本文關(guān)鍵詞：Sdha基因敲低對小鼠肝細(xì)胞BNL CL.2細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期和凋亡的影響

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【摘要】：目的探討琥珀酸脫氫酶復(fù)合物亞單位A(SDHA)對小鼠肝細(xì)胞BNL CL.2細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期和凋亡的影響。方法用慢病毒載體介導(dǎo)的sh RNA敲低BNL CL.2細(xì)胞中sdha基因的表達(dá)。流式細(xì)胞儀檢測慢病毒的感染效率;實(shí)時熒光定量PCR和Western蛋白印跡法分別檢測sdha m RNA和SDHA蛋白表達(dá)水平;細(xì)胞計數(shù)法檢測細(xì)胞增殖;流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡和細(xì)胞周期。結(jié)果無相關(guān)sh RNA對照組和sdha sh RNA組慢病毒的感染效率均80%。與無相關(guān)sh RNA對照組相比,感染sdha sh RNA慢病毒載體的BNL CL.2細(xì)胞sdha m RNA水平降低20倍左右(P0.01),蛋白表達(dá)水平降低10倍左右(P0.01);細(xì)胞增殖速度減慢,為無相關(guān)sh RNA對照組的70%左右(P0.05);細(xì)胞周期發(fā)生改變,G0/G1期細(xì)胞百分率是無相關(guān)sh RNA對照組的1.17倍(P0.01),G2/M期細(xì)胞百分率為1.37倍(P0.01),S期細(xì)胞百分率為73.8%(P0.01);但細(xì)胞凋亡率無明顯差異。結(jié)論降低SDHA表達(dá)對小鼠肝細(xì)胞BNL CL.2細(xì)胞增殖有明顯的抑制作用,其抑制作用與細(xì)胞周期阻滯相關(guān),與細(xì)胞凋亡無明顯關(guān)系。
【作者單位】： 北京中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院;軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所免疫學(xué)研究室;
【關(guān)鍵詞】： 琥珀酸脫氫酶復(fù)合物亞單位A BNL CL.細(xì)胞 細(xì)胞增殖 細(xì)胞周期 細(xì)胞凋亡
【基金】：國家科技重大專項(xiàng)(2013ZX09103003)~~
【分類號】：R575
【正文快照】： 免疫學(xué)研究室,北京100850)琥珀酸脫氫酶復(fù)合物亞單位A(succinatedehydrogenase complex subunit A,SDHA)是組成異源四聚體琥珀酸脫氫酶的亞基,位于線粒體內(nèi)膜上,參與三羧酸循環(huán)和線粒體呼吸鏈的電子傳遞,在細(xì)胞能量代謝中發(fā)揮重要作用[1]。腫瘤的形成往往跟代謝紊亂有密切關(guān)系

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本文編號：1115158