發(fā)布時(shí)間：2017-12-22 03:40

  本文關(guān)鍵詞：維生素D3對急性結(jié)腸炎及炎癥相關(guān)結(jié)直腸癌小鼠模型的干預(yù)研究及機(jī)制初探　出處：《北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院》2015年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：研究背景炎癥性腸病(Inflammatory bowel disease, IBD)是一組發(fā)病原因尚不明確的慢性非特異性腸道炎癥性疾病,主要包括潰瘍性結(jié)腸炎(Ulcerative Colitis, UC)和克羅恩病(Crohn's disease,CD).IBD是結(jié)直腸癌(Colorectal cancer, CRC)發(fā)生的高危因素。維生素D(Vitamin D, VitD)是甾體類激素骨化三醇的前體,近年來發(fā)現(xiàn)除調(diào)節(jié)鈣、磷代謝外,VitD對人體還具有抗感染、免疫調(diào)節(jié)和預(yù)防癌癥等作用。流行病學(xué)及臨床研究發(fā)現(xiàn)IBD患者中VitD缺乏發(fā)生率高,VitD缺乏是CRC的危險(xiǎn)因素。大量臨床前研究和部分臨床試驗(yàn)提示補(bǔ)充VitD有望抑制結(jié)腸炎癥、降低CRC發(fā)生率。第一部分維生素D3對葡聚糖硫酸鈉誘導(dǎo)的急性結(jié)腸小鼠模型的干預(yù)研究目的：探究預(yù)防性補(bǔ)充維生素D3(VitD3)對葡聚糖硫酸鈉(DSS)誘導(dǎo)的小鼠急性結(jié)腸炎的抑制作用及相關(guān)機(jī)制。方法：C57BL/6小鼠給予含2.5%DSS的飲用水5天以建立急性結(jié)腸炎模型。VitD3干預(yù)組從建模前兩周至DSS后第10天定期給予VitD3灌胃(32.5IU/g/周)。建模后每日測定小鼠體重、評價(jià)疾病活動(dòng)指數(shù)(DAI),DSS第10天處死小鼠后評價(jià)結(jié)腸大體和病理炎癥,測定結(jié)腸組織髓過氧化物酶(MPO)活性、TNF-α mRNA表達(dá)水平,進(jìn)行A ctivated caspase 3免疫組化染色評估結(jié)腸上皮凋亡情況。結(jié)果：模型組(n=10)小鼠體重下降、DAI、大體和病理炎癥評分、結(jié)腸組織MPO活性均顯著高于對照組(n=5)(P0.01)。VitD3干預(yù)組(n=10)小鼠血清25(OH)D濃度顯著升高,但血鈣無顯著升高。干預(yù)組結(jié)腸炎癥狀較模型組改善,結(jié)腸大體和病理炎癥評分、MPO活性、TNF-α表達(dá)較模型組均降低(病理評分P=0.06,余P均0.05),干預(yù)組結(jié)腸上皮細(xì)胞凋亡較模型組顯著減少。結(jié)論：VitD3可抑制DSS誘導(dǎo)的小鼠急性結(jié)腸炎,抑制結(jié)腸組織TNF-α表達(dá)及結(jié)腸上皮細(xì)胞凋亡可能是相關(guān)機(jī)制。第二部分維生素D3對氧化偶氮甲烷-葡聚糖硫酸鈉誘導(dǎo)的炎癥相關(guān)結(jié)直腸癌小鼠模型的干預(yù)研究目的：探究預(yù)防性補(bǔ)充VitD3對氧化偶氮甲烷(AOM)-DSS誘導(dǎo)的小鼠炎癥相關(guān)結(jié)直腸癌的抑制作用及相關(guān)機(jī)制。方法：C57BL/6小鼠給予12.5mg/kg AOM和2.5%DSS以誘導(dǎo)炎癥相關(guān)結(jié)直腸癌模型。干預(yù)組給予VitD3定期灌胃(32.5IU/g/周)。建模后12周處死小鼠,進(jìn)行結(jié)腸大體成瘤評估(成瘤數(shù)和瘤負(fù)荷)、病理學(xué)評估(侵潤深度和異型性)及Ki-67免疫組化染色。檢測結(jié)腸組織維生素D受體(VDR).β-catenin.Forkhead box M1(FOXM1)及炎癥因子TNF-α、IL-6和IL-21的表達(dá)情況。結(jié)果：模型組(n=10)和VitD3干預(yù)組(n=9)均可見大體和病理成瘤。模型組和干預(yù)組成瘤數(shù)分別為5±2和3.8±3.99個(gè)(P=0.08),瘤負(fù)荷分別為1.28±0.91和0.83±0.91cm(P=0.08).模型組大(D4mm).中(2mmD≤4mm).小(D≤2mm)腫瘤占該組所有腫瘤的比例分別為10%、54%和36%,VitD干預(yù)組為0、35%和65%。兩組成瘤的侵潤深度和異型性無差異。模型組和干預(yù)組腫瘤Ki-67陽性率分別為58.3±11.7%和43.3±12.1%(P=0.054)。機(jī)制研究方面,相比于模型組,干預(yù)組的結(jié)腸β-catenin mRNA表達(dá)水平下降(P0.05)、入核減少,β-catenin的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物Cyclin D1 mRNA表達(dá)水平降低(P0.05)；干預(yù)組FOXM1表達(dá)水平較模型組顯著下降(P0.05).TNF-α在結(jié)腸炎和成瘤期mRNA表達(dá)均顯著高于對照組(P0.05)；急性炎癥期VDR在結(jié)腸上皮中表達(dá)下降(P0.05),成瘤后進(jìn)一步下降,干預(yù)組的VDR蛋白表達(dá)水平高于對應(yīng)的結(jié)腸炎和結(jié)腸腫瘤組織。結(jié)論：VitD3抑制AOM-DSS誘導(dǎo)的小鼠結(jié)腸腫瘤的大小。β-catenin.FOXM1可能在VitD/VDR介導(dǎo)的抑癌機(jī)制中起重要作用。VDR.TNF-a可能參與結(jié)腸炎癥癌癥轉(zhuǎn)化機(jī)制。
【學(xué)位授予單位】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R735.34;R-332;R574.62

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

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中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 戴張晗;維生素D治療大鼠結(jié)腸炎模型療效觀察及免疫調(diào)節(jié)機(jī)制的初探[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2012年

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本文編號：1318315