【摘要】： 目的:本實(shí)驗(yàn)研究通過建立大鼠慢性胰腺炎模型,探討使用抗氧化劑普羅布考對(duì)大鼠慢性胰腺炎的治療作用及其作用機(jī)制。 方法: 第一部分 采用腹腔內(nèi)注射10%的二乙基二硫代氨基甲酸鹽(diethyldithiocarbam- ate,DDC)500mg/kg制造大鼠慢性胰腺炎模型。將48只雄性SD大鼠稱重、編號(hào),應(yīng)用隨機(jī)數(shù)字表將其隨機(jī)分為模型組和對(duì)照組2組,每組24只大鼠。對(duì)模型組大鼠,每周2次腹腔內(nèi)注射10%的DDC500mg/kg,對(duì)照組大鼠則每周2次腹腔內(nèi)注射生理鹽水0.5ml/kg。從術(shù)后24小時(shí)開始,分別于手術(shù)后24小時(shí)、48小時(shí)、1周、2周、3周、4周稱量體重后處死模型組和對(duì)照組的各4只大鼠,測定血清及胰腺組織中的超氧歧化酶( superoxide dismutase,SOD )、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量; HE染色病理切片觀察胰腺纖維化的程度;免疫組織化學(xué)檢測胰腺組織中α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、膠原蛋白Ⅰ(CollagenⅠ,CO-Ⅰ)和轉(zhuǎn)化生長因子β(1transforming growth factorbeta-1,TGF-β_1)表達(dá)情況。 第二部分 模型制造成功后取50只雄性SD大鼠,體重220~240g,隨機(jī)分為5組,每組10只:對(duì)照組(A組)、模型組(B組)、普羅布考治療組(C、D、E組)。普羅布考治療分為3個(gè)劑量組:分別為75mg/ kg(普低組,C組)、150mg/ kg(普中組,D組)、300mg/ kg(普高組,E組)連續(xù)喂養(yǎng)4周;而對(duì)照組和模型組則予以同體積的0.9%生理鹽水喂養(yǎng)。喂養(yǎng)4周后稱量體重后處死大鼠取標(biāo)本測定血清及胰腺組織中的超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量;HE染色病理切片觀察胰腺纖維化的程度;免疫組織化學(xué)檢測胰腺組織中轉(zhuǎn)化生長因子β_1(TGF-β_1)表達(dá)情況。 結(jié)果(一): 1.體重的觀察:實(shí)驗(yàn)的前1周,對(duì)照組和模型組大鼠體重都有增長,對(duì)照組增長稍快,模型組增長緩慢,但是兩組間無顯著性差異(P0.05);1周后,對(duì)照組大鼠體重繼續(xù)增長,但是,模型組大鼠體重不增反降,兩組間體重有顯著性差異(P0.01)。 2.α-SMA、CO-Ⅰ、TGFβ_1的表達(dá):對(duì)照組胰腺組織α-SMA、CO-Ⅰ、TGFβ_1未見明顯表達(dá),幾乎無纖維化跡象;各模型組之間的比較僅24小時(shí)與48小時(shí)比較P0.05,兩組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;余下各組之間比較均有顯著性差異,且隨著時(shí)間的延長,α-SMA、CO-Ⅰ、TGFβ_1表達(dá)明顯增多、大鼠胰腺纖維化的程度加重,排序順序依次為24小時(shí)48小時(shí)1周2周3周4周。 3.血清和胰腺組織中的SOD、MDA:對(duì)照組血清和胰腺組織中的SOD、MDA值在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中無明顯變化,而模型組血清和胰腺組織SOD值在各時(shí)間點(diǎn)較對(duì)照組顯著降低,相應(yīng)的MDA值較對(duì)照組顯著升高。 結(jié)論(一): 1.每周2次腹腔內(nèi)注射10%的DDC500mg/kg能夠制造穩(wěn)定的大鼠慢性胰腺炎模型,成模時(shí)間在4周時(shí)即較為典型。 2.胰腺炎中TGF-β_1表達(dá)、胰腺纖維化與氧化損傷有關(guān),氧化應(yīng)激參與了慢性胰腺炎的發(fā)病過程。 結(jié)果(二) 1.體重的觀察:模型組大鼠則食欲欠佳,到后期更是萎靡不振。只進(jìn)食很少量的飼料,體重下降,毛發(fā)無光澤,有的大鼠有尿失禁、腹瀉等現(xiàn)象。而普羅布考處理組的大鼠體重較模型組增加,差異有顯著性(P0.01)。 2. TGF-β_1表達(dá):與模型組相比普羅布考組胰腺組織中TGF-β_1的表達(dá)量下降,胰腺組織中的膠原纖維的表達(dá)量亦顯著減少,胰腺纖維化的程度明顯改善。 3.血清和胰腺組織中的MDA:與模型組相比普羅布考治療組血清和胰腺組織中的MDA較模型組低,差異有顯著性(P0.01),隨著普羅布考治療劑量的增加,血清和胰腺組織中的MDA含量逐漸下降,其MDA含量排序依次為模型組(B組)普低組(C組)普中組(D組)普高組(E組)對(duì)照組(A組)。 4.血清和胰腺組織中的SOD:與模型組相比普羅布考各治療組血清和胰腺組織中的SOD較模型組高,差異有顯著性(P0.01),隨著普羅布考治療劑量的增加,血清和胰腺組織中的SOD含量逐漸升高,其SOD含量排序依次為模型組(B組)普低組(C組)普中組(D組)普高組(E組)對(duì)照組(A組)。 5.各組胰腺組織表達(dá)TGF-β_1和血清MDA呈明顯正相關(guān),相關(guān)系數(shù)r分別為:模型組(B組)=0.860,P 0.01;普低組(C組)=0.791,P 0.05;普中組(D組)=0.836,P 0.05;普高組(E組)=0.861,P 0.01。 6.除普低組(C組)外其余各組胰腺組織表達(dá)TGF-β_1和胰腺組織MDA呈明顯正相關(guān),相關(guān)系數(shù)r分別為:模型組(B組)=0.718,P 0.05;普低組(C組)=0.689,P 0.05;普中組(D組)=0.861,P 0.01;普高組(E組)=0.750,P 0.05。 7.各組胰腺組織表達(dá)TGFβ_1表達(dá)和血清SOD呈明顯負(fù)相關(guān),相關(guān)系數(shù)r分別為:模型組(B組)=-0.804,P 0.05;普低組(C組)=-0.819,P 0.05;普中組(D組)=-0.805,P 0.05;普高組(E組)=-0.837,P 0.01。 8.除普低組(C組)外其余各組胰腺組織表達(dá)TGFβ_1表達(dá)和胰腺SOD呈明顯負(fù)相關(guān),相關(guān)系數(shù)r分別為:模型組(B組)=-0.737,P 0.05;普低組(C組)=-0.687,P 0.05;普中組(D組)=-0.781,P 0.05;普高組(E組)=-0.846,P 0.01。 結(jié)論(二) 普羅布考顯著提高了機(jī)體的抗氧化能力,降低了TGF-β_1的表達(dá),減少了胰腺組織中的纖維含量,對(duì)大鼠慢性胰腺炎模型具有抗纖維化作用。
【圖文】：

圖1-13：各組胰腺組織表達(dá)TGFβ1表達(dá)與血清MDA的關(guān)系①模型組：TGFβ1表達(dá)與血清MDA呈正相關(guān)關(guān)系，，相關(guān)系數(shù)為：0.860，P < 0.01。②普低組：TGFβ1表達(dá)與血清MDA呈正相關(guān)關(guān)系，相關(guān)系數(shù)為：0.791，P < 0.05。③普中組：TGFβ1表達(dá)與血清MDA呈正相關(guān)關(guān)系，相關(guān)系數(shù)為：0.836，P < 0.05。④普高組：TGFβ1表達(dá)與血清MDA呈正相關(guān)關(guān)系，相關(guān)系數(shù)為：0.861，P < 0.01。

圖1-14：各組胰腺組織表達(dá)TGFβ1表達(dá)與血清SOD的關(guān)系①模型組：TGFβ1表達(dá)與血清SOD呈負(fù)相關(guān)關(guān)系，相關(guān)系數(shù)為：-0.804，P < 0.05。②普低組：TGFβ1表達(dá)與血清SOD呈負(fù)相關(guān)關(guān)系，相關(guān)系數(shù)為：-0.819，P < 0.05。③普中組：TGFβ1表達(dá)與血清SOD呈負(fù)相關(guān)關(guān)系，相關(guān)系數(shù)為：-0.805，P < 0.05。④普高組：TGFβ1表達(dá)與血清 SOD 呈負(fù)相關(guān)關(guān)系，相關(guān)系數(shù)為：-0.837，P < 0.01。
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2007
【分類號(hào)】：R576

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2629880