【摘要】： 目的:探索髓系細(xì)胞(中性粒細(xì)胞、血小板)及內(nèi)皮細(xì)胞表面Toll樣受體表達(dá)在重癥急性胰腺炎中性粒細(xì)胞招募中的作用。方法:將C3H/He-J和C3H/He-N小鼠通過(guò)骨髓移植的方法制作“①髓系細(xì)胞TLR4-/-和內(nèi)皮細(xì)胞TLR4+/+”及“②髓系細(xì)胞TLR4+/+和內(nèi)皮細(xì)胞TLR4-/-”嵌合體小鼠,然后以①②及純合體小鼠(③TLR4+/+,④TLR4-/-)為對(duì)象,腹腔注射蛙皮素、尾靜脈注射脂多糖復(fù)制SAP模型,檢測(cè)血漿淀粉酶、胰腺組織萘酚AS-D氯乙酸脂酶染色計(jì)數(shù)、MPO活性、PCR測(cè)外周血粒細(xì)胞TLR4、免疫組化檢測(cè)胰腺組織內(nèi)TLR4的表達(dá)。結(jié)果:各組小鼠血漿淀粉酶升高,組間無(wú)顯著性差異;①③兩組AS-D計(jì)數(shù)及MPO活性明顯高于②④兩組;②③兩組外周血粒細(xì)胞TLR4顯著高于①④兩組;①③兩組胰腺組織內(nèi)TLR4陽(yáng)性,②④兩組陰性;結(jié)論:內(nèi)皮細(xì)胞而非外周血粒細(xì)胞在重癥急性胰腺炎中性粒細(xì)胞聚集中起關(guān)鍵作用。
【圖文】：

55℃ 30s, 72℃ 45s, 45 個(gè)循環(huán)在退火階段采集熒光信號(hào)，利用 FTC2000 熒光實(shí)時(shí)定量 PCR 儀附帶的分析軟件對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析。3.結(jié)果分析：擴(kuò)增結(jié)果采用 FTC2000 熒光 PCR 儀自帶的實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 分析程值，然后計(jì)算其相應(yīng) ΔCt 值（目的基因 TLR2Ct 值減去內(nèi)參照 β-actin Ct 值ΔCt 值越小說(shuō)明基因拷貝數(shù)越多）。待測(cè)樣品相對(duì)值＝2（△Ct 待測(cè)樣品-△Ctβ-actiCt 陰性對(duì)照- Ct 待測(cè)樣品4.標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)以不同濃度梯度的 β-actin 核酸標(biāo)準(zhǔn)品稀釋物 cDNA 為模板，運(yùn)用實(shí)時(shí)PCR 的方法來(lái)明確檢測(cè)體系的可重復(fù)性，如圖 1-1 所示，相關(guān)系數(shù)>0.95，的前提下，其結(jié)果是可信的。

三、胰腺組織MPO活力水平及萘酚AS-D氯乙酸脂酶染色計(jì)數(shù)：①髓系TLR4-/-和內(nèi)皮TLR4+/+③髓系TLR4+/+和內(nèi)皮TLR4+/+兩組相比②髓系TLR4+/+和內(nèi)皮TLR4-/-④髓系TLR4-/-和內(nèi)皮TLR4-/-兩組，MPO水平與AS-D計(jì)數(shù)明顯升高。（表2）（圖1、2）表2 小鼠胰腺組織MPO活力水平及萘酚AS-D氯乙酸脂酶染色計(jì)數(shù)組別 AS-D計(jì)數(shù)（個(gè)） MPO（U/g）④髓系TLR4-/-和內(nèi)皮TLR4-/- 20.00±2.19 0.202±0.018③髓系TLR4+/+和內(nèi)皮TLR4+/+ 75.00±2.43 2.596±0.138②髓系TLR4+/+和內(nèi)皮TLR4-/- 21.50±2.38# 0.367±0.018#①髓系TLR4-/-和內(nèi)皮TLR4+/+ 66.88±2.17*& 1.834±0.170*&注：方差分析P<0.05；兩兩比較，與上一組比，*P<0.05;與④比，#P>0.05,&P<0.05與③比，#P<0.05,&P>0.05
【學(xué)位授予單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2008
【分類(lèi)號(hào)】：R576

【引證文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 胡耀峰;李文星;郭晶;沈小凱;李輝;;參黃合劑對(duì)重癥急性胰腺炎大鼠胰腺組織中TLR4的影響[J];中國(guó)醫(yī)療前沿;2011年03期

，

本文編號(hào)：2601674