori感染的轉(zhuǎn)歸有重要的影響。目前的研究發(fā)現(xiàn)， H.pylori感染后，可產(chǎn)生強烈的體液和細胞免疫應(yīng)答，但似乎并不能根除 H.pylori感染。H.pylori感染后，人體長期穩(wěn)定地存在抗H.pylori抗體， 在胃黏膜局部以IgA型為主，在外周血中則以IgG型為主，急性期有IgM 型抗體的出現(xiàn)。對志愿者及動物實驗的研究發(fā)現(xiàn)，經(jīng)有效的H.pylori疫苗 免疫接種后，可產(chǎn)生清除H.pylori的免疫反應(yīng)，這些保護性抗H.pylori抗 體的型別主要為分泌型IgA，也有IgG型的報道。細胞免疫反應(yīng)方面，普 遍認為H.pylori感染后，Th1反應(yīng)主要導(dǎo)致病理性損傷，Th2反應(yīng)則有助 于清除H.pylori。動物實驗研究發(fā)現(xiàn)，平衡誘導(dǎo)Th1/Th2反應(yīng)的疫苗優(yōu)于 單純誘導(dǎo)Th2反應(yīng)的疫苗。盡管如此，H.pylori免疫學(xué)研究中還存在著許 弟四羊醫(yī)大學(xué)博土學(xué)位論文 多尚待闡明的問題，如：l、一般認為H．pylon抗原僅存在于胃型上皮組 織中，H．pylon抗原并不進入血液循環(huán)，但近來有學(xué)者發(fā)現(xiàn)患者外周血中 存在Hpylori可溶性抗原，上述矛盾產(chǎn)生的原因是什么，外周血中是否存 在Hpylori可溶性抗原，如果不存在，是否是由于H．pylorl感染者長期且 穩(wěn)定地存在高滴度的抗Hpylori抗體，從而產(chǎn)生了模擬H．pyb 抗原的抗 獨特型抗體（抗Jd人因此導(dǎo)致實驗出現(xiàn)了陽性結(jié)果？2、對 Hpylori的細 胞免疫研究發(fā)現(xiàn)，H．pJ，Ion陰性和陽性人群的外周血單個核細胞0BMC） 一樣，均可對Hpylori抗原產(chǎn)生增殖反應(yīng)，并且前者的增殖指數(shù)高于后者， 其原因尚缺乏明確的解釋。我們試圖探討產(chǎn)生這兩種現(xiàn)象的原因。 方法：l、運用膠乳凝結(jié)試驗法測定血清中的類風(fēng)濕因子；2、運用 PEG6000沉淀法清除血清標本中的抗原抗體復(fù)合物；3、設(shè)計3種不同的 ELISA檢測系統(tǒng)及竟?fàn)嶦LISA試驗，檢測Hpylori感染及末感染人群中 模擬HpylO：i抗原的抗二d：4、通過點印跡、SDS－PAGE及wfstCfl 印跡 法進一步鑒定H．pylorl感染者血清中模擬H．pylon抗原的抗丁 5、通過 h摻入法，觀察Hpylori陽性、陰性人群和新生兒臍血的PBMc對Hpylor。 抗原、空腸彎曲菌抗原、PHA及PHA聯(lián)合Hpylori抗原等的增殖反應(yīng)； 6、運用流式細胞術(shù)測定Hpylori陽性、陰性人群及新生兒臍血PBL中的 Thl、ThZ細胞群百分比；7、采用ELISA法測定Hpylori陽性、陰性人 群和新生）L臍血 PBMC分泌＊－10、TGF－fil的含量。 嗎 結(jié)果：l、200份可疑血清樣本中，有7例類風(fēng)濕因子陽性，陽性率 為35％。2、160份確診血清樣本經(jīng)3種ELIsA系統(tǒng)檢測發(fā)現(xiàn)，H．pylon” ’ 血清 樣本抗Jd卜性率（9500％、9375O／0、9625％）均明顯高于H．Pylon－ 血清樣本抗．Id的陽性率（2．500、1．250／O、5．00Q），二者具有顯著性差異 （P卜 P卜 P。wt001人 3種 ELISA 檢測系統(tǒng)間的差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P ＞0．05人3上00份可疑血清抗H．尸少ion抗體及抗丁d的陽性率分別為56．50 和 sl，00，兩者無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0．05）。4、200份可疑血清樣本經(jīng)3 一3一 第四車醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位淪義 種 ELISA系統(tǒng)檢測后發(fā)現(xiàn)，HpylOFI”血清樣本抗－Id的陽性率N4．69O、 9381％、9646％）均明顯高于 H．pylOOI－血清 樣本抗＊d白卜性率（230％、 115Q、4．60O），H者間差異顯著（PI，PZ，P3＜0．of），但 3種檢測系 統(tǒng)間差異沒有統(tǒng)計學(xué)意義（Pto005）。5、在不同ELISA系統(tǒng)中，PEG．6000 處理與否均未對OD值產(chǎn)生明顯影響（t test，P＞005）。6、競爭ELISA 試驗發(fā)現(xiàn)，HpylOOI抗原能以劑量依賴的方式抑制血清中抗二d與兔抗 Hpylori抗體的結(jié)合，而空腸彎曲菌抗原則沒有此作用。7、點印跡的結(jié) 果表明血清樣本經(jīng) 100“C加熱 3min或不處理，不能用于抗二 的檢測， 而經(jīng)65”C 30min處理后，可檢壩到抗－Id。8、SDS．PAGE及Wersten＊ 跡發(fā)現(xiàn)，Hpylori陽性
【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2001
【分類號】：R570.2

【參考文獻】

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本文編號：2643452