【摘要】：研究背景 潰瘍病是臨床上的常見病、多發(fā)病，病程反復，復發(fā)率高。目前對于消化性潰瘍的治療，應用常規(guī)的抑酸，保護胃黏膜和抗幽門螺桿菌等治療后，仍有一部分病人消化性潰瘍不能治愈。其原因除了潰瘍本身、幽門螺桿菌感染、吸煙、心理因素等外，某些生長因子減少或者缺乏也成為潰瘍難以治愈的原因之一。三葉因子家族(trefoil factor family，TFF)是一類對胃腸粘膜有保護作用的因子。TFF2是TFF中唯一的具有兩個三葉草型結(jié)構(gòu)域(P—結(jié)構(gòu)域)和糖基化的小分子蛋白質(zhì)，且集中分布在消化性潰瘍好發(fā)的胃竇和十二指腸。正常情況下，TFF2由胃體和胃竇的胃腺上皮黏液頸細胞合成與分泌，，分泌量較少。在粘膜損傷后TFF2分泌增加，在消化性潰瘍中有特異性表達，提示其在維持胃腸道黏膜的完整性和促進快速修復過程中起重要作用。近年研究提示，TFF2與消化性潰瘍的關(guān)系密切，已有大量的體內(nèi)、體外實驗證實TFF2對胃腸道有上皮保護和促進破損黏膜愈合的功能。TFF2能與粘蛋白結(jié)合，減少H~+滲透及有害物質(zhì)對粘膜的損傷，并促進上皮細胞遷移，參與損傷后胃粘膜上皮層的重建，以往研究已經(jīng)證實了直接注射裸露的質(zhì)粒到大鼠的骨骼肌可以獲得有效的基因表達，如學者們分別研究了單次局部注射含有VEGF和PDGF的質(zhì)粒對實驗性大鼠胃潰瘍和十二指腸潰瘍，裸露基因治療取得了預期的效果，但是國內(nèi)外尚無應用TFF2進行類似治療的報道，我們通過基因拼接方法合成hTFF2基因，并構(gòu)建hTFF2基因的真核表達載體pcDNA3.1(+)-hTFF2，并應用編碼有hTFF2基因的裸質(zhì)粒對實驗性
【圖文】：

研究表明某些生長因子的缺乏或者減少是潰瘍難以治2(Treofliafcto:2，TFF2)在生理條件時能保持胃豁膜時分泌增多，在消化性潰瘍中有特異表達，提示其在和促進快速修復過程中起重要作用，在消化性潰瘍的[26]。本文應用聚合酶鏈式反應(Polymeraseehainreaetio因拼裝技術(shù)合成hTFFZ，并進行hTFFZ基因的真核表方法peDNA3.(l+)為南方醫(yī)科大學南方醫(yī)院消化病研究所)pGM一Teasy試劑盒購自promega公司(質(zhì)粒圖譜如圖1.

圖1.2pGM一TEays質(zhì)粒圖譜Fiuger1.2SturetuerofrPGM一TEasy與試劑酶、PRc凝膠回收試驗盒和限制性內(nèi)切酶為Takara公司產(chǎn)品。寡核昔酸和PCR引物片段均由上海博亞生物有限公司合成。一Taeys試劑及質(zhì)粒大量提取試劑盒購自Pormgea公司。n隊ladder，M砍e:111，pufPeRMastermix購自北京天為時代用瓊脂糖:AMRESCO進口分裝。法1TFFZ基因引物的設(shè)計FZ基因拼裝引物設(shè)計以GENBANK中已知人的嚇F2基因的蛋:
【學位授予單位】：第一軍醫(yī)大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2006
【分類號】：R573.1

【參考文獻】

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本文編號：2599790