【摘要】：目的:本課題旨在通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)對(duì)酒精性肝病患者(alcoholic liver disease,ALD)的腸道菌群中雙歧桿菌、乳酸桿菌、大腸桿菌、糞腸球菌、脆弱擬桿菌及柔嫩梭菌進(jìn)行定量分析,探討其與丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(Alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(Aspartate aminotransferase,AST)和總膽紅素(Total bilirubin,TBil)等肝功能評(píng)價(jià)指標(biāo)的關(guān)系,以便為ALD的防治提供新的思路。方法:1.選取醫(yī)院就診ALD患者樣本42人,留取大便標(biāo)本,使用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)對(duì)大便菌群中雙歧桿菌、乳酸桿菌、大腸桿菌、糞腸球菌、脆弱擬桿菌及柔嫩梭菌進(jìn)行定量分析,同期選取22名無(wú)長(zhǎng)期大量飲酒經(jīng)歷的健康男性做為對(duì)照組,使用SPSS 21.0軟件對(duì)腸道菌群數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。2.排除未留取肝功能血清標(biāo)本的患者后,最終有31人成功留取血標(biāo)本,對(duì)照組另選20名無(wú)長(zhǎng)期大量飲酒經(jīng)歷的健康男性入組;采用全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定ALD患者血清丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)活力、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)活力和總膽紅素(TBil)含量。使用SPSS 21.0軟件對(duì)腸道菌群的有顯著改變的菌株與肝臟功能生化指標(biāo)作Pearson相關(guān)性分析。結(jié)果1.1組ALD患者大便菌群中雙歧桿菌為5.52±1.73(copies/g)和脆弱擬桿菌為7.01±0.72(copies/g),與對(duì)照組雙歧桿菌和脆弱擬桿菌相比明顯減少,差別具有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);而大腸桿菌、糞腸球菌、乳酸桿菌和柔嫩梭菌含量與對(duì)照組比較有改變,但差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。2.與對(duì)照組相比,2組ALD患者的ALT活力、AST活力及TBil含量顯著增高,分別達(dá)到43.47±23.57 U/L、40.07±26.55 U/L和17.47±10.71μmol/L(P0.05)。將2組ALD患者大便菌群的雙歧桿菌和ALT、AST及TBil等肝功能生化指標(biāo)進(jìn)行相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn),雙歧桿菌與ALT(r=-0.64)、AST(r=-0.45)存在中等負(fù)相關(guān)性(P0.01),與TBil存在弱負(fù)相關(guān)性(r=-0.11,P0.05)。結(jié)論1.酒精性肝病患者存在腸道菌群失調(diào),雙歧桿菌、脆弱擬桿菌較健康人群明顯減少。2.ALD患者肝臟的ALT活力、AST活力及TBil含量顯著升高,且雙歧桿菌與肝功能生化指標(biāo)ALT及AST存在負(fù)相關(guān)性。
【圖文】：

種標(biāo)準(zhǔn)菌株的實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增片段M：DL2000DNAMarker；1：雙歧桿菌；2：乳酸桿菌；3：大腸桿菌；4：糞腸球菌；5：脆弱擬桿菌；6：柔嫩梭菌

圖 1.2 6 種標(biāo)準(zhǔn)菌株的 PCR 擴(kuò)增曲線A：雙歧桿菌；B：乳酸桿菌；C：大腸桿菌；D：糞腸球菌；E：脆弱擬桿菌；F：柔3 標(biāo)準(zhǔn)菌株實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 標(biāo)準(zhǔn)曲線及線性回歸方程6 種標(biāo)準(zhǔn)菌株 PCR 擴(kuò)增產(chǎn)物濃度換算為拷貝數(shù)分別為雙歧桿菌 3.6×101酸桿菌 3.1×1011/μl，大腸桿菌 2.8×1011/μl，糞腸球菌 9.6×1011/μl，脆弱擬桿菌/μl，柔嫩梭菌 2.2×1010/μl。圖 1.3 顯示，以經(jīng) 10 倍系列稀釋的各標(biāo)準(zhǔn)品為模
【學(xué)位授予單位】：青島大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R575

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前3條

1 高瀟雪;劉立新;;酒精性肝病流行病學(xué)及發(fā)病機(jī)制研究進(jìn)展[J];中華消化病與影像雜志(電子版);2016年02期

2 臧月;王生;劉楠;劉莉;梅其炳;;腸道菌群失調(diào)介導(dǎo)酒精性肝病發(fā)生發(fā)展的機(jī)制研究進(jìn)展[J];中國(guó)藥理學(xué)通報(bào);2016年04期

3 Giulia Malaguarnera;Maria Giordano;Giuseppe Nunnari;Gaetano Bertino;Michele Malaguarnera;;Gut microbiota in alcoholic liver disease: Pathogenetic role and therapeutic perspectives[J];World Journal of Gastroenterology;2014年44期

，

本文編號(hào)：2611936