本文關鍵詞：miR-150促進鼻咽癌細胞增殖和侵襲的機制研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的探討miR-150是否通過靶向調控程序性細胞死亡因子4(PDCD4)促進鼻咽癌細胞增殖和侵襲,進一步揭示miR-150在鼻咽癌中的癌基因作用。方法 2014年3—6月,培養(yǎng)鼻咽癌細胞株CNE-2,取生長良好的CNE-2用于實驗。設計合成PDCD4野生型引物序列以及突變型引物序列,連接到含有熒光素酶載體質粒上,檢測熒光素酶活性。分別瞬時轉染Vector、pc DNA3.1(+)-PDCD4、miR-ctr、miR-150 mimics聯(lián)合pc DNA3.1(+)-PDCD4于CNE-2,48 h后采用Western blotting法檢測PDCD4表達水平。分別瞬時轉染Vector、pc DNA3.1(+)-PDCD4、miR-150 inhibitors、miR-150 mimics聯(lián)合pc DNA3.1(+)-PDCD4于CNE-2,分別于培養(yǎng)24、48、72、96 h后測定其吸光度(OD)值,反映其增殖能力。分別瞬時轉染Vector、pc DNA3.1(+)-PDCD4、miR-150inhibitors、miR-150 mimics聯(lián)合pc DNA3.1(+)-PDCD4于CNE-2,采用Transwell侵襲實驗檢測CNE-2侵襲能力。結果無miR-150轉染的PDCD4野生型細胞株熒光素酶活性為(0.975±0.112),miR-150轉染的PDCD4野生型細胞株熒光素酶活性為(0.588±0.042),差異有統(tǒng)計學意義(t=7.853,P=0.018)。無miR-150轉染的PDCD4突變型細胞株熒光素酶活性為(0.992±0.135),miR-150轉染的PDCD4突變型細胞株熒光素酶活性為(0.875±0.095),差異無統(tǒng)計學意義(t=1.461,P=0.281)。轉染Vector、pc DNA3.1(+)-PDCD4、miR-ctr、miR-150 mimics聯(lián)合pc DNA3.1(+)-PDCD4的CNE-2 PDCD4表達水平分別為(0.655±0.058)、(1.147±0.152)、(0.704±0.068)、(0.313±0.036),差異有統(tǒng)計學意義(F=43.410,P0.001);其中,轉染Vector、miR-ctr、miR-150mimics聯(lián)合pc DNA3.1(+)-PDCD4的CNE-2 PDCD4表達水平均低于轉染pc DNA3.1(+)-PDCD4的CNE-2,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。轉染物和時間對CNE-2增殖能力存在交互作用,轉染物和時間對CNE-2增殖能力均存在主效應(P0.001)。轉染Vector、pc DNA3.1(+)-PDCD4、miR-150 inhibitors、miR-150 mimics聯(lián)合pc DNA3.1(+)-PDCD4的CNE-2穿膜細胞數(shù)分別為(56.6±7.5)、(26.5±3.7)、(30.5±4.7)、(55.2±6.9)個,差異有統(tǒng)計學意義(F=18.550,P=0.014);其中,轉染pc DNA3.1(+)-PDCD4、miR-150 inhibitors的CNE-2穿膜細胞數(shù)少于轉染Vector、miR-150 mimics聯(lián)合pc DNA3.1(+)-PDCD4的CNE-2,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。結論 miR-150通過抑制PDCD4的表達,繼而增強鼻咽癌細胞的增殖能力和侵襲能力。
【作者單位】： 南華大學附屬第二醫(yī)院耳鼻咽喉科;南華大學腫瘤研究所;
【關鍵詞】： 鼻咽腫瘤 miR- 程序性細胞死亡因子 細胞增殖 侵襲
【基金】：國家自然科學基金青年基金資助項目(81100568) 湖南省科技計劃項目(2014SK3081)
【分類號】：R739.63
【正文快照】： miRNA是長21~25 nt具有調控功能的單鏈非編碼小RNA,在進化過程中高度保守,是近年來生物醫(yī)學領域研究的熱點[1]。miRNA通過與靶基因mRNA的3'非編碼區(qū)(3'UTR)完全或不完全堿基配對,致使靶基因mRNA降解或其蛋白翻譯受抑制,從而負向調控轉錄水平。研究表明,miR-150在胰腺癌、食管

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本文編號：496608