【摘要】： 目的:觀察外源性胰島素樣生長因子—1(IGF-Ⅰ)對重癥急性胰腺炎(SAP)大鼠腸粘膜屏障功能的保護作用及其機制,為SAP的治療尋求新的途徑并提供理論依據(jù)。 方法:72只雄性Wistar大鼠按照隨機數(shù)字表法分為假手術(shù)組(SO組)、重癥急性胰腺炎組(SAP組)、IGF-Ⅰ治療組(IGF-Ⅰ組)共三組,每組24只。每組再分為3個時相點(6,12,24h),每個時相點8只。通過胰膽管逆行注射5%牛磺膽酸鈉制作大鼠SAP模型,假手術(shù)組用同樣方法經(jīng)胰膽管逆行注射生理鹽水。IGF-Ⅰ組分別于術(shù)前半小時和術(shù)后3小時經(jīng)后肢內(nèi)側(cè)皮下注射IGF-Ⅰ,各組動物分別于術(shù)后6、12、24小時處死8只,檢測各組大鼠血漿淀粉酶、內(nèi)毒素及二胺氧化酶,觀察胰腺及小腸組織病理學(xué)變化并進行評分,TUNEL法檢測小腸上皮細胞凋亡,逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測小腸上皮細胞中bax和bcl-2 mRNA的表達。 結(jié)果:IGF-Ⅰ治療組與SAP組各時相點相比,血漿淀粉酶(6h:2262.38±760.19 vs 3063.38±676.33;12h:1572.50±635.90 vs 2777.00±262.25;24h:1322.75±334.64 vs 2336.38±279.92)均低于各相應(yīng)時相點,差異于12h和24h有統(tǒng)計學(xué)意義,均P＜0.05;內(nèi)毒素(6h:115.00±29.76 vs 77.75±28.49;12h:76.25±10.60vs 103.13±27.38;24h:53.75±10.61 vs147.50±16.691于6h時IGF-Ⅰ治療組仍高于SAP組,而12h和24h時低于SAP組,但差異僅于24h有統(tǒng)計學(xué)意義,P＜0.05;二胺氧化酶(6h:2.39±0.53vs 0.99±0.50;12h:1.61±0.48 vs 1.94±0.42;24h:0.96±0.18 vs 2.81±0.801水平6h時IGF-Ⅰ治療組仍高于SAP組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義,12h及24h時IGF-Ⅰ治療組較SAP組降低,但差異僅在24h時有統(tǒng)計學(xué)意義。小腸粘膜上皮細胞凋亡指數(shù)IGF-Ⅰ組與SAP組各相應(yīng)時相點相比均顯著降低(6h:13.88±1.73vs 19.00±2.78;12h:10.13±1.55 vs 17.63±1.60;24h:9.50±1.07 vs 17.25±2.76),小腸病理評分IGF-Ⅰ治療組較SAP組各相應(yīng)時相點均降低(6h:1.63±0.52vs 2.38±0.51;12h:1.38±0.52 vs 2.88±0.69;24h:1.25±0.46 vs 2.15±0.71),但差異只在12h和24h時有統(tǒng)計學(xué)意義;電鏡檢查結(jié)果亦顯示IGF-Ⅰ治療組小腸組織病理變化較SAP組明顯改善;小腸組織中bax mRNA表達在SAP組各時相點較SO組相應(yīng)時相點明顯增高(6h:1.35±0.18vs 0.85±0.12;12h:1.21±0.21vs 0.86±0.24;24h:1.14+0.24 vs 0.95±0.22),6小時即達高峰,而在IGF-Ⅰ組的表達與SAP組相應(yīng)時相點比較則明顯減弱(6h:1.10±0.23vs 1.35±0.18;12h:1.03±0.15 vs 1.21±0.21;24h:0.96±0.16 vs 1.14+0.24),差異在12h和24h有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05),于24小時即接近SO組;bcl-2 mRNA的表達在SO組和SAP組均較弱且無明顯差異(6h:0.54±0.04vs 0.57±0.06;12h:0.56±0.05 vs 0.53±0.05;24h:0.54±0.07 vs 0.58±0.08),而在IGF-Ⅰ組各時相點的表達則與SO組和SAP組相比明顯增強(6h:0.65±0.07vs 0.54±0.04vs0.57±0.06;12h:0.69±0.04vs 0.56±0.05 vs 0.53±0.05;24h:0.72±0.05vs 0.54±0.07 vs 0.58±0.08),差異均有統(tǒng)計學(xué)意義。SAP組bax,bcl-2 mRNA表達的比值明顯高于SO組(6h:2.24±0.11vs 1.59±0.24;12h:2.10±0.20 vs 1.55±0.19;24h:2.06±0..21 vs 1.55±0.18),而IGF-Ⅰ組則明顯低于SAP組(6h:1.69±0.28vs 2.24±0.11;12h:1.41±0.19 vs 2.10±0.20;24h:1.21±0.23 vs 2.06±0..21),差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(均P＜0.05)。 結(jié)論:腸粘膜上皮細胞凋亡參與了SAP時腸屏障功能障礙的發(fā)生,外源性IGF-Ⅰ可以抑制SAP時腸粘膜上皮細胞的過度凋亡,減輕內(nèi)毒素血癥,其機制可能與IGF-Ⅰ促進bcl-2 mRNA的轉(zhuǎn)錄、抑制bax mRNA的表達相關(guān),從而對腸粘膜屏障具有一定的保護作用。
【圖文】：

腸炎、小腸切除、燒傷等所致的腸豁膜損傷實驗研究現(xiàn)，給予外源性IGF一1恢復(fù)循環(huán)中IG矛esl水平后，上皮細胞DNA、蛋白質(zhì)合成增加，腸豁膜結(jié)構(gòu)和功均得到不同程度恢復(fù)。另外有研究表明IGfesl對各組織的細胞凋亡均有·定的抑制作用卜司。我們的研發(fā)現(xiàn)，S八衛(wèi)時血漿內(nèi)毒素、二胺氧化酶在各時相點均于so組，同時腸勃膜細胞亦存在著明顯的凋亡，并凋亡指數(shù)與血漿內(nèi)毒素、二胺氧化酶的濃度均及腸傷評分均呈正相關(guān)，這說明SA衛(wèi)早期腸乳膜上皮細的過度凋亡參與了腸豁膜屏障的損害病理過程，從出現(xiàn)腸內(nèi)細菌及內(nèi)毒素移位。到后期隨著腸損傷的一步加重，內(nèi)毒素移位也更明顯，這種作用又反過來一步加重腸豁膜屏障的損害。而經(jīng)IGF一l治療后，大血漿內(nèi)毒素及二胺氧化酶的濃度及小腸豁膜上皮細凋亡率均明顯下降，小腸組織結(jié)構(gòu)也顯著改善。因此們認為，外源性IG田一1通過抑制SA衛(wèi)時腸豁膜上皮胞的過度凋亡，從而對腸豁膜屏障起到保護作用，降了細菌和內(nèi)毒索移位的發(fā)生。Pu，勸enthi等側(cè)發(fā)現(xiàn)的影響及最佳劑量、副作用等方面的問題均有待于進一步探討。參考文獻〔1]王興鵬，王冰嫻，吳愷，等.細胞凋亡在急性壞死型胰腺炎早期腸酬剿波細胞趕泊中的作用.中婀肖倪場琶志，2001，21(5):267一270.[2〕Bareg卻ianN，，SongJ，Je，ehke肪，et二1.IG卜1protee-t5inte，tinalePithelialeellsfromoxidativestres只-indueedapoptosis二丁SurgRes2006，136(l):31一37.[31ChiuCJ，流axdle陰，BrownR，。tal.Intostinolmueo-sal一lesioninlowflowstatesI.AmorPhologieal，hemo-dynamie，andmetaboliezeappraisal.Ax℃hsul、g，1970101(4):478一483.[4〕ButturiniG，SalviaR.BettiniR，。tal.Infoeti‘川pfovont-ioninneerotizingPanereatitis:ano]dehallengewithnewperspee
【學(xué)位授予單位】：蘭州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2008
【分類號】：R576

【引證文獻】

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前2條

1 伍華飛;塞來昔布對大鼠重癥急性胰腺炎腸粘膜屏障損傷的影響[D];南華大學(xué);2010年

2 張紅雷;依達拉奉對重癥急性胰腺炎大鼠腸粘膜屏障損傷的影響[D];南華大學(xué);2012年

本文編號：2603196