本文關(guān)鍵詞：谷氨酰胺對(duì)大鼠腸缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制探討

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【摘要】：目的谷氨酰胺是腸上皮細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞最易利用和最重要的能源物質(zhì),是抗氧化防御系統(tǒng)中谷胱甘肽和核苷酸等合成的前體。本研究旨在探討谷氨酰胺預(yù)處理對(duì)大鼠腸缺血再灌注損傷的護(hù)作用及其對(duì)Nrf2/ARE信號(hào)通路的影響。方法將30只Wistar雄性大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組(Sham組),缺血再灌注組(I/R組),谷氨酰胺預(yù)處理組(GLN組),每組10只,術(shù)前7天分別給予相應(yīng)處理。GLN組給予GLN lg/kg/d連續(xù)灌胃7天。Sham組和I/R組以1g/kg/d NS灌胃7天。Sham組僅分離腸系膜上動(dòng)脈(SMA)但不夾閉SMA根部。I/R組和GLN組均用無(wú)損傷血管央夾閉SMA根部,30min后松開血管夾建立缺血再灌注損傷模型。各組大鼠于建模后24 h采集靜脈血和回腸標(biāo)本。檢測(cè)血清D-乳酸、內(nèi)毒素、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)水平；HE染色法觀察腸組織病理?yè)p傷情況；透射電鏡觀察細(xì)胞間的機(jī)械屏障的變化；免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)大鼠腸組織occludin、Nrf2、HO-1蛋白的表達(dá)；Western blot檢測(cè)occludin蛋白的表達(dá)情況；熒光定量PCR方法檢測(cè)Nrf2、HO-1的mRNA表達(dá)。結(jié)果(1)再灌注后,與Sham組相比,Ⅰ/R組腸粘膜上皮缺失,腺體水腫,間隙增寬,腺體排列紊亂,部分絨毛頂端出血。occludin蛋白水平明顯下降；GLN組表現(xiàn)為腸黏膜腺體形態(tài)大致,絨毛上皮下間隙輕度擴(kuò)大,腺體輕度水腫,固有層輕度水腫,occludin蛋白水平明顯升高。Ⅰ/R組大鼠血漿D-乳酸、內(nèi)毒素水平較Sham組均明顯升高(P0.05),提示大鼠在腸缺血再灌注狀態(tài)過程中降低腸黏膜屏障功能,提高腸黏膜通透性,并出現(xiàn)內(nèi)毒素血癥；而GLN組血漿D-乳酸、內(nèi)毒素水平較對(duì)照組顯著降低(P0.05),保護(hù)腸粘膜免受損傷,降低內(nèi)毒素血癥的發(fā)生及細(xì)菌移位。說明谷氨酰胺可以減輕Ⅱ/R造成的腸黏膜屏障功能損傷。(2)再灌注后,Ⅰ/R組血清中MDA水平高于假手術(shù)組和GLN組,血清中SOD及GSH-Px水平均低于Sham組和GLN組；而Ⅰ/R組及GLN組Nrf-2、HO-1蛋白含量及mRNA水平均明顯高于Sham組。說明谷氨酰胺對(duì)大鼠腸缺血再灌注損傷的保護(hù)作用可能是通過抑制氧化應(yīng)激,激活Nrf2/ARE信號(hào)通路而實(shí)現(xiàn)的。結(jié)論(1)谷氨酰胺對(duì)大鼠腸缺血再灌注大鼠有保護(hù)作用,降低內(nèi)毒素血癥的發(fā)生及細(xì)菌移位。(2)谷氨酰胺通過激活Nrf2/ARE信號(hào)通路,進(jìn)一步抗氧化應(yīng)激,從而對(duì)大鼠腸缺血再灌注損傷起到保護(hù)作用。
【學(xué)位授予單位】：濱州醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R574

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