本文關(guān)鍵詞：乙肝病毒三種基因型轉(zhuǎn)染細(xì)胞系在藥物實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的本研究旨在建立乙肝病毒(hepatitis B virus, HBV)I基因型復(fù)制的細(xì)胞模型,以期為抗病毒治療提供一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。同時(shí)通過(guò)研究中國(guó)周邊國(guó)家的HBV的基因型和亞型分布特點(diǎn),了解相關(guān)的研究進(jìn)展。方法1.構(gòu)建B、C、I三種基因型1.2倍真核表達(dá)載體并轉(zhuǎn)染HepG2 (Human hepatocellular liver carcinoma cell line2)細(xì)胞系。2.研究干擾素alb及四種天然化合物對(duì)HepG2細(xì)胞系和HBV表達(dá)的影響。3.從美國(guó)國(guó)立生物技術(shù)信息中心(National Center for Biotechnology Information, NCBI)數(shù)據(jù)庫(kù)中收集中國(guó)周邊14個(gè)國(guó)家的乙型肝炎病毒全基因組序列信息,對(duì)其中所有的B基因型序列進(jìn)行分析比對(duì)。結(jié)果1.三種基因型瞬時(shí)轉(zhuǎn)染HepG2細(xì)胞后均能表達(dá)HBsAg。2.干擾素alb濃度高于6000U/mL時(shí)對(duì)I1/C1重組型HBV的表面抗原有顯著抑制,HepG2細(xì)胞系僅對(duì)化合物D較敏感。對(duì)于H75-B3而言,只在6小時(shí)左右加入了化合物A和D的組對(duì)病毒的活性有一定的抑制作用。對(duì)于Y17-C1,加入了化合物A、B和D的組病毒的活性有一定的抑制。3.中國(guó)周邊國(guó)家乙肝病毒基因型以B、C、D三種為主,血清型則以adw2和adrq+兩種為主。B3、B5、B7、B8、B9五種亞型間序列差異度4%,且它們?cè)赟區(qū)有六個(gè)共同的氨基酸特異性位點(diǎn)。結(jié)論本研究成功構(gòu)建三種HBV基因型1.2倍真核表達(dá)載體。高濃度α1b對(duì)I1/C1重組型有抑制作用。B3、B5、B7、B8、B9五種亞型可合并為準(zhǔn)基因亞型B3。
【關(guān)鍵詞】：乙肝病毒 基因型 1.2倍真核表達(dá)載體 HepG2細(xì)胞系 天然化合物
【學(xué)位授予單位】：昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R512.62
【目錄】：

• 縮略詞表6-8
• 摘要8-9
• Abstract9-11
• 前言11-14
• 第一部分 乙肝病毒三基因型表達(dá)載體的構(gòu)建及不同化合物對(duì)其轉(zhuǎn)染細(xì)胞的影響14-56
• 第一節(jié) 三種基因型真核表達(dá)載體的構(gòu)建14-30
• 1 病毒株來(lái)源14
• 2 實(shí)驗(yàn)材料14-16
• 3 實(shí)驗(yàn)方法16-26
• 4 結(jié)果26-30
• 5 結(jié)果與討論30
• 第二節(jié) 1.2倍HBV轉(zhuǎn)染HepG2細(xì)胞系30-39
• 1 細(xì)胞來(lái)源30-31
• 2 實(shí)驗(yàn)材料31
• 3 實(shí)驗(yàn)方法31-37
• 4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果37-38
• 5 結(jié)果與討論38-39
• 第三節(jié) MTS細(xì)胞生長(zhǎng)活性實(shí)驗(yàn)及藥物實(shí)驗(yàn)39-51
• 1 化合物來(lái)源40
• 2 實(shí)驗(yàn)材料40
• 3 實(shí)驗(yàn)方法40-43
• 4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果43-49
• 5 結(jié)果與討論49-51
• 第四節(jié) 穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞系的建立51-53
• 1 實(shí)驗(yàn)材料51
• 2 實(shí)驗(yàn)方法51-52
• 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果52
• 4 結(jié)果與討論52-53
• 參考文獻(xiàn)53-56
• 第二部分 中國(guó)周邊HBV基因型和亞型流行分布情況56-71
• 1 方法56-57
• 2 結(jié)果57-63
• 3 討論63-66
• 參考文獻(xiàn)66-71
• 全文總結(jié)71-73
• 本文的進(jìn)步意義71
• 本文存在的問(wèn)題71-73
• 綜述73-79
• 參考文獻(xiàn)76-79
• 攻讀學(xué)位期間獲得科研成果79
• 作者簡(jiǎn)介79-80
• 致謝80

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 李俊強(qiáng);田敬華;劉峰;杜紹財(cái);;乙型肝炎病毒表面抗原終止密碼子的偏嗜性選擇[J];北京大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2008年03期

2 吳光華;丁惠國(guó);曾長(zhǎng)青;;公共核酸數(shù)據(jù)庫(kù)乙肝病毒全基因組序列概況和中國(guó)HBV參照序列的建立[J];自然科學(xué)進(jìn)展;2008年02期

3 杜茜;馬其歡;龔旭陽(yáng);蔡雪飛;;低拷貝HBV病毒全長(zhǎng)DNA的制備和體外復(fù)制水平的鑒定[J];重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2013年04期

  本文關(guān)鍵詞：乙肝病毒三種基因型轉(zhuǎn)染細(xì)胞系在藥物實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：253930