【摘要】：目的:探討脫氧膽酸(deoxycholic acid,DCA)對人結(jié)腸上皮NCM460細(xì)胞能量代謝損傷的影響及可能機(jī)制。方法:培養(yǎng)人正常結(jié)腸上皮NCM460細(xì)胞,采用DCA(10μmol/L、30μmol/L和100μmol/L)作用5 d,或DCA(100μmol/L)作用3、5和7 d;DCA(100μmol/L)處理3 d后,用去乙�；竤irtuin 3(SIRT3)激動劑白藜蘆醇(resveratrol,REV)處理細(xì)胞后繼續(xù)培養(yǎng)至第7天。細(xì)胞腺苷三磷酸(adenosine triphosphate,ATP)和乳酸生成量用試劑盒檢測,Western blot檢測細(xì)胞的SIRT3表達(dá)。結(jié)果:DCA能濃度和時間依賴性地抑制NCM460細(xì)胞生成ATP并促進(jìn)乳酸生成,抑制SIRT3蛋白表達(dá);白藜蘆醇能逆轉(zhuǎn)DCA對NCM460細(xì)胞的作用。結(jié)論:DCA對人結(jié)腸上皮NCM460細(xì)胞的能量代謝具有損傷作用,其損傷作用與SIRT3相關(guān)。
【圖文】：

2DCA干預(yù)對NCM460細(xì)胞乳酸生成的影響以不同劑量的DCA處理正常的結(jié)腸上皮細(xì)胞NCM460，檢測細(xì)胞乳酸的生成能力。結(jié)果顯示與對照組相比，DCA能劑量依賴性地促進(jìn)NCM460細(xì)胞生成乳酸，并在DCA濃度為100μmol/L時，合成乳酸能力最強(qiáng)(P＜0.01)。DCA(100μmol/L)分別處理NCM460細(xì)胞3d、5d和7d均能顯著增加乳酸的合成，且具有時間依賴性(P＜0.01)，見圖2。Figure2．Theeffectofdaeoxycholicacid(DCA)onthelacticacid(LD)productionofNCM460cells．DCAinhibitedtheLDproduc-tioninadose-dependentmanner(A)andatime-dependentmanner(B)．Mean±SEM．n=3．*P＜0.05，＊＊P＜0.01vsDCA(0μmol/L)group．圖2脫氧膽酸對NCM460細(xì)胞乳酸生成的影響3DCA干預(yù)對NCM460細(xì)胞SIＲT3蛋白表達(dá)的影響與對照組相比，DCA能劑量依賴性地抑制NCM460細(xì)胞SIＲT3蛋白的表達(dá)，且當(dāng)DCA濃度達(dá)100μmol/L時，SIＲT3的蛋白表達(dá)水平最低(P＜0.01)。DCA(100μmol/L)分別處理NCM460細(xì)胞3d、5d和7d，SIＲT3的蛋白表達(dá)呈時間依賴性下降，且處理7d時表達(dá)水平最低(P＜0.01)，見圖3。Figure3．Theeffectofdeoxycholicacid(DCA)ontheproteinexpressionofSIＲT3intheNCM460cells．DCAinhibitedtheproteinexpressionofSIＲT3inadose-dependentmanner(A)andatime-dependentmanner(B)．Mean±SEM．n=3．*P＜0.05，＊＊P＜0.01vsDCA(0μmol/L)group．圖3脫氧膽酸對NCM460細(xì)胞中SIＲT3蛋白表達(dá)的影響4白藜蘆醇干預(yù)對DCA處理后的NCM460細(xì)胞能量代謝的影響為了進(jìn)一步探討SIＲT3在DCA損傷中的作用，本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用sirtuin家族激動劑白藜蘆醇進(jìn)行反證。·1496·

2DCA干預(yù)對NCM460細(xì)胞乳酸生成的影響以不同劑量的DCA處理正常的結(jié)腸上皮細(xì)胞NCM460，，檢測細(xì)胞乳酸的生成能力。結(jié)果顯示與對照組相比，DCA能劑量依賴性地促進(jìn)NCM460細(xì)胞生成乳酸，并在DCA濃度為100μmol/L時，合成乳酸能力最強(qiáng)(P＜0.01)。DCA(100μmol/L)分別處理NCM460細(xì)胞3d、5d和7d均能顯著增加乳酸的合成，且具有時間依賴性(P＜0.01)，見圖2。Figure2．Theeffectofdaeoxycholicacid(DCA)onthelacticacid(LD)productionofNCM460cells．DCAinhibitedtheLDproduc-tioninadose-dependentmanner(A)andatime-dependentmanner(B)．Mean±SEM．n=3．*P＜0.05，＊＊P＜0.01vsDCA(0μmol/L)group．圖2脫氧膽酸對NCM460細(xì)胞乳酸生成的影響3DCA干預(yù)對NCM460細(xì)胞SIＲT3蛋白表達(dá)的影響與對照組相比，DCA能劑量依賴性地抑制NCM460細(xì)胞SIＲT3蛋白的表達(dá)，且當(dāng)DCA濃度達(dá)100μmol/L時，SIＲT3的蛋白表達(dá)水平最低(P＜0.01)。DCA(100μmol/L)分別處理NCM460細(xì)胞3d、5d和7d，SIＲT3的蛋白表達(dá)呈時間依賴性下降，且處理7d時表達(dá)水平最低(P＜0.01)，見圖3。Figure3．Theeffectofdeoxycholicacid(DCA)ontheproteinexpressionofSIＲT3intheNCM460cells．DCAinhibitedtheproteinexpressionofSIＲT3inadose-dependentmanner(A)andatime-dependentmanner(B)．Mean±SEM．n=3．*P＜0.05，＊＊P＜0.01vsDCA(0μmol/L)group．圖3脫氧膽酸對NCM460細(xì)胞中SIＲT3蛋白表達(dá)的影響4白藜蘆醇干預(yù)對DCA處理后的NCM460細(xì)胞能量代謝的影響為了進(jìn)一步探討SIＲT3在DCA損傷中的作用，本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用sirtuin家族激動劑白藜蘆醇進(jìn)行反證。·1496·
【作者單位】： 武漢科技大學(xué)醫(yī)學(xué)院藥學(xué)系;
【基金】：武漢科技大學(xué)大學(xué)生科技創(chuàng)新基金(No.15ZRA167)
【分類號】：R57

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2550561