本文關(guān)鍵詞：18β-甘草次酸對(duì)脂多糖誘導(dǎo)鼻黏膜炎癥的影響

  更多相關(guān)文章： 鼻息肉 沉默信號(hào)調(diào)節(jié)因子6 高遷移率族蛋白1 18-β甘草次酸 脂多糖

【摘要】：鼻息肉(nasal polyps, NP)是鼻腔鼻竇黏膜組織高度水腫的慢性炎性病變,常伴有慢性鼻-鼻竇炎,多數(shù)學(xué)者多傾向認(rèn)為黏膜的慢性炎性反應(yīng)是由多因素如細(xì)菌、真菌、解剖變異等誘發(fā)鼻腔外側(cè)壁黏膜炎癥所致。炎癥是對(duì)創(chuàng)傷和感染的生理性和保護(hù)性反應(yīng),而炎性細(xì)胞的長(zhǎng)期浸潤(rùn)可促使細(xì)胞因子(如HMGB1、TNF-α、IL-5、IL-8等)相互作用,鼻黏膜局部炎癥反應(yīng)不斷擴(kuò)大。HMGB1屬非組蛋白核蛋白,參與細(xì)胞分化、DNA的轉(zhuǎn)錄、復(fù)制與修復(fù)等,屬細(xì)胞核的成分,在胞外時(shí)發(fā)揮著炎癥因子的作用。在鼻息肉組織中HMGB1表達(dá)水平較正常鼻黏膜組織增高,LPS誘導(dǎo)可促使細(xì)胞核內(nèi)的HMGB1主動(dòng)釋放至細(xì)胞質(zhì)及細(xì)胞外。沉默信息調(diào)節(jié)因子是依賴(lài)于煙酰胺腺嘌呤二核苷酸的第三類(lèi)組蛋白去乙�；�,Sirtuins蛋白家族參與炎癥機(jī)制的上游信號(hào)通路,在呼吸道細(xì)胞的細(xì)胞衰老、病原感染中發(fā)揮著重要的作用。本研究通過(guò)觀察鼻息肉組織和正常鼻黏膜組織中Sirt6 (silent information regulator 2 related enzyme 6)的表達(dá),脂多糖誘導(dǎo)體外原代鼻黏膜上皮細(xì)胞后18β-甘草次酸對(duì)Sirt6 和 HMGB1的影響情況,以初步探討Sirt6蛋白在正常鼻黏膜和鼻息肉中的作用,18β-甘草次酸是否在鼻黏膜上皮細(xì)胞中發(fā)揮抗炎機(jī)制。第一部分沉默信號(hào)調(diào)節(jié)因子6在鼻息肉中的表達(dá)及意義目的：初步探討Sirt6在慢性鼻竇炎伴鼻息肉中的表達(dá)及意義。方法：利用免疫組化和Westem blot方法觀察23例鼻息肉組織及8例正常鼻黏膜組織中Sirt6蛋白分布和表達(dá)水平。結(jié)果：1.免疫組化顯示Sirt6在鼻黏膜主要表達(dá)在上皮細(xì)胞胞核、間質(zhì)細(xì)胞及腺細(xì)胞,在鼻息肉中的表達(dá)弱于正常鼻黏膜;2.Westem blot顯示Sirt6在鼻息肉中的表達(dá)量低于正常鼻黏膜。結(jié)論：Sirt6蛋白主要表達(dá)在正常鼻黏膜細(xì)胞,其水平的降低可能參與鼻息肉的炎性反應(yīng),可作為慢性鼻竇炎伴鼻息肉的治療指標(biāo)。第二部分18p-甘草次酸對(duì)脂多糖誘導(dǎo)鼻黏膜炎癥的影響目的：觀察18p-甘草次酸(GA)對(duì)脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的鼻黏膜上皮細(xì)胞炎癥的影響。方法：收集鼻息肉標(biāo)本8例,所取標(biāo)本的患者年齡在19-60歲之間,排除真菌性鼻竇炎、過(guò)敏性鼻炎、哮喘、鼻息肉復(fù)發(fā)再次手術(shù)者及其他全身性疾病及免疫學(xué)檢查異�；颊�。術(shù)前停用糖皮質(zhì)激素、抗組胺等藥物治療兩周。LPS誘導(dǎo)原代培養(yǎng)的人鼻息肉上皮細(xì)胞48 h后,更換含18p-甘草次酸培養(yǎng)基作用48 h,熒光顯微鏡下觀察Sirt6及HMGB1蛋白在細(xì)胞中的表達(dá)及細(xì)胞形態(tài)變化,Western blot檢測(cè)蛋白的表達(dá)量。結(jié)果：GA藥物組與空白對(duì)照組及LPS誘導(dǎo)原代培養(yǎng)的人鼻息肉上皮細(xì)胞48h后相比,HMGB1表達(dá)局限于胞核,Sirt6主要表達(dá)與細(xì)胞核內(nèi)。Western blot檢測(cè)在GA作用后,上皮細(xì)胞中Sirt6、HMGB1表達(dá)量明顯增加,在1 μmol/L達(dá)到高峰值,兩者呈現(xiàn)相關(guān)性。結(jié)論：1 μmol/L的18-β甘草次酸作用LPS誘導(dǎo)的原代人鼻黏膜上皮細(xì)胞后,能夠促進(jìn)Sirt6表達(dá)量的增加,并抑制細(xì)胞核中HMGB1向胞質(zhì)及胞外的移位和釋放,提示18-p甘草次酸在抑制人鼻黏膜上皮細(xì)胞的炎性反應(yīng)中具有重要作用。
【關(guān)鍵詞】：鼻息肉 沉默信號(hào)調(diào)節(jié)因子6 高遷移率族蛋白1 18-β甘草次酸 脂多糖
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)人民解放軍醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R765
【目錄】：

• 英文縮略詞表5-7
• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-11
• 前言11-15
• 參考文獻(xiàn)13-15
• 第一部分 沉默信號(hào)調(diào)節(jié)因子6在鼻息肉中的表達(dá)及意義15-27
• 一.材料15-16
• 1.研究對(duì)象15
• 2.標(biāo)本處理15
• 3.實(shí)驗(yàn)儀器及設(shè)備15-16
• 4.主要試劑16
• 二.實(shí)驗(yàn)方法16-20
• 2.1 免疫組化17-18
• 2.2 Western blot18-20
• 2.3 統(tǒng)計(jì)分析20
• 三.結(jié)果20-22
• 1.正常鼻黏膜與慢性鼻竇炎伴鼻息肉的臨床特點(diǎn)20
• 2.正常鼻炥膜組織和鼻息肉組織中Sirt6的表達(dá)及分布20-21
• 3.Western blot檢測(cè)Sirt6蛋白的表達(dá)21-22
• 四.討論22-25
• 參考文獻(xiàn)25-27
• 第二部分 18β-甘草次酸對(duì)脂多糖誘導(dǎo)鼻黏膜炎癥的影響27-43
• 一.材料27-28
• 1.標(biāo)本27
• 2.實(shí)驗(yàn)儀器及設(shè)備27
• 3.主要試劑及配制27-28
• 二.實(shí)驗(yàn)方法28-31
• 1.人鼻黏膜上皮細(xì)胞原代培養(yǎng)28-29
• 2.臺(tái)盼藍(lán)試劑檢測(cè)細(xì)胞活力29
• 3.配制GA29
• 4. GA作用LPS誘導(dǎo)原代人鼻炥膜上皮細(xì)胞29-30
• 5. MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖30
• 6.免疫突光染色30
• 7. Western Blot30-31
• 8.統(tǒng)計(jì)分析31
• 三.結(jié)果31-37
• 1.人鼻黏膜上皮細(xì)胞原代培養(yǎng)及形態(tài)觀察31-33
• 2.GA作用LPS誘導(dǎo)鼻壚膜上皮細(xì)胞48h后HMGB1的表達(dá)定位33-36
• 3.GA對(duì)LPS誘導(dǎo)鼻炥膜炎癥后上皮細(xì)胞HMGB1蛋白表達(dá)水平的影響36-37
• 四.討論37-40
• 參考文獻(xiàn)40-43
• 文獻(xiàn)綜述43-49
• 參考文獻(xiàn)46-49
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷49-51
• 致謝51

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 趙干業(yè);韓麗敏;童坦君;;SIRT6功能與疾病研究進(jìn)展[J];生理科學(xué)進(jìn)展;2014年04期

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本文編號(hào)：867142