本文關(guān)鍵詞：S100A4對(duì)CNE2細(xì)胞侵襲及EMT的影響

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【摘要】：目的構(gòu)建S100A4基因高表達(dá)載體,建立穩(wěn)定高表達(dá)S100A4基因的CNE2細(xì)胞系,研究S100A4轉(zhuǎn)入對(duì)CNE2細(xì)胞的影響；測(cè)定與分析EMT標(biāo)志物E-cadherin和Fibronectin、基質(zhì)金屬蛋白酶MMP2和MMP9表達(dá)水平,探討S100A4基因表達(dá)與CNE2細(xì)胞侵襲能力及EMT的關(guān)系。方法本研究通過(guò)培養(yǎng)CNE2細(xì)胞,獲取cDNA, PCR擴(kuò)增S100A4片段,構(gòu)建高表達(dá)S100A4基因的pCMV-S100A4重組質(zhì)粒；采用脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染CNE2細(xì)胞,G418篩選,克隆挑選,建立S100A4穩(wěn)定高表達(dá)的CNE2細(xì)胞系,以pCMV-CNE2細(xì)胞系、以未轉(zhuǎn)染的CNE2細(xì)胞系為對(duì)照；Western blotting檢測(cè)S1OOA4蛋白的表達(dá)能力；MTT法繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線；Western blotting,檢測(cè)E-cadherin、Fibronectin、MMP2及1MMP9的表達(dá)；Transwell實(shí)驗(yàn),檢測(cè)細(xì)胞侵襲能力變化。結(jié)果1、成功構(gòu)建pCMV-S100A4重組質(zhì)粒；2、pCMV-S100A4-CNE2細(xì)胞穩(wěn)定高表達(dá)S100A4; 3、pCMV-S100A4-CNE2細(xì)胞系生長(zhǎng)增殖速度加快；4、pCMV-S100A4-CNE2侵襲細(xì)胞計(jì)數(shù)增多；5、pCMV-S100A4-CNE2細(xì)胞E-cadherin蛋白表達(dá)降低、Fibronectin、MMP2及MMP9表達(dá)增強(qiáng)。結(jié)論1、S100A4導(dǎo)入CNE2細(xì)胞,其生長(zhǎng)增殖速度加快,侵襲能力增強(qiáng)；2、S100A4參與CNE2細(xì)胞的EMT過(guò)程。
【關(guān)鍵詞】：鼻咽癌 S100A4 上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化 基質(zhì)金屬酶蛋白 侵襲轉(zhuǎn)移
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R739.63
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-10
• 第1章 前言10-12
• 第2章 材料與方法12-20
• 第3章 結(jié)果20-26
• 第4章 討論26-30
• 第5章 結(jié)論30-32
• 參考文獻(xiàn)32-36
• 綜述36-44
• 參考文獻(xiàn)41-44
• 攻讀碩士學(xué)位論文期間發(fā)表論文情況44-46
• 致謝46

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 李爍;杜政德;高進(jìn)良;高春生;劉飛;楊瓊;劉邦華;;鼻咽癌組織中6-磷酸果糖激酶-1基因的表達(dá)及臨床意義[J];臨床耳鼻咽喉頭頸外科雜志;2014年06期

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本文編號(hào)：841477