發(fā)布時間：2020-04-02 12:11

【摘要】：目的:本課題旨在通過實時熒光定量PCR技術對酒精性肝病患者(alcoholic liver disease,ALD)的腸道菌群中雙歧桿菌、乳酸桿菌、大腸桿菌、糞腸球菌、脆弱擬桿菌及柔嫩梭菌進行定量分析,探討其與丙氨酸轉氨酶(Alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸氨基轉移酶(Aspartate aminotransferase,AST)和總膽紅素(Total bilirubin,TBil)等肝功能評價指標的關系,以便為ALD的防治提供新的思路。方法:1.選取醫(yī)院就診ALD患者樣本42人,留取大便標本,使用實時熒光定量PCR技術對大便菌群中雙歧桿菌、乳酸桿菌、大腸桿菌、糞腸球菌、脆弱擬桿菌及柔嫩梭菌進行定量分析,同期選取22名無長期大量飲酒經歷的健康男性做為對照組,使用SPSS 21.0軟件對腸道菌群數據進行統(tǒng)計學分析。2.排除未留取肝功能血清標本的患者后,最終有31人成功留取血標本,對照組另選20名無長期大量飲酒經歷的健康男性入組;采用全自動生化分析儀測定ALD患者血清丙氨酸轉氨酶(ALT)活力、天冬氨酸氨基轉移酶(AST)活力和總膽紅素(TBil)含量。使用SPSS 21.0軟件對腸道菌群的有顯著改變的菌株與肝臟功能生化指標作Pearson相關性分析。結果1.1組ALD患者大便菌群中雙歧桿菌為5.52±1.73(copies/g)和脆弱擬桿菌為7.01±0.72(copies/g),與對照組雙歧桿菌和脆弱擬桿菌相比明顯減少,差別具有顯著的統(tǒng)計學意義(P0.05);而大腸桿菌、糞腸球菌、乳酸桿菌和柔嫩梭菌含量與對照組比較有改變,但差別無統(tǒng)計學意義(P0.05)。2.與對照組相比,2組ALD患者的ALT活力、AST活力及TBil含量顯著增高,分別達到43.47±23.57 U/L、40.07±26.55 U/L和17.47±10.71μmol/L(P0.05)。將2組ALD患者大便菌群的雙歧桿菌和ALT、AST及TBil等肝功能生化指標進行相關性分析發(fā)現,雙歧桿菌與ALT(r=-0.64)、AST(r=-0.45)存在中等負相關性(P0.01),與TBil存在弱負相關性(r=-0.11,P0.05)。結論1.酒精性肝病患者存在腸道菌群失調,雙歧桿菌、脆弱擬桿菌較健康人群明顯減少。2.ALD患者肝臟的ALT活力、AST活力及TBil含量顯著升高,且雙歧桿菌與肝功能生化指標ALT及AST存在負相關性。
【圖文】：

種標準菌株的實時熒光定量PCR擴增片段M：DL2000DNAMarker；1：雙歧桿菌；2：乳酸桿菌；3：大腸桿菌；4：糞腸球菌；5：脆弱擬桿菌；6：柔嫩梭菌

圖 1.2 6 種標準菌株的 PCR 擴增曲線A：雙歧桿菌；B：乳酸桿菌；C：大腸桿菌；D：糞腸球菌；E：脆弱擬桿菌；F：柔3 標準菌株實時熒光定量 PCR 標準曲線及線性回歸方程6 種標準菌株 PCR 擴增產物濃度換算為拷貝數分別為雙歧桿菌 3.6×101酸桿菌 3.1×1011/μl，大腸桿菌 2.8×1011/μl，糞腸球菌 9.6×1011/μl，脆弱擬桿菌/μl，柔嫩梭菌 2.2×1010/μl。圖 1.3 顯示，以經 10 倍系列稀釋的各標準品為模
【學位授予單位】：青島大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R575

【參考文獻】

相關期刊論文 前3條

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2 臧月;王生;劉楠;劉莉;梅其炳;;腸道菌群失調介導酒精性肝病發(fā)生發(fā)展的機制研究進展[J];中國藥理學通報;2016年04期

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本文編號：2611936