【摘要】：背景及目標(biāo):肝臟缺血再灌注(Hepatic ischemia-reperfusion,I/R)損傷是臨床肝臟移植和手術(shù)中常見(jiàn)的組織損傷,發(fā)生率極高,會(huì)導(dǎo)致嚴(yán)重的移植后或手術(shù)后肝臟功能障礙甚至器官衰竭。組織缺血再灌注損傷的病理過(guò)程的典型特征是大量細(xì)胞死亡和嚴(yán)重的炎癥反應(yīng)。包括NF-κB和MAPK/Jnk/p-38通路在內(nèi)的多條分子信號(hào)通路均參與缺血再灌注過(guò)程中的細(xì)胞存亡和炎癥反應(yīng)的調(diào)節(jié)。雙特異性磷酸酶 14(Dual specific phosphatase 14,DUSP14)能夠調(diào)控 NF-κB 通路,影響炎癥反應(yīng),但其是否參與組織缺血再灌注損傷的調(diào)節(jié)尚不清楚。本研究旨在探究DUSP14在肝臟缺血再灌注損傷中的作用,闡明其具體機(jī)制。方法:通過(guò)構(gòu)建 DUSP14 肝臟特異性敲除(Hepatocyte-specific Duspl4 knockout,HKO)和過(guò)表達(dá)(Hepatocyte-specificDuspl4 transgenic,HTG)小鼠,建立體外肝臟缺血再灌注模型。分離小鼠的原代肝細(xì)胞進(jìn)行缺氧/復(fù)氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)實(shí)驗(yàn),建立體外細(xì)胞模型。收集小鼠的血清和肝臟組織樣品,檢測(cè)血清和組織中的炎性因子和組織病理?yè)p傷程度。應(yīng)用RT-PCR、Western blot、Co-IP、pull-down等分子生物學(xué)技術(shù)探尋DUSP14調(diào)控肝臟缺血再灌注損傷的關(guān)鍵靶分子和機(jī)制。結(jié)果:實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明,DUSP14不僅參與了肝臟缺血再灌注損傷,而且發(fā)揮著重要的保護(hù)肝細(xì)胞的作用。DUSP14能夠減少肝細(xì)胞在缺血再灌注過(guò)程中的死亡,抑制組織炎癥反應(yīng),促進(jìn)肝細(xì)胞的增殖或再生,減輕肝臟損傷。實(shí)驗(yàn)結(jié)果還發(fā)現(xiàn),TAK1是介導(dǎo)DUSP14調(diào)控肝臟缺血再灌注損傷的關(guān)鍵蛋白。DUSP14與TAK1結(jié)合互作,并抑制其磷酸化激活,進(jìn)而抑制NF-κB和MAPK/Jnk/p-38通路分子的活化,減輕細(xì)胞損傷和炎癥反應(yīng)。結(jié)論:綜上所述,DUSP14是抑制肝臟缺血再灌注損傷,保護(hù)肝細(xì)胞的重要分子蛋白,通過(guò)調(diào)控DUSP14-TAKl-Jnk/p-38信號(hào)通路可以調(diào)節(jié)肝臟缺血再灌注的病理過(guò)程,為臨床中預(yù)防和治療組織缺血再灌注損傷提供有意義的策略和方法。
【圖文】：

而身體主要臟器和組織中的ＤＵＳＰ１４表達(dá)量并無(wú)明顯變化。病理Ｈ＆Ｅ逡逑染色結(jié)果證明，與對(duì)照組相比，ＬｙｓＭ－ＤＭｊＷ－ＫＯ小鼠的肝臟損傷面積并無(wú)明顯逡逑改變（圖３邋Ｃ），細(xì)胞損傷程度也沒(méi)有明顯差異（圖３Ｄ）。血清轉(zhuǎn)氨酶檢測(cè)結(jié)果逡逑也說(shuō)明ＬｙｓＭ－ＤｗｉｐＭ－ＫＯ小鼠的肝功能受損程度與對(duì)照組小鼠相同（圖３邋Ｅ）。逡逑這些實(shí)驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明，髓系細(xì)胞中的ＤＵＳＰ１４并不影響肝臟的缺血再灌注損傷。逡逑綜上所述，ＤＵＳＰ１４不僅參與了肝臟缺血再灌注損傷過(guò)程，而且發(fā)揮著重要逡逑的調(diào)節(jié)作用。肝細(xì)胞中的ＤＵＳＰ１４可以保護(hù)肝細(xì)胞，減輕組織損傷，，改善肝臟功逡逑能；而髓系細(xì)胞中的ＤＵＳＰ１４對(duì)肝臟缺血再灌注損傷則無(wú)明顯的調(diào)節(jié)作用，說(shuō)明逡逑ＤＵＳＰ１４的這一作用具有組織特異性。逡逑Ａ邋＿＿—邋Ｋ—邋Ｈ邋咖邐一 逡逑ＷＴ邋ＨＫＯ邋ＷＴ邋ＨＫＯ邋ＷＴ邋ＨＫＯ邋ＷＴ邋ＨＫＯ邐ＷＴ邋Ｄｕｓｐ１４－ＨＫＯ逡逑Ｄｕｓｐ１４邐２２ＫＤａ邋Ｄｕｓｐ１４邐２２ＫＤａ逡逑Ｇａｐｄｈ邐３７ＫＤａ邋Ｇａｐｄｌｉ邐３７ＫＤａ逡逑Ｂ邐ｌ／Ｒ邋（ｈ）逡逑Ｓｈａｍ邐１邐６邐２４逡逑■■■■逡逑ｍｕｕｍ逡逑ｒ逡逑９０，邋＂邋ＷＴ邐５

圖５邋Ｄ和Ｅ）
【學(xué)位授予單位】：武漢大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類(lèi)號(hào)】：R575

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2616431