【摘要】： 目的對微載體貼附懸浮共培養(yǎng)的原代大鼠肝細胞的生物學(xué)功能進行評價,探討微載體貼附懸浮共培養(yǎng)對原代肝細胞功能特性的影響。 方法應(yīng)用半原位膠原酶灌注法分離獲得原代大鼠肝細胞,與肝星狀細胞株rHSC-99加入含cytodex-3的DMEM培養(yǎng)液中混合共培養(yǎng),定期檢測肝功能指標,并動態(tài)觀察肝細胞形態(tài)變化。 結(jié)果各培養(yǎng)組的細胞量、肝細胞的白蛋白及尿素合成量、安定轉(zhuǎn)化量在培養(yǎng)過程中均為先升高后逐漸下降,第4天最高;培養(yǎng)第4天起,微載體共培養(yǎng)組(D組)活細胞量高于單層共培養(yǎng)組(B組),微載體單培養(yǎng)組(C組)高于單層單培養(yǎng)組(A組),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05);蛋白及尿素合成量、安定轉(zhuǎn)化量,在培養(yǎng)第4～8天,D組高于B、C兩組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05);培養(yǎng)第4天起,A組白蛋白及尿素合成量、安定轉(zhuǎn)化量均低于B組、C組、D組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05);培養(yǎng)第4天細胞總RNA豐度各組均較高,且D組高于B組,C組高于A組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05)。光鏡下見肝細胞正常形態(tài)A組維持時間1約0天,B、C、D三組可維持2W以上,D組部分肝細胞可達3W以上。 結(jié)論肝星狀細胞與肝細胞微載體貼附懸浮共培養(yǎng),較肝細胞微載體單獨培養(yǎng)、肝細胞單層共培養(yǎng)能進一步提高肝細胞的功能表達、延長細胞生長時間。肝星狀細胞與肝細胞微載體共培養(yǎng),可以做為一個較為理想的體外肝細胞培養(yǎng)模式。
【圖文】：

各培養(yǎng)組不同培養(yǎng)時間活細胞數(shù)

各培養(yǎng)組不同培養(yǎng)時間細胞活率
【學(xué)位授予單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2007
【分類號】：R575

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本文編號：2630685