【摘要】：背景及目標:肝臟缺血再灌注(Hepatic ischemia-reperfusion,I/R)損傷是臨床肝臟移植和手術(shù)中常見的組織損傷,發(fā)生率極高,會導致嚴重的移植后或手術(shù)后肝臟功能障礙甚至器官衰竭。組織缺血再灌注損傷的病理過程的典型特征是大量細胞死亡和嚴重的炎癥反應(yīng)。包括NF-κB和MAPK/Jnk/p-38通路在內(nèi)的多條分子信號通路均參與缺血再灌注過程中的細胞存亡和炎癥反應(yīng)的調(diào)節(jié)。雙特異性磷酸酶 14(Dual specific phosphatase 14,DUSP14)能夠調(diào)控 NF-κB 通路,影響炎癥反應(yīng),但其是否參與組織缺血再灌注損傷的調(diào)節(jié)尚不清楚。本研究旨在探究DUSP14在肝臟缺血再灌注損傷中的作用,闡明其具體機制。方法:通過構(gòu)建 DUSP14 肝臟特異性敲除(Hepatocyte-specific Duspl4 knockout,HKO)和過表達(Hepatocyte-specificDuspl4 transgenic,HTG)小鼠,建立體外肝臟缺血再灌注模型。分離小鼠的原代肝細胞進行缺氧/復氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)實驗,建立體外細胞模型。收集小鼠的血清和肝臟組織樣品,檢測血清和組織中的炎性因子和組織病理損傷程度。應(yīng)用RT-PCR、Western blot、Co-IP、pull-down等分子生物學技術(shù)探尋DUSP14調(diào)控肝臟缺血再灌注損傷的關(guān)鍵靶分子和機制。結(jié)果:實驗結(jié)果證明,DUSP14不僅參與了肝臟缺血再灌注損傷,而且發(fā)揮著重要的保護肝細胞的作用。DUSP14能夠減少肝細胞在缺血再灌注過程中的死亡,抑制組織炎癥反應(yīng),促進肝細胞的增殖或再生,減輕肝臟損傷。實驗結(jié)果還發(fā)現(xiàn),TAK1是介導DUSP14調(diào)控肝臟缺血再灌注損傷的關(guān)鍵蛋白。DUSP14與TAK1結(jié)合互作,并抑制其磷酸化激活,進而抑制NF-κB和MAPK/Jnk/p-38通路分子的活化,減輕細胞損傷和炎癥反應(yīng)。結(jié)論:綜上所述,DUSP14是抑制肝臟缺血再灌注損傷,保護肝細胞的重要分子蛋白,通過調(diào)控DUSP14-TAKl-Jnk/p-38信號通路可以調(diào)節(jié)肝臟缺血再灌注的病理過程,為臨床中預(yù)防和治療組織缺血再灌注損傷提供有意義的策略和方法。
【圖文】：

而身體主要臟器和組織中的ＤＵＳＰ１４表達量并無明顯變化。病理Ｈ＆Ｅ逡逑染色結(jié)果證明，與對照組相比，ＬｙｓＭ－ＤＭｊＷ－ＫＯ小鼠的肝臟損傷面積并無明顯逡逑改變（圖３邋Ｃ），細胞損傷程度也沒有明顯差異（圖３Ｄ）。血清轉(zhuǎn)氨酶檢測結(jié)果逡逑也說明ＬｙｓＭ－ＤｗｉｐＭ－ＫＯ小鼠的肝功能受損程度與對照組小鼠相同（圖３邋Ｅ）。逡逑這些實驗結(jié)果說明，髓系細胞中的ＤＵＳＰ１４并不影響肝臟的缺血再灌注損傷。逡逑綜上所述，ＤＵＳＰ１４不僅參與了肝臟缺血再灌注損傷過程，而且發(fā)揮著重要逡逑的調(diào)節(jié)作用。肝細胞中的ＤＵＳＰ１４可以保護肝細胞，減輕組織損傷，，改善肝臟功逡逑能；而髓系細胞中的ＤＵＳＰ１４對肝臟缺血再灌注損傷則無明顯的調(diào)節(jié)作用，說明逡逑ＤＵＳＰ１４的這一作用具有組織特異性。逡逑Ａ邋＿＿—邋Ｋ—邋Ｈ邋咖邐一 逡逑ＷＴ邋ＨＫＯ邋ＷＴ邋ＨＫＯ邋ＷＴ邋ＨＫＯ邋ＷＴ邋ＨＫＯ邐ＷＴ邋Ｄｕｓｐ１４－ＨＫＯ逡逑Ｄｕｓｐ１４邐２２ＫＤａ邋Ｄｕｓｐ１４邐２２ＫＤａ逡逑Ｇａｐｄｈ邐３７ＫＤａ邋Ｇａｐｄｌｉ邐３７ＫＤａ逡逑Ｂ邐ｌ／Ｒ邋（ｈ）逡逑Ｓｈａｍ邐１邐６邐２４逡逑■■■■逡逑ｍｕｕｍ逡逑ｒ逡逑９０，邋＂邋ＷＴ邐５

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【學位授予單位】：武漢大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R575

【參考文獻】

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本文編號：2616431