發(fā)布時(shí)間：2020-01-17 10:53

【摘要】：目的通過建立PI-IBS動(dòng)物模型,并對(duì)該模型進(jìn)行癥狀評(píng)估,同時(shí)檢測腸組織中IFN-γ、IL-17、IL-10和HSP70的表達(dá)及外周血中IFN-γ、IL-17、IL-10的表達(dá)情況,初步探討IFN-γ、IL-17、IL-10與HSP70的表達(dá)在PI-IBS發(fā)病機(jī)制中的作用。方法40只雌性C57BL\6小鼠隨機(jī)分為PI-IBS組和對(duì)照組,每組各20只。PI-IBS組小鼠用0.2ml含350條旋毛蟲幼蟲的生理鹽水進(jìn)行灌胃,對(duì)照組小鼠則用等體積的生理鹽水進(jìn)行灌胃。分別于感染后第2、4、8周,取末端回腸和近端結(jié)腸進(jìn)行組織病理學(xué)評(píng)分檢測。并于旋毛蟲感染后第8周檢測小鼠腹壁撤退反射(AWR)評(píng)分以評(píng)估小鼠內(nèi)臟敏感性的變化情況,檢測腸道傳輸時(shí)間(ITT)和糞便含水百分?jǐn)?shù)評(píng)估小鼠腸道動(dòng)力的改變;采用ELISA測定不同腸段組織(十二指腸、空腸、回腸、結(jié)腸)以及外周血中IFN-γ、IL-17和IL-10水平的改變;分別用免疫組化、RT-PCR和Western Blot方法檢測HSP70在末端回腸和近端結(jié)腸組織中的表達(dá)變化情況。結(jié)果在感染旋毛蟲后第8周,PI-IBS小鼠腸粘膜組織急性炎癥完全恢復(fù)至正常狀態(tài);在結(jié)直腸擴(kuò)張容積分別為0.35和0.5ml時(shí),PI-IBS組小鼠腸道腹壁撤退反射(AWR)評(píng)分均顯著高于對(duì)照組(P0.01);PI-IBS小鼠腸道傳輸時(shí)間縮短、每2h糞便含水百分?jǐn)?shù)增高,較正常對(duì)照組具有顯著性差異(P0.01);ELISA結(jié)果顯示:與對(duì)照組相比,PI-IBS組小鼠的IFN-γ和IL-17水平在十二指腸、回腸和外周血中表達(dá)升高(P0.05);而IL-10水平在空腸、回腸、結(jié)腸以及外周血中的表達(dá)顯著降低(P0.05);免疫組化結(jié)果顯示PI-IBS組小鼠回腸和結(jié)腸粘膜組織中HSP70陽性信號(hào)均明顯高于對(duì)照組小鼠,RT-PCR和Western Blot結(jié)果均顯示PI-IBS組小鼠回腸和結(jié)腸粘膜中HSP70水平顯著升高(P0.05)。結(jié)論感染后腸易激綜合征小鼠各腸段中不同細(xì)胞因子的表達(dá)水平存在差異,外周血與部分腸段組織中細(xì)胞因子的表達(dá)變化呈同步化改變,這種改變可能與PI-IBS內(nèi)臟高敏感性和腸道運(yùn)動(dòng)功能紊亂相關(guān);PI-IBS小鼠腸組織細(xì)胞因子的改變可能與腸粘膜HSP70的表達(dá)變化有關(guān),腸粘膜中高水平的HSP70在某種意義上可以反映PI-IBS腸粘膜的慢性炎癥情況。
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R574

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本文編號(hào)：2570579