【摘要】：目的：應(yīng)用PCR-DGGE(denaturing gradient gel electrophoresis,變性梯度凝膠電泳)技術(shù)分析腸易激綜合征(irritable bowel syndrome, IBS)患者腸道菌群變化,并系統(tǒng)評(píng)價(jià)益生菌治療腸易激綜合征的療效。 方法：收集18例IBS患者糞便和腸液標(biāo)本,10例健康體檢者糞便標(biāo)本,9例健康體檢者腸液標(biāo)本,保存至-20℃冰箱。提取糞便細(xì)茵總基因組DNA, PCR擴(kuò)增細(xì)菌16S rDNA基因V3可變區(qū),DGGE方法檢測(cè)PCR產(chǎn)物。然后對(duì)代表?xiàng)l帶進(jìn)行回收、克隆并測(cè)序,將測(cè)序結(jié)果與GenBank數(shù)據(jù)庫(kù)中的已知序列進(jìn)行比對(duì),確定細(xì)菌種類(lèi)。另外,計(jì)算機(jī)檢索PubMed、Cochrane Library、Web Of Sicence、EMbase、MD Consult、相關(guān)期刊論文(CNKI)、中國(guó)生物醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)光盤(pán)數(shù)據(jù)庫(kù)(CBM)、萬(wàn)方數(shù)據(jù)庫(kù)中關(guān)于益生菌與安慰劑對(duì)照治療IBS的隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)。文獻(xiàn)檢索時(shí)限均為建庫(kù)到2011年6月。由兩名研究者按照Cochrane Handbook5.0.2標(biāo)準(zhǔn)獨(dú)立評(píng)價(jià)文獻(xiàn)質(zhì)量、資料提取并交叉核對(duì),使用RevMan5.1軟件進(jìn)行Meta分析,并采用GRADE系統(tǒng)進(jìn)行證據(jù)質(zhì)量評(píng)價(jià)。 結(jié)果：全部樣本DGGE圖譜呈現(xiàn)出復(fù)雜的菌群多樣性,IBS患者腸道菌群結(jié)構(gòu)具有明顯特征,與健康體檢者存在明顯差異。共納入20個(gè)隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn),包括1713例患者。益生菌治療IBS對(duì)改善總體癥狀、腹痛／腹部不適、腹脹方面與安慰劑相比,其差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[SMD (95%CI)分別為-0.18(-0.28,-0.09)、-0.11(-0.21,-0.02)、-0.11(-0.28,-0.09)]�；谙到y(tǒng)評(píng)價(jià)結(jié)果,采用GRADE系統(tǒng)推薦分級(jí)方法評(píng)價(jià)證據(jù)質(zhì)量及推薦等級(jí),結(jié)果顯示,證據(jù)水平均為低級(jí),然而綜合利弊,推薦強(qiáng)度仍為強(qiáng)推薦(1)。 結(jié)論：IBS患者腸道菌群結(jié)構(gòu)發(fā)生改變�，F(xiàn)有證據(jù)表明,益生菌對(duì)改善IBS癥狀有一定療效。由于納入研究方法學(xué)質(zhì)量不均,及各研究間診斷標(biāo)準(zhǔn)、評(píng)價(jià)方法、劑量、療程等諸多方面存在的差異,需更多設(shè)計(jì)嚴(yán)格的高質(zhì)量RCT研究進(jìn)一步證實(shí)。
【圖文】：

圖1-2腸液標(biāo)本細(xì)菌DNA 16S rDNA f增電i永圖M:Trans2k Plus DNA Marker; 1?9，11?24:f 增片段;CK:空白對(duì)照DGGE條帶序列分析

圖1-2腸液標(biāo)本細(xì)菌DNA 16S rDNA f增電i永圖M:Trans2k Plus DNA Marker; 1?9，11?24:f 增片段;CK:空白對(duì)照DGGE條帶序列分析
【學(xué)位授予單位】：南京大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類(lèi)號(hào)】：R574

【參考文獻(xiàn)】

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1 朱麗明;柯美云;周麗雅;袁耀宗;羅金燕;候曉華;陳e，

本文編號(hào)：2607301