【摘要】：目的探討溶酶體相關(guān)膜蛋白3(lysosome associated membrane protein 3,LAMP3)對肝細胞脂質(zhì)代謝的作用。方法以肝癌細胞系Huh7為研究對象,利用qRT-PCR及Western blot法檢測游離脂肪酸(free fatty acids,FFAs)0.4 mmol/L處理后肝細胞LAMP3表達變化;過表達LAMP3后,分別使用油紅染色及甘油三酯檢測試劑盒檢測肝細胞內(nèi)脂滴及甘油三酯沉積情況;采用ATP及β-羥基丁酸檢測試劑盒檢測細胞內(nèi)ATP及β-羥基丁酸含量變化;過表達LAMP3,使用qRT-PCR、Western blot法檢測脂質(zhì)合成相關(guān)基因PPARγ與SCD-1及脂質(zhì)分解相關(guān)基因CPT1A與PGC-1α表達變化。結(jié)果 FFAs處理后肝細胞Huh7中LAMP3表達顯著上調(diào)(P0.05);過表達LAMP3可顯著促進肝細胞內(nèi)脂滴和甘油三酯的沉積(P0.05);過表達LAMP3對肝細胞內(nèi)ATP及β-羥基丁酸含量的影響差異無統(tǒng)計學意義(P0.05);過表達LAMP3可促進PPARγ及SCD-1表達(P0.05),但對CPT1A、PGC-1α表達的影響差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。結(jié)論 LAMP3可通過調(diào)控脂肪合成促進肝細胞內(nèi)脂質(zhì)沉積。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of lysosome associated membrane protein 3 (lysosome associated membrane protein 3, LAMP3) on lipid metabolism in hepatocytes. Methods qRT-PCR and Western blot methods were used to detect the expression of LAMP3 in hepatocellular carcinoma cell line Huh7 treated with 0. 4 mmol/L of free fatty acid (FFA). After overexpression of LAMP3, lipid droplets and triglyceride deposition were detected by oil red staining and triglyceride assay kit, ATP and 尾-hydroxybutyric acid contents were detected by ATP and 尾-hydroxybutyric acid assay kit. Overexpression of LAMP3, was used to detect the expression of lipid synthesis related genes PPAR 緯 and SCD-1, and lipid decomposition related genes CPT1A and PGC-1 偽 by qRT-PCR,Western blot method. Results the expression of LAMP3 in hepatocyte Huh7 was significantly up-regulated after FFAs treatment (P0.05), and over-expression of LAMP3 could significantly promote the deposition of lipid droplets and triglycerides in hepatocytes (P0.05). The effect of over-expression of LAMP3 on the content of ATP and 尾-hydroxybutyric acid in hepatocytes was not statistically significant (P0.05). Overexpression of LAMP3 could promote the expression of PPAR 緯 and SCD-1 (P0.05), but there was no significant difference in the expression of CPT1A,PGC-1 偽 (P0.05). Conclusion LAMP3 can promote lipid deposition in hepatocytes by regulating fat synthesis.
【作者單位】： 第三軍醫(yī)大學新橋醫(yī)院消化內(nèi)科;第三軍醫(yī)大學新橋醫(yī)院內(nèi)分泌科;
【基金】：國家自然科學基金面上項目(81471039) 重慶市基礎(chǔ)與前沿研究計劃項目(CSTC2016jcyj A0093)~~
【分類號】：R575

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本文編號：2432197