本文關(guān)鍵詞：程序性細(xì)胞死亡因子-1在慢性HBV感染中的作用

  更多相關(guān)文章： 肝炎 乙型 慢性 程序性細(xì)胞死亡因子-1 核苷類似物 核苷酸類似物 單核苷酸多態(tài)性 免疫

【摘要】：背景:乙型肝炎發(fā)病機(jī)制復(fù)雜,受病毒、宿主及二者相互作用的影響,病毒方面包括病毒蛋白、基因型等,而宿主方面的則主要包括宿主遺傳背景、免疫狀態(tài)因素等,宿主與病毒因素間平衡是影響疾病進(jìn)展與轉(zhuǎn)歸的核心環(huán)節(jié)。核苷(酸)類似物(Nucleoside/Nucleotide analogues,NAs)是一類口服抗乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)藥物,主要作用機(jī)制是其進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)首先成為三磷酸化合物,通過與底物的競爭,抑制病毒的聚合酶或反轉(zhuǎn)錄酶,終止HBV DNA鏈的延長。近來研究表明,NAs可能還具有免疫調(diào)節(jié)作用。對(duì)服用NAs抗病毒治療的慢性乙型病毒性肝炎(Chronic hepatitis B,CHB)患者的研究表明:NAs治療可以調(diào)節(jié)Th1/Th2平衡,改善Treg細(xì)胞增殖,促進(jìn)機(jī)體免疫功能的增強(qiáng)或恢復(fù)。臨床中NAs抗HBV感染的療效具有個(gè)體差異性,其影響因素除病毒基因型外,宿主的遺傳背景也具有很大作用,而宿主的遺傳背景主要由單核苷酸多態(tài)性(Single nucleotide polymorphism,SNP)決定。SNP指由單個(gè)核苷酸A、T、C或G的改變而引起的DNA序列的改變,從而造成的不同物種間或人體內(nèi)染色體基因組的多樣性。SNP構(gòu)成人類基因組90%以上的變異,廣泛用于連鎖分析與基因定位、疾病易感性、群體遺傳學(xué)與進(jìn)化生物學(xué)、藥物基因組、環(huán)境基因組學(xué)等研究。目前文獻(xiàn)報(bào)道的與HBV感染預(yù)后相關(guān)的SNP包括:人類白細(xì)胞抗原結(jié)構(gòu)區(qū)的HLA DRBA*1302、MHC-I、II位點(diǎn),非人類白細(xì)胞抗原結(jié)構(gòu)區(qū)的腫瘤壞死因子-α、干擾素-γ、雌激素受體-α、甘露糖結(jié)合蛋白、維生素D受體、白介素-10、干擾素γ誘導(dǎo)的蛋白-10、程序性細(xì)胞死亡因子-1等基因。程序性細(xì)胞死亡因子-1(Programmed celll death-1,PD-1)屬于CD28家族和Ig超家族,是一種相對(duì)分子質(zhì)量約50-55KDa的I型跨膜蛋白,表達(dá)于活化的CD4+和CD8+T細(xì)胞、B細(xì)胞和骨髓細(xì)胞,在未活化的淋巴細(xì)胞不表達(dá)。慢性HBV感染時(shí),肝細(xì)胞表面過度表達(dá)PD-1的配體PD-L1,通過PD-1/PD-L1信號(hào)通路抑制CD8+T細(xì)胞的表達(dá),T細(xì)胞耗竭導(dǎo)致IFN-γ、TNF-α等抗病毒細(xì)胞因子的表達(dá)減少,病毒持續(xù)存在。PD-1的不同等位基因的表達(dá)在HBV感染患者、肝硬化患者和健康人群中不同,且其內(nèi)含子的SNP與外周血病毒載量相關(guān)。最近研究發(fā)現(xiàn)在HBV和HIV/HBV感染的CHB患者中,外周血Treg細(xì)胞的擴(kuò)增與HBV DNA載量相關(guān)且表現(xiàn)為抑制HBV特異性免疫反應(yīng);阿德福韋酯治療可阻斷PD-1受體表達(dá),抑制HBV復(fù)制,減少Treg細(xì)胞數(shù)量和功能,顯著提高HBV特異性CD8+T效應(yīng)細(xì)胞,從而增強(qiáng)免疫應(yīng)答。目前關(guān)于PD-1在HBV慢性感染中的作用研究尚未十分明確,PD-1單核苷酸多態(tài)性與HBV感染自發(fā)清除和抗HBV療效的研究較少,且研究結(jié)果不一致,NAs抗病毒治療與PD-1及其相關(guān)因子是否存在關(guān)聯(lián),是否能夠影響宿主的免疫功能尚存在爭議。目的:本研究通過測定HBV感染自發(fā)清除者、CHB患者(包括NAs治療者和未抗HBV者)及HBV相關(guān)慢加急性肝衰竭(Acute-on-chronic liver failure,ACLF)患者血清及肝組織表達(dá)PD-1的水平,探討不同HBV感染階段PD-1的水平的變化,評(píng)價(jià)NAs對(duì)PD-1表達(dá)水平的影響,分析血清PD-1與慢性HBV感染者臨床生化指標(biāo)及病毒載量的相關(guān)性,探討PD-1在HBV感染發(fā)展及轉(zhuǎn)歸中的作用。通過測定HBV感染自發(fā)清除者、CHB患者(包括NAs治療者和未抗HBV者)及HBV相關(guān)慢加急性肝衰竭(Acute-on-chronic liver failure,ACLF)患者血清PD-1、IL-10、IFN-γ水平,HBV DNA載量,以及外周血HBV特異性CD8+T細(xì)胞頻率,探討NAs對(duì)PD-1/PD-L1抑制通路的影響,及對(duì)宿主免疫功能的作用。通過分析不同HBV感染狀態(tài)人群及NAs治療不同應(yīng)答患者的SNP,探索PD-1的SNP在HBV感染預(yù)后轉(zhuǎn)歸中的作用,及其與NAs抗HBV治療的關(guān)系,證實(shí)NAs在抗HBV治療中免疫調(diào)節(jié)的作用,研究PD-1等位基因在抗HBV治療中的作用。方法:1慢性HBV感染患者程序性細(xì)胞死亡因子-1水平變化與意義篩選河北醫(yī)科大學(xué)第三醫(yī)院感染科自2013年10月至2015年1月的病例:(1)慢性HBV感染病例:CHB病例符合2010年中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝病學(xué)分會(huì)和感染病學(xué)分會(huì)制訂的《慢性乙型肝炎防治指南》診斷標(biāo)準(zhǔn),并且排除有其他肝炎病毒合并感染者。HBV-ACLF病例診斷符合我國2012年中華醫(yī)學(xué)會(huì)感染病學(xué)分會(huì)肝衰竭與人工肝學(xué)組、中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝病學(xué)分會(huì)重型肝病與人工肝學(xué)組制定的《肝衰竭診療指南》,抗HBV治療者要求服用NAs單藥或聯(lián)合治療,未抗HBV治療者要求不曾使用任何NAs和/或干擾素抗病毒治療。(2)自發(fā)清除病例:抗-HBs、抗-HBe、抗HBc兩項(xiàng)或三項(xiàng)均陽性,HBV DNA陰性,肝功能正常,肝膽脾超聲檢查正常,未曾接受過任何抗病毒治療的既往HBV感染者。病例排除標(biāo)準(zhǔn):(1)合并妊娠及HAV、HCV、HDV、HEV、HIV、EBV、CMV等其他病毒感染者;(2)NAs與干擾素或中藥合用者;(3)患者伴有惡性腫瘤、嚴(yán)重免疫系統(tǒng)疾病、血液系統(tǒng)疾病或明顯精神病史。收集臨床資料包括:性別、年齡、診斷、治療、用藥時(shí)間。NAs治療病例均定期檢查肝功能(ALT、ALB、TB)、HBV病毒標(biāo)記物(HBs Ag、抗-HBs、HBe Ag、抗-HBe、抗-HBc)、HBV DNA載量。使用全自動(dòng)生化分析儀檢測所有入組患者ALB、ALT、TB等血清生化指標(biāo);全自動(dòng)血凝儀檢測PTA、INR;實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測HBV DNA載量(檢測下限為500copies/ml);抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)檢測血清PD-1含量;Westernblot檢測肝組織中PD-1蛋白的表達(dá)水平。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用IBM SPSS Statistics 19統(tǒng)計(jì)軟件,計(jì)量資料以(mean±SD)表示,數(shù)據(jù)分析前進(jìn)行正態(tài)性及方差齊性檢驗(yàn)。若數(shù)據(jù)為正態(tài)分布且方差齊同(P0.05)則應(yīng)用t檢驗(yàn)進(jìn)行比較,若方差不齊(P0.05)則應(yīng)用t'檢驗(yàn)進(jìn)行比較,多組之間比較應(yīng)用單因素方差分析,組間比較采用LSD檢驗(yàn);若數(shù)據(jù)呈非正態(tài)分布或方差不齊時(shí),采用Kruskal Wallis H秩和檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)。相關(guān)性分析采用Spearman等級(jí)相關(guān)分析。按α=0.05水準(zhǔn),雙側(cè)P0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2 HBV介導(dǎo)的PD-1/PD-L1抑制通路在慢性乙型病毒性肝炎疾病進(jìn)展中的作用篩選河北醫(yī)科大學(xué)第三醫(yī)院感染科自2013年10月至2015年1月的病例:(1)慢性HBV感染病例:CHB病例符合2010年中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝病學(xué)分會(huì)和感染病學(xué)分會(huì)制訂的《慢性乙型肝炎防治指南》診斷標(biāo)準(zhǔn),并且排除有其他肝炎病毒合并感染者。HBV-ACLF病例診斷符合我國2012年中華醫(yī)學(xué)會(huì)感染病學(xué)分會(huì)肝衰竭與人工肝學(xué)組、中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝病學(xué)分會(huì)重型肝病與人工肝學(xué)組制定的《肝衰竭診療指南》,抗HBV治療為服用NAs單藥或聯(lián)合治療。(2)自發(fā)清除病例:抗-HBs、抗-HBe、抗HBc兩項(xiàng)或三項(xiàng)均陽性,HBV DNA陰性,肝功能正常,肝膽脾超聲檢查正常,未曾接受過任何抗病毒治療的既往HBV感染者。病例排除標(biāo)準(zhǔn):(1)合并妊娠及HAV、HCV、HDV、HEV、HIV、EBV、CMV等其他病毒感染者;(2)NAs與干擾素或中藥合用者;(3)患者伴有惡性腫瘤、嚴(yán)重免疫系統(tǒng)疾病、血液系統(tǒng)疾病或明顯精神病史。收集臨床資料包括:性別、年齡、診斷、治療、用藥時(shí)間。NAs治療病例均定期檢查肝功能(ALT、ALB、TB)、HBV病毒標(biāo)記物(HBs Ag、抗-HBs、HBe Ag、抗-HBe、抗-HBc)、HBV DNA載量。使用全自動(dòng)生化分析儀檢測所有入組患者ALB、ALT、TB等血清生化指標(biāo);實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測HBV DNA載量(檢測下限為500copies/ml);ELISA檢測血清PD-1、IL-10、IFN-γ含量;取清晨空腹外周靜脈血3ml應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測外周血HBV特異性CD8+T細(xì)胞。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用IBM SPSS Statistics 19統(tǒng)計(jì)軟件,計(jì)量資料以(mean±SD)表示,數(shù)據(jù)分析前進(jìn)行正態(tài)性及方差齊性檢驗(yàn)。若數(shù)據(jù)為正態(tài)分布且方差齊同(P0.05)則應(yīng)用t檢驗(yàn)進(jìn)行比較,若方差不齊(P0.05)則應(yīng)用t'檢驗(yàn)進(jìn)行比較,多組之間比較應(yīng)用單因素方差分析,組間比較采用LSD檢驗(yàn);若數(shù)據(jù)呈非正態(tài)分布或方差不齊時(shí),采用Kruskal Wallis H秩和檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)。相關(guān)性分析采用Spearman等級(jí)相關(guān)分析。按α=0.05水準(zhǔn),雙側(cè)P0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3程序性細(xì)胞死亡因子-1單核苷酸多態(tài)性與抗HBV感染療效的相關(guān)性分析篩選河北醫(yī)科大學(xué)第三醫(yī)院感染科自2013年10月至2014年8月HBV感染病例195例。病例納入標(biāo)準(zhǔn):(1)HBV感染病例:CHB病例符合2010年中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝病學(xué)分會(huì)和感染病學(xué)分會(huì)制訂的《慢性乙型肝炎防治指南》診斷標(biāo)準(zhǔn),并且排除有其他肝炎病毒合并感染者。HBV-ACLF病例診斷符合我國2012年中華醫(yī)學(xué)會(huì)感染病學(xué)分會(huì)肝衰竭與人工肝學(xué)組、中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝病學(xué)分會(huì)重型肝病與人工肝學(xué)組制定的《肝衰竭診療指南》,抗HBV治療為服用NAs單藥或聯(lián)合治療。(2)自發(fā)清除病例:抗-HBs、抗-HBe、抗HBc兩項(xiàng)或三項(xiàng)均陽性,HBV DNA陰性,肝功能正常,肝膽脾超聲檢查正常,未曾接受過任何抗病毒治療的既往HBV感染者。病例排除標(biāo)準(zhǔn):(1)合并妊娠及HAV、HCV、HDV、HEV、HIV、EBV、CMV等其他病毒感染者;(2)NAs與干擾素或中藥合用者;(3)患者伴有惡性腫瘤、嚴(yán)重免疫系統(tǒng)疾病、血液系統(tǒng)疾病或明顯精神病史。療效判定:NAs治療12周時(shí)血清HBV DNA應(yīng)用PCR法檢測不到或低于檢測下限(500copies/ml),或較基線下降≥2log10為早期應(yīng)答者;12周時(shí)HBV DNA載量較基線下降2log10為非早期應(yīng)答者。NAs治療4周時(shí)血清HBV DNA應(yīng)用PCR法檢測不到或低于檢測下限(500copies/ml),或較基線下降≥2log10為快速應(yīng)答者;4周時(shí)HBV DNA載量較基線下降2log10為非快速應(yīng)答者。取清晨空腹外周靜脈血3ml,應(yīng)用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)-限制性片段長度多態(tài)性分析法,測定rs10204525、rs2227982、rs7421861和rs6710479的基因型,分析這四個(gè)位點(diǎn)等位基因分布頻率與HBV感染自發(fā)清除和NAs抗HBV療效的關(guān)系。采用IBM SPSS Statistics 19軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,率的比較采用卡方檢驗(yàn),當(dāng)出現(xiàn)P≈a或n40時(shí),用Fisher精確概率法進(jìn)行計(jì)算,全部檢驗(yàn)均為雙側(cè)檢驗(yàn),P0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。應(yīng)用SHEsis軟件進(jìn)行Hardy-Weinberg平衡分析,對(duì)照組P0.05為符合遺傳平衡定律。結(jié)果:1慢性HBV感染患者程序性細(xì)胞死亡因子-1水平變化與意義1.1納入病例的人口學(xué)特點(diǎn)與臨床資料。本研究共納入86例病例。CHB組46例(未抗病毒治療組23例,NAs抗病毒治療組23例),ACLF組20例,HBV自發(fā)清除組20例。各組病例性別和年齡比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。CHB未抗病毒治療組病例HBV DNA載量、ALT水平顯著高于NAs抗病毒治療組病例(P0.05),兩組間TB、ALB水平比較無差異(P0.05)。HBV自發(fā)清除組ALB水平顯著高于CHB組和ACLF組(P0.05),ALT、TB水平均顯著低于CHB組和ACLF組(P0.05)。CHB組ALB水平顯著高于ACLF組(P0.05),HBV DNA載量、ALT、TB水平均顯著低于ACLF組(P0.05)。1.2 CHB未抗病毒治療組、CHB NAs抗病毒治療組、ACLF組和HBV自發(fā)清除組間血清PD-1水平比較。ACLF組血清PD-1水平(17.542±2.265ng/ml)顯著高于CHB未抗病毒治療組(15.533±2.194 ng/ml)、CHB NAs抗病毒治療組(12.849±2.193 ng/ml)及HBV自發(fā)清除組(10.641±4.192ng/ml),差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.001)。CHB未抗病毒治療組血清PD-1水平顯著高于CHB NAs抗病毒治療組及HBV自發(fā)清除組,CHB NAs抗病毒治療組血清PD-1水平顯著高于HBV自發(fā)清除組,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。1.3 CHB未抗病毒治療組、CHB NAs抗病毒治療組、ACLF組和HBV自發(fā)清除組間肝組織PD-1蛋白表達(dá)比較。共40例病例接受肝臟PD-1蛋白表達(dá)檢測,CHB未抗病毒治療組10例,CHB NAs抗病毒治療組10例,ACLF組10例和HBV自發(fā)清除10例。Westernblot檢測示:ACLF組PD-1蛋白表達(dá)水平(1.274±0.362)顯著高于CHB未抗病毒治療組(1.074±0.088)、CHB NAs抗病毒治療組(0.813±0.156)及HBV自發(fā)清除組(0.593±0.116),差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.001)。CHB未抗病毒治療組PD-1蛋白表達(dá)水平顯著高于CHB NAs抗病毒治療組及HBV自發(fā)清除組,CHB NAs抗病毒治療組PD-1蛋白水平顯著高于HBV自發(fā)清除組,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。1.4血清PD-1水平與HBV DNA載量、ALT、TB及ALB相關(guān)性分析。CHB組和ACLF組病例血清PD-1水平與HBV DNA載量均成正相關(guān)(r=0.568,P0.001;r=0.729,P0.001)。CHB組病例血清PD-1水平與ALT水平成正相關(guān)(r=0.373,P=0.011),與ALB水平呈負(fù)相關(guān)(r=-0.457,P=0.001),與TB水平無明顯相關(guān)(P0.05)。ACLF組病例血清PD-1水平與ALB水平呈負(fù)相關(guān)(r=-0.756,P0.001),與ALT和TB水平無明顯相關(guān)(P0.05)。2 HBV介導(dǎo)的PD-1/PD-L1抑制通路在慢性乙型病毒性肝炎疾病進(jìn)展中的作用2.1納入病例的人口學(xué)特點(diǎn)與臨床資料。本研究共納入86例病例。CHB組46例(未抗病毒治療組23例,NAs抗病毒治療組23例),ACLF組20例,HBV自發(fā)清除組20例。各組病例性別和年齡比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。HBV自發(fā)清除組ALB水平顯著高于CHB組和ACLF組(P0.05),ALT、TB水平均顯著低于CHB組和ACLF組(P0.05)。CHB組ALB水平顯著高于ACLF組(P0.05),HBV DNA載量、ALT、TB水平均顯著低于ACLF組(P0.05)。CHB未抗病毒治療組病例HBV DNA載量、ALT水平顯著高于NAs抗病毒治療組病例(P0.05),兩組間TB、ALB水平比較無差異(P0.05)。2.2血清學(xué)指標(biāo)分析2.2.1血清PD-1水平比較。結(jié)果同第一部分。2.2.2血清IL-10水平比較。ACLF組血清IL-10水平(62.43±21.93 pg/ml)顯著高于CHB未抗病毒治療組(41.59±16.46 pg/ml)、CHB NAs抗病毒治療組(25.10±11.94 pg/ml)及HBV自發(fā)清除組(20.83±9.71 pg/ml),差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.001)。CHB未抗病毒治療組血清IL-10水平顯著高于CHB NAs抗病毒治療組及HBV自發(fā)清除組(P0.01),CHB NAs抗病毒治療組血清IL-10水平與HBV自發(fā)清除組比較無顯著差異(P0.05)。2.2.3血清IFN-γ水平比較。ACLF組血清IFN-γ水平(79.08±31.79 pg/ml)顯著高于CHB未抗病毒治療組(32.66±20.47 pg/ml)、CHB NAs抗病毒治療組(51.95±25.58 pg/ml)及HBV自發(fā)清除組(58.63±17.7 pg/ml),差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.001)。CHB未抗病毒治療組血清IFN-γ水平顯著低于CHB NAs抗病毒治療組及HBV自發(fā)清除組(P0.01),CHB NAs抗病毒治療組血清IFN-γ水平與HBV自發(fā)清除組比較無顯著差異(P0.05)。2.3外周血HBV特異性CD8+T細(xì)胞頻率比較。ACLF組外周血HBV特異性CD8+T細(xì)胞頻率(0.85±0.39%)顯著高于CHB未抗病毒治療組(0.21±0.25%)、CHB NAs抗病毒治療組(0.41±0.47%)及HBV自發(fā)清除組(0.00±0.00%),差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.001)。CHB NAs抗病毒治療組外周血HBV特異性CD8+T細(xì)胞頻率顯著高于CHB未抗病毒治療組及HBV自發(fā)清除組(P0.05),CHB NAs未抗病毒治療組外周血HBV特異性CD8+T細(xì)胞頻率明顯高于HBV自發(fā)清除組(P0.05)。2.4相關(guān)性分析2.4.1 HBV DNA載量與血清PD-1、IL-10、IFN-γ水平相關(guān)性分析。CHB組和ACLF組HBV DNA載量與血清PD-1水平均成正相關(guān)(r=0.568,P0.001;r=0.729,P0.001),與血清IL-10水平均成正相關(guān)(r=0.541,P0.001;r=0.560,P=0.01),與血清IFN-γ水平均成負(fù)相關(guān)(r=-0.319,P0.05;r=-0.832,P0.001)。2.4.2外周血HBV特異性CD8+T細(xì)胞頻率與血清PD-1水平和HBV DNA載量相關(guān)性分析。CHB組外周血HBV特異性CD8+T細(xì)胞頻率與血清PD-1水平成正相關(guān)(r=0.438,P=0.002),與HBV DNA載量不相關(guān)(r=0.072,P=0.634)。ACLF組外周血HBV特異性CD8+T細(xì)胞頻率與血清PD-1水平和HBV DNA載量均成正相關(guān)(r=0.838,P0.001;r=0.595,P=0.006)。3程序性細(xì)胞死亡因子-1單核苷酸多態(tài)性與抗HBV感染療效的相關(guān)性分析3.1納入病例的人口學(xué)特點(diǎn)與臨床資料。共納入195例病例,CHB組90例(早期應(yīng)答者65例,非早期應(yīng)答者25例),ACLF組45例(快速應(yīng)答者30例,非快速應(yīng)答者15例),HBV自發(fā)清除組60例。CHB組、ACLF組和自發(fā)清除組間病例年齡、性別均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。CHB組中的早期應(yīng)答者和非早期應(yīng)答者間,ACLF組中的快速應(yīng)答者和非快速應(yīng)答者間,年齡、性別,NAs治療前的HBV DNA載量、ALT、TB、ALB水平均無顯著差異(P0.05)。3.2等位基因分布頻率與抗HBV感染的關(guān)系。3.2.1 rs10204525基因型等位基因A的出現(xiàn)頻率CHB組(76.7%)、ACLF組(67.8%)和HBV自發(fā)清除組(75.8%)間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=2.684,P=0.261);組間比較顯示等位基因A的出現(xiàn)頻率在HBV自發(fā)清除組(75.8%)與慢性HBV感染組(CHB組+ACLF組)(73.7%)間(χ2=0.955,P=0.328),CHB組和ACLF組間(χ2=2.446,P=0.118)均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。CHB組早期應(yīng)答者等位基因A的出現(xiàn)頻率(80.8%)高于非早期應(yīng)答者(66.0%),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=4.403,P=0.036);ACLF組快速應(yīng)答者等位基因A的出現(xiàn)頻率(75.0%)高于非快速應(yīng)答者(53.3%),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=4.299,P=0.038)。3.2.2 rs6710479基因型等位基因A的出現(xiàn)頻率HBV自發(fā)清除組(59.2%)低于CHB組(73.3%)和ACLF組(68.9%),三組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=54.052,P0.001);組間比較顯示HBV自發(fā)清除組(59.2%)等位基因A的出現(xiàn)頻率低于慢性HBV感染組(CHB組+ACLF組)(71.9%),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=6.138,P=0.013),CHB組和ACLF組間等位基因分布差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.586,P=0.444)。CHB組早期應(yīng)答者和非早期應(yīng)答者間(χ2=3.084,P=0.079),ACLF組快速應(yīng)答者和非快速應(yīng)答者間(χ2=1.435,P=0.231)等位基因A的出現(xiàn)頻率均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。3.2.3 rs2227982和rs7421861基因型等位基因分布頻率在HBV自發(fā)清除組、CHB組、ACLF組間,HBV自發(fā)清除組和慢性HBV感染組(CHB組+ACLF組)間,CHB組和ACLF組間,CHB組早期應(yīng)答者和非早期應(yīng)答者間,及ACLF組快速應(yīng)答者和非快速應(yīng)答者間比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)3.3遺傳平衡檢驗(yàn)。應(yīng)用SHEsis軟件進(jìn)行Hardy-Weinberg平衡分析,rs10204525 CHB組早期應(yīng)答者(P0.001)和非早期應(yīng)答者(P=0.922)符合遺傳平衡定律,ACLF組快速應(yīng)答者(P=0.039)和非快速應(yīng)答者(P=0.447)符合遺傳平衡定律;rs6710479慢性HBV感染組(P=0.011)和HBV自發(fā)清除組(P=0.286)符合遺傳平衡定律。結(jié)論:1 PD-1的表達(dá)與HBV感染者疾病進(jìn)展相關(guān)聯(lián)。2 NAs抗HBV治療通過抑制HBV復(fù)制,促進(jìn)HBV特異性CD8+T細(xì)胞產(chǎn)生,降低PD-1/PD-L1信號(hào)通路中PD-1的表達(dá),調(diào)節(jié)Th1/Th2平衡,改善宿主的免疫功能。3 PD-1 rs6710479基因等位基因A不利于病毒自發(fā)清除,易導(dǎo)致HBV感染慢性化;rs10204525基因等位基因A有利于NAs抗HBV的治療應(yīng)答。
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R512.62

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 中華醫(yī)學(xué)會(huì)感染病學(xué)分會(huì)肝衰竭與人工肝學(xué)組;中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝病學(xué)分會(huì)重型肝病與人工肝學(xué)組;;肝衰竭診治指南(2012年版)[J];實(shí)用肝臟病雜志;2013年03期

2 Wen-Jin Zhang;Chuan-Hui Peng;Shu-Sen Zheng;;Programmed death 1 and programmed death ligand 1 expressions in patients with chronic hepatitis B[J];Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International;2013年04期

，

本文編號(hào)：1188291