【摘要】：目的通過建立PI-IBS動物模型,并對該模型進行癥狀評估,同時檢測腸組織中IFN-γ、IL-17、IL-10和HSP70的表達及外周血中IFN-γ、IL-17、IL-10的表達情況,初步探討IFN-γ、IL-17、IL-10與HSP70的表達在PI-IBS發(fā)病機制中的作用。方法40只雌性C57BL\6小鼠隨機分為PI-IBS組和對照組,每組各20只。PI-IBS組小鼠用0.2ml含350條旋毛蟲幼蟲的生理鹽水進行灌胃,對照組小鼠則用等體積的生理鹽水進行灌胃。分別于感染后第2、4、8周,取末端回腸和近端結(jié)腸進行組織病理學(xué)評分檢測。并于旋毛蟲感染后第8周檢測小鼠腹壁撤退反射(AWR)評分以評估小鼠內(nèi)臟敏感性的變化情況,檢測腸道傳輸時間(ITT)和糞便含水百分數(shù)評估小鼠腸道動力的改變;采用ELISA測定不同腸段組織(十二指腸、空腸、回腸、結(jié)腸)以及外周血中IFN-γ、IL-17和IL-10水平的改變;分別用免疫組化、RT-PCR和Western Blot方法檢測HSP70在末端回腸和近端結(jié)腸組織中的表達變化情況。結(jié)果在感染旋毛蟲后第8周,PI-IBS小鼠腸粘膜組織急性炎癥完全恢復(fù)至正常狀態(tài);在結(jié)直腸擴張容積分別為0.35和0.5ml時,PI-IBS組小鼠腸道腹壁撤退反射(AWR)評分均顯著高于對照組(P0.01);PI-IBS小鼠腸道傳輸時間縮短、每2h糞便含水百分數(shù)增高,較正常對照組具有顯著性差異(P0.01);ELISA結(jié)果顯示:與對照組相比,PI-IBS組小鼠的IFN-γ和IL-17水平在十二指腸、回腸和外周血中表達升高(P0.05);而IL-10水平在空腸、回腸、結(jié)腸以及外周血中的表達顯著降低(P0.05);免疫組化結(jié)果顯示PI-IBS組小鼠回腸和結(jié)腸粘膜組織中HSP70陽性信號均明顯高于對照組小鼠,RT-PCR和Western Blot結(jié)果均顯示PI-IBS組小鼠回腸和結(jié)腸粘膜中HSP70水平顯著升高(P0.05)。結(jié)論感染后腸易激綜合征小鼠各腸段中不同細胞因子的表達水平存在差異,外周血與部分腸段組織中細胞因子的表達變化呈同步化改變,這種改變可能與PI-IBS內(nèi)臟高敏感性和腸道運動功能紊亂相關(guān);PI-IBS小鼠腸組織細胞因子的改變可能與腸粘膜HSP70的表達變化有關(guān),腸粘膜中高水平的HSP70在某種意義上可以反映PI-IBS腸粘膜的慢性炎癥情況。
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R574

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本文編號：2570579