本文關(guān)鍵詞：HBx通過EGR1上調(diào)mPGES-1表達在促肝細胞炎性反應中的作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：乙肝病毒（HBV）的X基因表達產(chǎn)物X蛋白（HBx）在肝臟炎性進展過程中發(fā)揮多方面的功能，包括調(diào)節(jié)信號轉(zhuǎn)導、細胞周期、細胞生長和凋亡，細胞的侵襲和轉(zhuǎn)移等。許多腫瘤細胞在體內(nèi)外均能使前列腺素類物質(zhì)尤其是前列腺素E2（PGE2）合成增加，而過度增高的PGE2具有促進腫瘤細胞增殖、遷移，以及抑制腫瘤細胞凋亡和宿主免疫功能的能力。近年來關(guān)于COX-2調(diào)節(jié)通路的研究也越來越多，COX-2特異性抑制劑的使用也越來越多，但是抑制COX-2也影響COX-2通路上其它產(chǎn)物的合成，如PGI2和TxA2是天然的抗凝血物，而血栓素TxA2具有血管收縮和血小板聚集作用。選擇性的抑制COX-2會改變這兩種介質(zhì)的比率，向TxA2傾斜，導致血管疾病的發(fā)生，如突發(fā)性心肌梗塞和血栓形成。最新研究顯示DMC可以通過下調(diào)mPGES-1啟動子活性而有效抑制mPGES-1的表達，，同時即使其在高濃度時也無COX酶的抑制活性，表明它是比COX-2抑制劑更好的化合物，有望開發(fā)成治療炎癥和癌癥的藥物，針對mPGES-1的研究已成為最近幾年來的熱點問題。 方法：Western blot和qRT-PCR檢測mPGES-1在表達HBx蛋白的HL7702-HBx細胞株和不表達HBx蛋白的HL7702細胞株中RNA及蛋白表達情況；構(gòu)建mPGES-1啟動子不同長度的短截熒光報告基因及運用基因定點突變技術(shù)構(gòu)建突變型mPGES-1啟動子熒光報告基因探尋HBx影響轉(zhuǎn)錄的啟動子區(qū)域；凝膠遷移阻滯實驗（EMSA）和染色質(zhì)免疫共沉淀（ChIP）驗證HBx通過EGR1影響mPGES-1啟動子轉(zhuǎn)錄活性；構(gòu)建該EGR1的真核表達載體以及運用RNA干擾技術(shù)探討該轉(zhuǎn)錄因子EGR1對mPGES-1啟動子轉(zhuǎn)錄的效果；ELISA法檢測HBx及EGR1轉(zhuǎn)錄因子對于肝細胞分泌炎性因子PGE2的作用效果。 結(jié)果：HL7702-HBx細胞株中mPGES-1的RNA及蛋白表達明顯高于HL7702(P＜0.05)；HBx通過作用mPGES-1啟動子其實轉(zhuǎn)錄位點上游-177bp內(nèi)的EGR1位點調(diào)控mPGES-1基因的轉(zhuǎn)錄；上調(diào)和干擾EGR1的表達均影響mPGES-1的轉(zhuǎn)錄和蛋白表達(P＜0.05)；HBx及EGR1均可以促進HL7702細胞分泌PGE2(P＜0.05)。 結(jié)論：1.HBx通過影響轉(zhuǎn)錄因子EGR1使得mPGES-1啟動子轉(zhuǎn)錄活性升高并促進蛋白的表達；2.上調(diào)EGR1在細胞內(nèi)的表達可以促進mPGES-1啟動子的轉(zhuǎn)錄活性及蛋白表達，但上調(diào)EGR1在細胞內(nèi)的表達對COX-2的轉(zhuǎn)錄活性及蛋白表達的影響無顯著性差異；下調(diào)EGR1在細胞內(nèi)的表達可以抑制mPGES-1啟動子的轉(zhuǎn)錄活性及蛋白表達，但下調(diào)EGR1在細胞內(nèi)的表達對COX-2的轉(zhuǎn)錄活性及蛋白表達的影響無顯著性差異3.HBx及EGR1均可以上調(diào)HL7702細胞株分泌PGE2。
【關(guān)鍵詞】：HBx mPGES-1 EGR1 PGE2 promoter
【學位授予單位】：福建醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R512.62
【目錄】：

• 英文縮略詞表4-6
• 摘要6-8
• Abstract8-10
• 前言10-12
• 材料與試劑12-14
• 實驗方法14-36
• 結(jié)果36-47
• 討論47-50
• 結(jié)論50-51
• 參考文獻51-57
• 綜述57-66
• 參考文獻63-66
• 致謝66-67
• 在學期間發(fā)表的論文67

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 王燕;王曉茜;李秀金;唐南洪;;PGE_2,mPGES-1和HBx在肝細胞癌的表達及相關(guān)性[J];臨床肝膽病雜志;2011年02期

  本文關(guān)鍵詞：HBx通過EGR1上調(diào)mPGES-1表達在促肝細胞炎性反應中的作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：254688