慢性乙型病毒性肝炎肝硬化合并脾功能亢進(jìn)患者脾部分栓塞術(shù)后并發(fā)癥的機(jī)制研究
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【摘要】:第一部分慢性乙型病毒性肝炎肝硬化合并脾功能亢進(jìn)患者脾部分栓塞后并發(fā)癥與腸道菌群相關(guān)性研究目的探討慢性乙型病毒性肝炎肝硬化合并脾功能亢進(jìn)患者脾部分栓塞術(shù)后并發(fā)癥發(fā)生與腸道菌群的相關(guān)性。方法本組研究對(duì)象分為四組:正常組;肝硬化合并脾功能亢進(jìn)脾部分栓塞術(shù)前組;肝硬化合并脾功能亢進(jìn)脾部分栓塞術(shù)后有并發(fā)癥組;肝硬化合并脾功能亢進(jìn)脾部分栓塞術(shù)后沒(méi)有并發(fā)癥組。收集各組研究對(duì)象的糞便標(biāo)本進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)并計(jì)數(shù);采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR的方法來(lái)比較各組人群腸道主要菌群(乳酸桿菌、雙歧桿菌、擬桿菌、腸桿菌、腸球菌及梭菌)的變化。結(jié)果本研究在培養(yǎng)的10種腸道主要細(xì)菌中,3組實(shí)驗(yàn)組與正常對(duì)照組比較,腸桿菌、腸球菌、葡菌球菌、酵母菌數(shù)量顯著增多,擬桿菌、雙歧桿菌和乳酸桿菌的數(shù)量顯著減少。而在脾栓塞術(shù)術(shù)后出現(xiàn)并發(fā)癥患者中,腸桿菌和腸球菌的數(shù)量較術(shù)前組及術(shù)后沒(méi)有并發(fā)癥組明顯增多,雙歧桿菌和乳酸桿菌的數(shù)量顯著減少。Real-time PCR的檢測(cè)結(jié)果提示:與正常人群比較,3組實(shí)驗(yàn)組患者的腸桿菌、腸球菌和梭菌明顯增加,擬桿菌和雙歧桿菌的數(shù)量顯著減少;各組間乳酸桿菌的數(shù)量沒(méi)有明顯差異。而術(shù)后有并發(fā)癥組中腸桿菌、腸球菌和梭菌的數(shù)量較術(shù)前組及術(shù)后沒(méi)有并發(fā)癥組明顯增多,雙歧桿菌的數(shù)量顯著減少。Real-time PCR的檢測(cè)結(jié)果與細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果基本一致。結(jié)論慢性乙型病毒性肝炎肝硬化脾功能亢進(jìn)脾部分栓塞患者存在腸道微生態(tài)失衡,特別是術(shù)后出現(xiàn)并發(fā)癥的患者,菌群失調(diào)更明顯。第二部分慢性乙型病毒性肝炎肝硬化合并脾功能亢進(jìn)患者脾部分栓塞術(shù)后并發(fā)癥與炎癥因子及內(nèi)毒素的相關(guān)性研究目的探討慢性乙型病毒性肝炎肝硬化合并脾功能亢進(jìn)患者脾部分栓塞術(shù)后并發(fā)癥發(fā)生與與炎癥因子及內(nèi)毒素的相關(guān)性。方法將研究對(duì)象分為三組:正常組;肝硬化合并脾功能亢進(jìn)脾部分栓塞術(shù)后有并發(fā)癥組;肝硬化合并脾功能亢進(jìn)脾部分栓塞術(shù)后沒(méi)有并發(fā)癥組。在術(shù)前1天、術(shù)后7天及術(shù)后1個(gè)月抽取患者外周靜脈血液,采用ELISA法檢測(cè)LPS、IL-6、IL-8、TNF-α及s ICAM-1的表達(dá)。結(jié)果行部分脾栓塞術(shù)術(shù)后有并發(fā)癥的患者組,外周血中LPS、IL-6、IL-8、TNF-α及s ICAM-1含量一直高于正常組,且術(shù)后第7天水平明顯高于術(shù)前水平,而術(shù)后1個(gè)月時(shí)與術(shù)前水平無(wú)明顯差異。行部分脾栓塞術(shù)術(shù)后沒(méi)有并發(fā)癥的患者組,外周血中LPS、IL-6、IL-8、TNF-α及s ICAM-1含量一直高于正常組,但術(shù)后7天及術(shù)后1個(gè)月時(shí)LPS、IL-6、IL-8及TNF-α含量與術(shù)前水平無(wú)明顯差異,而s ICAM-1含量在術(shù)后7天時(shí)明顯高于術(shù)前。術(shù)后有并發(fā)癥組的LPS、IL-6、IL-8、TNF-α及s ICAM-1含量在術(shù)后7天時(shí)明顯高于術(shù)后沒(méi)有并發(fā)癥組,而在術(shù)后1個(gè)月時(shí)兩組沒(méi)有明顯差異。結(jié)論術(shù)后一周LPS、IL-6、IL-8、TNF-α及s ICAM-1仍持續(xù)增高可以作為脾部分栓塞術(shù)后并發(fā)癥發(fā)生與否的參考指標(biāo)。第三部分慢性乙型病毒性肝炎肝硬化合并脾功能亢進(jìn)患者脾部分栓塞術(shù)后并發(fā)癥與免疫功能相關(guān)性研究目的探討慢性乙型病毒性肝炎肝硬化合并脾功能亢進(jìn)患者脾部分栓塞術(shù)后出現(xiàn)并發(fā)癥與免疫功能的相關(guān)性。方法將研究對(duì)象分為三組:正常組;肝硬化合并脾功能亢進(jìn)脾部分栓塞術(shù)后有并發(fā)癥組;肝硬化合并脾功能亢進(jìn)脾部分栓塞術(shù)后沒(méi)有并發(fā)癥組。采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)患者術(shù)前、術(shù)后1個(gè)月、術(shù)后6個(gè)月、術(shù)后1年及術(shù)后2年的外周血中CD3+、CD4+、CD8+T細(xì)胞及CD4+CD25+CDl27low/-Treg的表達(dá)變化,采用全自動(dòng)免疫分析儀測(cè)定免疫球蛋白(Ig A、Ig G、Ig M)的含量。結(jié)果流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果顯示行部分脾栓塞術(shù)術(shù)后有并發(fā)癥的患者組,外周血中CD3+和CD8+T細(xì)胞的量開(kāi)始低于正常水平,后期逐漸恢復(fù)正常水平,但CD4+T細(xì)胞的含量均低于正常人群。與術(shù)前相比,術(shù)后CD3+、CD4+和CD8+T細(xì)胞含量先降低后升高至正常水平。行部分脾栓塞術(shù)術(shù)后沒(méi)有并發(fā)癥的患者組,外周血中CD3+、CD4+T和CD8+T細(xì)胞水平術(shù)后早期低于正常水平,后來(lái)逐漸恢復(fù)正常水平。與術(shù)前相比,術(shù)后CD3+、CD4+T細(xì)胞含量先降低后升高至正常水平,而CD8+T細(xì)胞與術(shù)前水平比較無(wú)明顯差異。術(shù)后有并發(fā)癥組的CD3+、CD4+和CD8+T細(xì)胞含量在術(shù)后早期明顯低于術(shù)后沒(méi)有并發(fā)癥組,后期兩組間無(wú)明顯差異。各組患者中CD4+CD25+CDl27low/-Treg含量在術(shù)后1個(gè)月或6個(gè)月時(shí)較正常組及術(shù)前水平明顯增高,隨后會(huì)逐漸恢復(fù)至正常水平。術(shù)后有并發(fā)癥組的CD4+CD25+CDl27low/-Treg含量在術(shù)后1個(gè)月和6個(gè)月時(shí)明顯高于術(shù)后沒(méi)有并發(fā)癥組的CD4+CD25+CDl27low/-Treg含量,隨后各時(shí)間點(diǎn)兩者之間無(wú)明顯差異。免疫球蛋白檢測(cè)結(jié)果顯示各組患者在術(shù)前及術(shù)后各時(shí)間段的Ig A、Ig G、Ig M含量與正常水平?jīng)]有明顯差異,各組間也沒(méi)有明顯差異。結(jié)論慢性乙型病毒性肝炎肝硬化脾亢患者行部分脾栓塞術(shù)對(duì)機(jī)體免疫功能只是產(chǎn)生短期的影響,特別在有并發(fā)癥的患者中早期影響更明顯,但后期患者的免疫功能會(huì)逐漸恢復(fù)正常,該結(jié)果提示在脾栓塞術(shù)后早期應(yīng)該注意預(yù)防感染和提高患者機(jī)體免疫力,以減少各種并發(fā)癥的發(fā)生。
【學(xué)位授予單位】:廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:R512.6;R657.63
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