【摘要】：目的: 研究丙型肝炎病毒(hepatitis C virus, HCV)核心蛋白(core protein, C)對HepG2細胞B細胞淋巴瘤-2基因(B cell lymphoma -2, Bcl-2)與Bcl-2相關X蛋白(Bcl-2 associated X protein, Bax)表達的影響,以探索HCV核心蛋白與HepG2細胞凋亡的關系。 方法: 選取我國最流行的1b型HCV RNA,RT-PCR擴增出HCV-1b-C基因,經(jīng)雙酶切后連接到pcDNA3.1(-),構建真核表達載體pcDNA3.1(-)/HCV- 1b-C;利用脂質(zhì)體將其轉(zhuǎn)染HepG2細胞,RT-PCR及Western Blot檢測其mRNA及蛋白。將細胞分為pcDNA3.1(-)/HCV-1b-C組、pcDNA3.1(-)組及空白對照組,檢測Bax與Bcl-2表達,分析HCV-1b-C對HepG2細胞Bax與Bcl-2表達的影響。 結果: 1.成功構建HCV-1b-C基因真核表達載體pcDNA3.1(-)/HCV-1b-C;瞬時轉(zhuǎn)染HepG2細胞后,成功表達HCV C mRNA及蛋白。 2. pcDNA3.1(-)/HCV-1b-C組的Bax的mRNA及蛋白相對表達量減少,分別與pcDNA3.1(-)組及空白對照組比較,差異均有統(tǒng)計學意義(P0.01);而pcDNA 3.1(-)組與空白對照組比較,差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。 3. pcDNA3.1(-)/HCV-1b-C組的Bcl-2的mRNA及蛋白相對表達量增多,分別與pcDNA3.1(-)組及空白對照組比較,差異均有統(tǒng)計學意義(P0.01);而pcDNA 3.1(-)組與空白對照組比較,差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。 結論: 1.成功構建1b型HCV核心蛋白真核表達載體pcDNA3.1(-)/HCV-1b-C。 2. 1b型HCV核心蛋白可使HepG2細胞Bax減少,Bcl-2增多,降低Bax/Bcl-2比值,這可能是HCV感染后抑制細胞凋亡的機制之一。
【學位授予單位】：南華大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2011
【分類號】：R512.63

【參考文獻】

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本文編號：2596167