本文關(guān)鍵詞：臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞治療終末期肝硬化的臨床觀察，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《河南大學(xué)》 2011年

臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞治療終末期肝硬化的臨床觀察

郭俊賢  

【摘要】：肝硬化(hepatic cirrhosis)是由多種原因引起的肝臟損害,表現(xiàn)為肝細(xì)胞變性壞死,纖維組織增生,肝細(xì)胞結(jié)節(jié)狀再生,肝小葉結(jié)構(gòu)變形,血液循環(huán)途徑被改建,最終導(dǎo)致肝硬化。根據(jù)病因分類,肝硬化主要有病毒性肝硬化、酒精性肝硬化、膽汁性肝硬化、自身免疫性肝硬化及隱原性肝硬化等。我國以病毒性肝硬化為主,其中主要為乙型肝炎病毒感染造成,很多病人無法長期規(guī)范化治療最終致肝硬化。肝硬化病人有門脈高壓和肝功能障礙,病人常因消化道大出血和肝性腦病死亡。因此,肝硬化治療是一項長期艱巨的任務(wù),有效的方法為肝移植,因肝臟供體少,臨床工作難以大量展開,越來越多的研究者致力于研究能替代肝移植的方法,間充質(zhì)干細(xì)胞成為新的方向。 間充質(zhì)干細(xì)胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)屬于干細(xì)胞家族,主要存在于骨髓、臍帶、臍血和胚胎中。因具有多向分化潛能、造血支持、免疫調(diào)控和自我復(fù)制等特點(diǎn),受到人們的關(guān)注。間充質(zhì)干細(xì)胞在體內(nèi)或體外誘導(dǎo)條件下可以分化為骨、軟骨、脂肪、肌肉、肌腱、神經(jīng)、類肝細(xì)胞、心肌等組織細(xì)胞,連續(xù)傳代后仍具有多向分化潛能,可作為理想種子細(xì)胞用于炎癥病變及衰老引起的器官修復(fù)。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞應(yīng)用于臨床較早,但抽取骨髓為有創(chuàng)性檢查,增加了病人痛苦,越來越多的學(xué)者致力于研究臍帶來源的間充質(zhì)干細(xì)胞。臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞來源廣泛,收集臍帶為無創(chuàng)操作,且治療肝硬化有促進(jìn)肝臟再生、提高患者生活質(zhì)量的作用,在臨床上應(yīng)用越來越受到重視。 目的:制備足月順產(chǎn)胎兒臍帶來源的間充質(zhì)干細(xì)胞,探討體外分離、培養(yǎng)、鑒定 方法,觀察臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞治療終末期肝硬化的臨床療效。方法:無菌條件下采集新生兒臍帶,經(jīng)過分離,培養(yǎng)獲得間充質(zhì)干細(xì)胞,流式細(xì)胞儀表面抗原測定(CD29、CD105、CD34、CD45);選擇50例肝硬化患者,26例患者在內(nèi)科治療基礎(chǔ)上經(jīng)前臂靜脈或肝動脈插管進(jìn)行MSCs移植,術(shù)后定期檢測肝功能、凝血功能及臨床癥狀,并觀察同期的癥狀體征和不良反應(yīng),同時隨機(jī)選擇24例僅以內(nèi)科治療的肝硬化患者做為對照組,兩組間進(jìn)行比較。 結(jié)果: (1)培養(yǎng)的臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞呈長梭形、旋渦狀生長。P1代消化后傳代,貼壁時間約48h左右,2-3W長滿80%。P6代以內(nèi)的細(xì)胞增殖無明顯差異。P3-P6代生長速度較快,24h貼壁,48h長滿70%,72h長滿80%,P3-P6代內(nèi)無明顯分化。 (2)細(xì)胞免疫表型顯示表達(dá)間充質(zhì)干細(xì)胞的特異性標(biāo)記CD29;但不表達(dá)造血干細(xì)胞表面標(biāo)記CD34、CD45。這與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的表型一致。 (3)臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞移植后,治療組ALB、PA和Fbg水平比對照組明顯升高(P﹤0.05),PT時間與對照組相比明顯降低(P﹤0.05)。 (4)治療組患者從治療后1周開始,乏力、腹脹、納差明顯好轉(zhuǎn),12周后患者腹水明顯減少。26例移植患者術(shù)中未出現(xiàn)嚴(yán)重不良反應(yīng),無與移植相關(guān)的嚴(yán)重并發(fā)癥。 結(jié)論: (1)本實驗用雙酶消化法分離出間充質(zhì)干細(xì)胞,經(jīng)過凍存、復(fù)蘇后細(xì)胞損傷小,多次傳代后細(xì)胞分化少,增殖能力穩(wěn)定。 (2)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞經(jīng)過流式細(xì)胞儀測定后,表達(dá)間充質(zhì)干細(xì)胞的表型,不表達(dá)造血干細(xì)胞表型,與骨髓來源的間充質(zhì)干細(xì)胞檢測一致。 (3)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞治療終末期肝硬化,可提高患者ALB、PA、Fbg,縮短PT,改善了患者的臨床癥狀。 (4)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞移植肝硬化患者,具有良好的安全性。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：河南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號】：R575.2
【目錄】：

摘要4-6

ABSTRACT6-12

前言12-14

第一部分 臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的制備14-23

1.1 序言14

1.2 材料、試劑與儀器14-15

1.2.1 材料14

1.2.2 主要試劑14-15

1.2.3 主要儀器15

1.3 方法與步驟15-16

1.3.1 臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)15-16

1.3.2 細(xì)胞凍存16

1.3.3 細(xì)胞復(fù)蘇16

1.3.4 流式細(xì)胞儀檢測16

1.4 結(jié)果16-19

1.4.1 細(xì)胞培養(yǎng)16-18

1.4.2 流式細(xì)胞儀檢測18-19

1.5 討論19-22

參考文獻(xiàn)22-23

第二部分 臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞治療終末期肝硬化23-38

2.1 序言23

2.2 細(xì)胞來源23

2.3 臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療肝硬化患者選擇23-25

2.3.1 病例入選標(biāo)準(zhǔn)23-24

2.3.2 篩選評估24-25

2.3.3 治療分組25

2.4 治療方法25-26

2.4.1 治療時間25

2.4.2 移植細(xì)胞數(shù)25

2.4.3 移植途徑25-26

2.4.4 術(shù)后治療26

2.5 術(shù)后觀察26-27

2.5.1 不良反應(yīng)26

2.5.2 隨訪時間26

2.5.3 隨訪項目指標(biāo)26-27

2.5.4 評價指標(biāo)27

2.5.5 統(tǒng)計學(xué)處理27

2.6 結(jié)果27-33

2.6.1 臨床資料27

2.6.2 肝功能和凝血功能的變化27-33

2.6.3 臨床癥狀變化33

2.6.4 不良反應(yīng)33

2.7 討論33-37

參考文獻(xiàn)37-38

第三部分 結(jié)論38-39

第四部分 文獻(xiàn)綜述間充質(zhì)干細(xì)胞治療終末期肝硬化的研究進(jìn)展39-52

4.1 概述39

4.2 間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCs）來源39-40

4.3 間充質(zhì)干細(xì)胞的培養(yǎng)方法40-41

4.4 間充質(zhì)干細(xì)胞的特征41-46

4.4.1 間充質(zhì)干細(xì)胞的形態(tài)和表面標(biāo)志41

4.4.2 間充質(zhì)干細(xì)胞的多向分化能力41-43

4.4.3 間充質(zhì)干細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)作用43-44

4.4.4 間充質(zhì)干細(xì)胞的致瘤性44-45

4.4.5 間充質(zhì)干細(xì)胞的歸巢45-46

4.5 間充質(zhì)干細(xì)胞治療終末期肝硬化46-47

4.5.1 肝臟的損傷、修復(fù)與再生46-47

4.5.2 間充質(zhì)干細(xì)胞治療肝硬化的研究47

4.6 討論47-49

參考文獻(xiàn)49-52

英文縮略詞表52-53

致謝53-55

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【引證文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 關(guān)世運(yùn);范瑞琴;;終末期肝硬化合并慢性腎炎10例報道[J];胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志;2010年09期

2 金震濱;陸健;;終末期肝硬化胸部并發(fā)癥的X線及CT表現(xiàn)[J];中國醫(yī)學(xué)影像學(xué)雜志;2009年02期

3 蔣忠;馬正良;靳艷卿;周路陽;;終未期肝硬化肝移植術(shù)中凝血功能的調(diào)控[J];臨床麻醉學(xué)雜志;2008年04期

4 袁楊;;大鼠終末期肝硬化模型的制備[J];云南醫(yī)藥;2009年03期

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  本文關(guān)鍵詞：臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞治療終末期肝硬化的臨床觀察，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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