【摘要】：目的: 研究丙型肝炎病毒(hepatitis C virus, HCV)核心蛋白(core protein, C)對(duì)HepG2細(xì)胞B細(xì)胞淋巴瘤-2基因(B cell lymphoma -2, Bcl-2)與Bcl-2相關(guān)X蛋白(Bcl-2 associated X protein, Bax)表達(dá)的影響,以探索HCV核心蛋白與HepG2細(xì)胞凋亡的關(guān)系。 方法: 選取我國(guó)最流行的1b型HCV RNA,RT-PCR擴(kuò)增出HCV-1b-C基因,經(jīng)雙酶切后連接到pcDNA3.1(-),構(gòu)建真核表達(dá)載體pcDNA3.1(-)/HCV- 1b-C;利用脂質(zhì)體將其轉(zhuǎn)染HepG2細(xì)胞,RT-PCR及Western Blot檢測(cè)其mRNA及蛋白。將細(xì)胞分為pcDNA3.1(-)/HCV-1b-C組、pcDNA3.1(-)組及空白對(duì)照組,檢測(cè)Bax與Bcl-2表達(dá),分析HCV-1b-C對(duì)HepG2細(xì)胞Bax與Bcl-2表達(dá)的影響。 結(jié)果: 1.成功構(gòu)建HCV-1b-C基因真核表達(dá)載體pcDNA3.1(-)/HCV-1b-C;瞬時(shí)轉(zhuǎn)染HepG2細(xì)胞后,成功表達(dá)HCV C mRNA及蛋白。 2. pcDNA3.1(-)/HCV-1b-C組的Bax的mRNA及蛋白相對(duì)表達(dá)量減少,分別與pcDNA3.1(-)組及空白對(duì)照組比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);而pcDNA 3.1(-)組與空白對(duì)照組比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 3. pcDNA3.1(-)/HCV-1b-C組的Bcl-2的mRNA及蛋白相對(duì)表達(dá)量增多,分別與pcDNA3.1(-)組及空白對(duì)照組比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);而pcDNA 3.1(-)組與空白對(duì)照組比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 結(jié)論: 1.成功構(gòu)建1b型HCV核心蛋白真核表達(dá)載體pcDNA3.1(-)/HCV-1b-C。 2. 1b型HCV核心蛋白可使HepG2細(xì)胞Bax減少,Bcl-2增多,降低Bax/Bcl-2比值,這可能是HCV感染后抑制細(xì)胞凋亡的機(jī)制之一。
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號(hào)】：R512.63

【參考文獻(xiàn)】

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1 姚相杰,郭佳,鄭從義,方呈祥,屈三甫,陳震球,李中紅,李信墻,李衛(wèi)云;丙肝病毒全基因組cDNA克隆侵染細(xì)胞培養(yǎng)體系的建立[J];科學(xué)通報(bào);2004年10期

2 李晶媛;李樹臣;楊維良;;TNF-α誘導(dǎo)肝細(xì)胞凋亡機(jī)制的回顧與展望[J];世界華人消化雜志;2007年06期

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本文編號(hào)：2596167