發(fā)布時間：2020-04-16 18:07

【摘要】： 目的:本實驗研究通過建立大鼠慢性胰腺炎模型,探討使用抗氧化劑普羅布考對大鼠慢性胰腺炎的治療作用及其作用機制。 方法: 第一部分 采用腹腔內(nèi)注射10%的二乙基二硫代氨基甲酸鹽(diethyldithiocarbam- ate,DDC)500mg/kg制造大鼠慢性胰腺炎模型。將48只雄性SD大鼠稱重、編號,應(yīng)用隨機數(shù)字表將其隨機分為模型組和對照組2組,每組24只大鼠。對模型組大鼠,每周2次腹腔內(nèi)注射10%的DDC500mg/kg,對照組大鼠則每周2次腹腔內(nèi)注射生理鹽水0.5ml/kg。從術(shù)后24小時開始,分別于手術(shù)后24小時、48小時、1周、2周、3周、4周稱量體重后處死模型組和對照組的各4只大鼠,測定血清及胰腺組織中的超氧歧化酶( superoxide dismutase,SOD )、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量; HE染色病理切片觀察胰腺纖維化的程度;免疫組織化學檢測胰腺組織中α-平滑肌肌動蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、膠原蛋白Ⅰ(CollagenⅠ,CO-Ⅰ)和轉(zhuǎn)化生長因子β(1transforming growth factorbeta-1,TGF-β_1)表達情況。 第二部分 模型制造成功后取50只雄性SD大鼠,體重220~240g,隨機分為5組,每組10只:對照組(A組)、模型組(B組)、普羅布考治療組(C、D、E組)。普羅布考治療分為3個劑量組:分別為75mg/ kg(普低組,C組)、150mg/ kg(普中組,D組)、300mg/ kg(普高組,E組)連續(xù)喂養(yǎng)4周;而對照組和模型組則予以同體積的0.9%生理鹽水喂養(yǎng)。喂養(yǎng)4周后稱量體重后處死大鼠取標本測定血清及胰腺組織中的超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量;HE染色病理切片觀察胰腺纖維化的程度;免疫組織化學檢測胰腺組織中轉(zhuǎn)化生長因子β_1(TGF-β_1)表達情況。 結(jié)果(一): 1.體重的觀察:實驗的前1周,對照組和模型組大鼠體重都有增長,對照組增長稍快,模型組增長緩慢,但是兩組間無顯著性差異(P0.05);1周后,對照組大鼠體重繼續(xù)增長,但是,模型組大鼠體重不增反降,兩組間體重有顯著性差異(P0.01)。 2.α-SMA、CO-Ⅰ、TGFβ_1的表達:對照組胰腺組織α-SMA、CO-Ⅰ、TGFβ_1未見明顯表達,幾乎無纖維化跡象;各模型組之間的比較僅24小時與48小時比較P0.05,兩組之間無統(tǒng)計學差異;余下各組之間比較均有顯著性差異,且隨著時間的延長,α-SMA、CO-Ⅰ、TGFβ_1表達明顯增多、大鼠胰腺纖維化的程度加重,排序順序依次為24小時48小時1周2周3周4周。 3.血清和胰腺組織中的SOD、MDA:對照組血清和胰腺組織中的SOD、MDA值在整個實驗過程中無明顯變化,而模型組血清和胰腺組織SOD值在各時間點較對照組顯著降低,相應(yīng)的MDA值較對照組顯著升高。 結(jié)論(一): 1.每周2次腹腔內(nèi)注射10%的DDC500mg/kg能夠制造穩(wěn)定的大鼠慢性胰腺炎模型,成模時間在4周時即較為典型。 2.胰腺炎中TGF-β_1表達、胰腺纖維化與氧化損傷有關(guān),氧化應(yīng)激參與了慢性胰腺炎的發(fā)病過程。 結(jié)果(二) 1.體重的觀察:模型組大鼠則食欲欠佳,到后期更是萎靡不振。只進食很少量的飼料,體重下降,毛發(fā)無光澤,有的大鼠有尿失禁、腹瀉等現(xiàn)象。而普羅布考處理組的大鼠體重較模型組增加,差異有顯著性(P0.01)。 2. TGF-β_1表達:與模型組相比普羅布考組胰腺組織中TGF-β_1的表達量下降,胰腺組織中的膠原纖維的表達量亦顯著減少,胰腺纖維化的程度明顯改善。 3.血清和胰腺組織中的MDA:與模型組相比普羅布考治療組血清和胰腺組織中的MDA較模型組低,差異有顯著性(P0.01),隨著普羅布考治療劑量的增加,血清和胰腺組織中的MDA含量逐漸下降,其MDA含量排序依次為模型組(B組)普低組(C組)普中組(D組)普高組(E組)對照組(A組)。 4.血清和胰腺組織中的SOD:與模型組相比普羅布考各治療組血清和胰腺組織中的SOD較模型組高,差異有顯著性(P0.01),隨著普羅布考治療劑量的增加,血清和胰腺組織中的SOD含量逐漸升高,其SOD含量排序依次為模型組(B組)普低組(C組)普中組(D組)普高組(E組)對照組(A組)。 5.各組胰腺組織表達TGF-β_1和血清MDA呈明顯正相關(guān),相關(guān)系數(shù)r分別為:模型組(B組)=0.860,P 0.01;普低組(C組)=0.791,P 0.05;普中組(D組)=0.836,P 0.05;普高組(E組)=0.861,P 0.01。 6.除普低組(C組)外其余各組胰腺組織表達TGF-β_1和胰腺組織MDA呈明顯正相關(guān),相關(guān)系數(shù)r分別為:模型組(B組)=0.718,P 0.05;普低組(C組)=0.689,P 0.05;普中組(D組)=0.861,P 0.01;普高組(E組)=0.750,P 0.05。 7.各組胰腺組織表達TGFβ_1表達和血清SOD呈明顯負相關(guān),相關(guān)系數(shù)r分別為:模型組(B組)=-0.804,P 0.05;普低組(C組)=-0.819,P 0.05;普中組(D組)=-0.805,P 0.05;普高組(E組)=-0.837,P 0.01。 8.除普低組(C組)外其余各組胰腺組織表達TGFβ_1表達和胰腺SOD呈明顯負相關(guān),相關(guān)系數(shù)r分別為:模型組(B組)=-0.737,P 0.05;普低組(C組)=-0.687,P 0.05;普中組(D組)=-0.781,P 0.05;普高組(E組)=-0.846,P 0.01。 結(jié)論(二) 普羅布考顯著提高了機體的抗氧化能力,降低了TGF-β_1的表達,減少了胰腺組織中的纖維含量,對大鼠慢性胰腺炎模型具有抗纖維化作用。
【圖文】：

圖1-13：各組胰腺組織表達TGFβ1表達與血清MDA的關(guān)系①模型組：TGFβ1表達與血清MDA呈正相關(guān)關(guān)系，，相關(guān)系數(shù)為：0.860，P < 0.01。②普低組：TGFβ1表達與血清MDA呈正相關(guān)關(guān)系，相關(guān)系數(shù)為：0.791，P < 0.05。③普中組：TGFβ1表達與血清MDA呈正相關(guān)關(guān)系，相關(guān)系數(shù)為：0.836，P < 0.05。④普高組：TGFβ1表達與血清MDA呈正相關(guān)關(guān)系，相關(guān)系數(shù)為：0.861，P < 0.01。

圖1-14：各組胰腺組織表達TGFβ1表達與血清SOD的關(guān)系①模型組：TGFβ1表達與血清SOD呈負相關(guān)關(guān)系，相關(guān)系數(shù)為：-0.804，P < 0.05。②普低組：TGFβ1表達與血清SOD呈負相關(guān)關(guān)系，相關(guān)系數(shù)為：-0.819，P < 0.05。③普中組：TGFβ1表達與血清SOD呈負相關(guān)關(guān)系，相關(guān)系數(shù)為：-0.805，P < 0.05。④普高組：TGFβ1表達與血清 SOD 呈負相關(guān)關(guān)系，相關(guān)系數(shù)為：-0.837，P < 0.01。
【學位授予單位】：南華大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2007
【分類號】：R576

【參考文獻】

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1 袁耀宗,蕭樹東;慢性胰腺炎發(fā)病機制和藥物治療的若干進展[J];當代醫(yī)學;2001年05期

2 何少武,胡先貴,金鋼,倪燦榮,張順民;TGF-β_1和α-SMA在慢性胰腺炎組織中的表達及意義[J];第二軍醫(yī)大學學報;2003年11期

3 姜永鋒;急性胰腺炎的實驗研究進展(綜述)[J];國外醫(yī)學.外科學分冊;1996年01期

4 李春艷,崔美芝,成曉松,劉忠誠,董秀華;急性胰腺炎動物模型概況[J];哈爾濱醫(yī)科大學學報;1998年04期

5 嚴鵬科,廖端芳,楊永宗;普羅布考對巨噬細胞分泌基質(zhì)金屬蛋白酶9的抑制作用[J];中國動脈硬化雜志;2003年03期

6 梁林,馮凱琳,呂維富;胰腺分裂在慢性胰腺炎病因?qū)W中的作用及其發(fā)病機制[J];實用放射學雜志;2000年09期

7 巫協(xié)寧;慢性胰腺炎胰纖維化形成機制新解[J];胃腸病學;1999年03期

8 孫蘊偉,袁耀宗;結(jié)締組織生長因子及其在胰腺纖維化中的作用機制[J];胰腺病學;2003年02期

9 王興鵬;胰腺星狀細胞與胰腺纖維化[J];胰腺病學;2004年02期

10 耿智敏,向國安,韓慶,劉效恭,蘇寶山,劉青光,潘承恩;轉(zhuǎn)化生長因子β_1在膽管愈合過程中的表達及意義[J];中國普外基礎(chǔ)與臨床雜志;2000年06期

本文編號：2629880