TLR4與TLR9介導(dǎo)的信號(hào)傳導(dǎo)通路在炎癥性腸病中的作用研究
本文關(guān)鍵詞：TLR4與TLR9介導(dǎo)的信號(hào)傳導(dǎo)通路在炎癥性腸病中的作用研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
《瀘州醫(yī)學(xué)院》 2011年
TLR4與TLR9介導(dǎo)的信號(hào)傳導(dǎo)通路在炎癥性腸病中的作用研究
黃麗
【摘要】：目的 .炎癥性腸病(Inflammatory bowel disease,IBD)包括潰瘍性結(jié)腸炎(Ulcerative colitis,UC)和克羅恩病(Crohn disease,CD)。近年來該病的發(fā)病率有逐漸增高的趨勢,其病因和發(fā)病機(jī)制涉及遺傳、環(huán)境、免疫、感染等因素,但至今尚未闡明。新近研究發(fā)現(xiàn)Toll樣受體(Toll-like receptors,TLRs)是參與非特異性免疫的一類重要分子,也是連接非特異性免疫和特異性免疫的重要橋梁。Toll樣受體屬于高度保守的Ⅰ型跨膜蛋白(typeⅠtransmembrance protein),能識(shí)別病原相關(guān)分子模式(pathogen associated molecular patterns,PAMPs),通過髓樣分化因子88 (myeloid differentiation factor 88,MyD88)-核因子κB (nuclear factor-κB,NF-κB)等多條信號(hào)途徑,啟動(dòng)細(xì)胞活化進(jìn)程,上調(diào)主要組織相容性復(fù)合物(major histocompatibility complex, MHC)和共刺激分子表達(dá),分泌細(xì)胞因子等,從而進(jìn)一步誘導(dǎo)炎癥免疫反應(yīng),同時(shí)活化的TLRs也能激活T細(xì)胞,啟動(dòng)獲得性免疫反應(yīng)。本課題利用葡聚糖硫酸鈉(dextran sulfate sodium, DSS)結(jié)腸炎模型研究結(jié)腸炎小鼠腸黏膜組織中TLR4.TLR9與NF-κB及促炎癥細(xì)胞因子TNF-α的表達(dá)以及相互關(guān)系,探討TLR4、TLR9信號(hào)途徑在實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎中的作用。 方法 建立小鼠葡聚糖硫酸鈉結(jié)腸炎模型,進(jìn)行大體和組織病理學(xué)評價(jià)：6-8周齡健康雄性Balb/c小鼠分為兩組：A組(正常對照組,n=5)：蒸餾水自由飲用7天。B組(DSS急性結(jié)腸炎組,n=15):5%DSS溶液自由飲用7天。造模7天后處死小鼠,免疫組化方法檢測小鼠結(jié)腸黏膜TLR4、TLR9、NF-κB、TNF-α蛋白表達(dá)。 結(jié)果 1.小鼠葡聚糖硫酸鈉結(jié)腸炎造模成功,小鼠結(jié)腸黏膜有明顯的肉眼和組織學(xué)炎癥。 2.免疫組化檢測到TLR4和TLR9在B組小鼠結(jié)腸黏膜表達(dá)顯著高于A組(P＜0.05)；NF-κB在B組結(jié)腸黏膜表達(dá)顯著高于A組(P＜0.05),TNF-α蛋白在B組結(jié)腸黏膜表達(dá)顯著高于A組(P＜0.05),TLR4與NF-κB、TNF-α的表達(dá)呈正相關(guān),pearson相關(guān)系數(shù)r分別為0.816,0.834。TLR9與NF-κB、TNF-α的表達(dá)呈正相關(guān),pearson相關(guān)系數(shù)r分別為0.781、0.807。 3.小鼠結(jié)腸黏膜中TLR4和TLR9蛋白的表達(dá)存在關(guān)聯(lián)并有較好的一致性 結(jié)論 1.DSS結(jié)腸炎小鼠結(jié)腸黏膜TLR4和TLR9的表達(dá)顯著高于正常對照組。其表達(dá)越強(qiáng),結(jié)腸黏膜損傷越重。 2.NF-κB、TNF-α的表達(dá)顯著高于正常對照組,且與TLR4和TLR9的表達(dá)呈平行關(guān)系。說明TLR4和TLR9的表達(dá)與NF-κB、促炎因子的表達(dá)密切相關(guān),TLR4、9在結(jié)腸黏膜異常高表達(dá)經(jīng)由其信號(hào)傳導(dǎo)通路激活下游NF-κB以及炎癥因子TNF-α的釋放致使DSS結(jié)腸炎炎癥反應(yīng)發(fā)生及發(fā)展。 3.TLR4和TLR9蛋白在DSS結(jié)腸炎小鼠結(jié)腸黏膜中的表達(dá)存在關(guān)聯(lián)并有較好的一致性,提示二者可能在DSS誘導(dǎo)小鼠結(jié)腸炎的發(fā)生、發(fā)展過程中起協(xié)同作用,共同促成及加劇了炎癥反應(yīng)的發(fā)生及持續(xù)。 目的：通過檢測人類正常結(jié)腸黏膜、不同程度UC患者結(jié)腸黏膜的TLR4、TLR9蛋白的表達(dá)差異,探討TLR4和TLR9在UC發(fā)生發(fā)展中的可能作用。方法：選取在成都市軍區(qū)總醫(yī)院消化內(nèi)科確診的活動(dòng)期UC患者,依據(jù)臨床資料、血、生化指標(biāo)及內(nèi)鏡表現(xiàn),計(jì)算UC疾病活動(dòng)度(UCAI)。根據(jù)Truelove標(biāo)準(zhǔn)對UC進(jìn)行病理學(xué)分級。免疫組織化學(xué)方法檢測UC和正常對照結(jié)腸組織中TLR4、TLR9及NF-κBp65的表達(dá)。結(jié)果 1.UC組患者病變部位大部分集中于遠(yuǎn)端結(jié)腸,活動(dòng)度以輕、中度居多。UCAI評分與病理分級之間呈正相關(guān)。 2.免疫組化發(fā)現(xiàn)正常腸黏膜只微弱表達(dá)或不表達(dá)TLR4、TLR9及NF-κB p65蛋白,而在UC結(jié)腸上皮和炎癥細(xì)胞中的表達(dá)均高于正常對照,陽性率隨病理學(xué)分級增高逐漸增高(p0.05),與病理學(xué)分級呈正相關(guān),TLR4和TLR9的表達(dá)存在關(guān)聯(lián)并有較好的一致性。結(jié)論 1.TLR4、TLR9在正常人體腸黏膜只微弱表達(dá)或不表達(dá),可能與腸黏膜與腸內(nèi)容物的耐受有關(guān),而在UC中表達(dá)高度上調(diào),陽性率隨病理學(xué)分級的增高逐漸升高,且它們的表達(dá)強(qiáng)度反應(yīng)了炎癥的程度,推測TLR4和TLR9介導(dǎo)的識(shí)別PAMPs功能失調(diào)在UC發(fā)生、發(fā)展中起作用。 2.NF-κB在UC中的表達(dá)顯著高于正常對照組,且與TLR4和TLR9的表達(dá)呈平行關(guān)系。說明TLR4和TLR9的表達(dá)與NF-κB的表達(dá)密切相關(guān),TLR4、9在結(jié)腸黏膜異常高表達(dá)經(jīng)由其信號(hào)傳導(dǎo)通路激活下游NF-κB,從而導(dǎo)致了UC的發(fā)生及發(fā)展。 3.TLR4和TLR9蛋白在UC組織中的表達(dá)存在關(guān)聯(lián)并有較好的一致性,提示二者可能在UC的發(fā)生、發(fā)展過程中起協(xié)同作用,共同促成及加劇了UC炎癥反應(yīng)的發(fā)生及持續(xù)。
【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：瀘州醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號(hào)】：R574
【目錄】：
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10 中南大學(xué)湘雅二醫(yī)院風(fēng)濕病科教授 高潔生;[N];大眾衛(wèi)生報(bào);2002年
中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條
1 李攀;維生素D與炎癥性腸病臨床特征的相關(guān)性研究及其作用通路中炎性因子的遺傳易感性研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2011年
2 王建明;TLR4信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路活化在胃缺血再灌注損傷中的作用研究[D];昆明醫(yī)學(xué)院;2010年
3 李斌;青蒿琥酯抗炎與抗菌增敏作用在其保護(hù)細(xì)菌膿毒癥模型小鼠中的作用及機(jī)制研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2008年
4 曾誠;二苯乙烯苷對炎癥性腸病的作用:誘導(dǎo)PPAR-γ和抑制NF-κB炎癥通路[D];華中科技大學(xué);2011年
5 孫學(xué)剛;LPS受體介導(dǎo)的細(xì)胞激活的信號(hào)機(jī)制研究[D];中國人民解放軍第一軍醫(yī)大學(xué);2003年
6 曾誠;二苯乙烯苷對炎癥性腸病的作用：誘導(dǎo)PPAR-γ和抑制NF-κB及其炎癥通路[D];華中科技大學(xué);2011年
7 吳漢青;TLR9在胰腺癌中的表達(dá)及其對胰腺癌生物學(xué)行為的影響及機(jī)制研究[D];華中科技大學(xué);2011年
8 王超;TLR9在膠質(zhì)瘤中的表達(dá)及其與膠質(zhì)瘤生物學(xué)行為和預(yù)后的關(guān)系[D];中國醫(yī)科大學(xué);2010年
9 彭歡;TLR4信號(hào)通路在膽囊癌中的表達(dá)及其作用機(jī)制的初步研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2011年
10 王居平;TLR4乙�；�/甲基化修飾激活對炎癥免疫的調(diào)節(jié)[D];浙江大學(xué);2011年
中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條
1 黃麗;TLR4與TLR9介導(dǎo)的信號(hào)傳導(dǎo)通路在炎癥性腸病中的作用研究[D];瀘州醫(yī)學(xué)院;2011年
2 胡春艷;氯沙坦鉀對腹膜透析大鼠腹膜纖維化組織中TLR4表達(dá)的影響[D];山西醫(yī)科大學(xué);2010年
3 姚安會(huì);TLR4在脊髓擠壓傷后的表達(dá)及作用[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2010年
4 姚安會(huì);TLR4在脊髓擠壓傷后的表達(dá)及作用[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2010年
5 張莉;連續(xù)腎臟替代治療對急性腎損傷患者循環(huán)內(nèi)皮細(xì)胞及TLR4的影響[D];蘭州大學(xué);2010年
6 楊瑞虹;TLR4基因多態(tài)性與新疆維、漢民族支氣管哮喘的關(guān)聯(lián)研究[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2010年
7 王芳芳;TLR4基因多態(tài)性及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)因子與軍團(tuán)菌感染的關(guān)系[D];山西醫(yī)科大學(xué);2011年
8 景雪峰;腦缺血預(yù)處理對大鼠局灶性腦缺血后TLR4表達(dá)的影響[D];中國醫(yī)科大學(xué);2010年
9 李秀秀;益腎膠囊對糖尿病腎病大鼠模型腎組織TLR4表達(dá)的影響[D];山西醫(yī)科大學(xué);2010年
10 趙興旺;雞TLR4不同突變基因型對抗腸炎沙門氏菌感染的差異[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2011年
本文關(guān)鍵詞：TLR4與TLR9介導(dǎo)的信號(hào)傳導(dǎo)通路在炎癥性腸病中的作用研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
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