本文關(guān)鍵詞：Wistar大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)元高糖模型葡萄糖濃度和培養(yǎng)時間的篩選

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【摘要】：目的篩選Wistar大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)元高糖模型的葡萄糖濃度及培養(yǎng)時間。方法取出生1~3 d Wistar大鼠分離視網(wǎng)膜神經(jīng)元進行傳代培養(yǎng),尼氏染色法鑒定細胞;實驗分5組:A組培養(yǎng)液葡萄糖濃度為0 mmol·L~(-1)(正常對照組),B組濃度為10 mmol·L~(-1),C組濃度為15 mmol·L-1,D組濃度為25 mmol·L~(-1),E組濃度為35 mmol·L~(-1)。分別培養(yǎng)24 h、48 h、72 h后用MTT法檢測各組細胞OD值,流式細胞儀檢測各組細胞凋亡率。結(jié)果倒置顯微鏡觀察分離培養(yǎng)細胞,大部分細胞于接種24 h后貼壁,少數(shù)細胞長出較短的突起,并有向中央聚集生長的現(xiàn)象。2~3 d后長出突起的神經(jīng)元數(shù)目增多,突起長度增加,約為自身胞體長度的1倍。培養(yǎng)5~7 d后神經(jīng)元突起進一步增多、變長。經(jīng)尼氏染色后細胞質(zhì)呈藍紫色,尼氏小體顆粒狀結(jié)構(gòu)清晰。非神經(jīng)元細胞胞質(zhì)基本不著色,細胞核呈淡紫色、圓形,核仁清晰可辨,神經(jīng)元率達91%。各實驗組在培養(yǎng)24 h后OD值均低于正常對照組,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。隨培養(yǎng)時間延長OD值繼續(xù)下降,48 h后各組OD值比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01);其中B組及C組與A組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(均為P0.05);D組OD值明顯下降,與A組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),E組下降更明顯,與A組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)。72 h后各組OD值比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01);其中B組及C組與A組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(均為P0.05);D組及E組與A組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(均為P0.01)。各組在培養(yǎng)24 h后視網(wǎng)膜神經(jīng)元凋亡率差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。48 h后各組凋亡率比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01);其中B組及C組與A組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(均為P0.05);D組凋亡率明顯升高,與A組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);E組凋亡率升高更明顯,與A組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01),且與D組比較亦有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。72 h后各組凋亡率比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01);其中B組及C組與A組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(均為P0.05),D組及E組與A組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(均為P0.01)。結(jié)論葡萄糖濃度為25 mmol·L~(-1)培養(yǎng)48 h是視網(wǎng)膜神經(jīng)元高糖模型最佳葡萄糖濃度及干預(yù)時間。
【作者單位】： 赤峰學(xué)院附屬醫(yī)院眼科;
【關(guān)鍵詞】： 大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)元細胞 高糖模型 葡萄糖濃度 培養(yǎng)時間
【基金】：國家自然科學(xué)基金地區(qū)項目(編號:61465001)~~
【分類號】：R587.2;R774.1
【正文快照】： 糖尿病視網(wǎng)膜病變(diabetic retinopathy,DR)是胞于接種24 h后貼壁,少數(shù)細胞長出較短的突起,并世界范圍內(nèi)主要的致盲眼病,視網(wǎng)膜神經(jīng)元是視網(wǎng)有向中央聚集生長的現(xiàn)象。2~3 d后長出突起的神膜光感受器及神經(jīng)信息傳遞功能的執(zhí)行者,各種致病經(jīng)元數(shù)目增多,突起長度增加,約為自身胞，

本文編號：714967