本文關(guān)鍵詞：DSF-Cu通過影響線粒體功能和細(xì)胞骨架誘導(dǎo)鼻咽癌CNE-2Z細(xì)胞凋亡，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的探測雙硫侖(disulfiram,DSF)螯合氯化銅(DSF-Cu)通過影響線粒體功能和細(xì)胞骨架誘導(dǎo)人低分化鼻咽癌CNE-2Z細(xì)胞凋亡。方法采用流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞周期、凋亡率、活性氧(reactive oxygen species,ROS)的生成以及線粒體膜電位(mitochondrial membrane potential,MMP)的改變。AFM探測細(xì)胞表面形貌和超微結(jié)構(gòu)、細(xì)胞高度、寬度及粗糙度的變化。激光掃描共聚焦顯微鏡(laser scanning confocal microscope,LSCM)觀察細(xì)胞骨架F-actin的分布和重組。結(jié)果細(xì)胞周期檢測顯示DSF-Cu將CNE-2Z細(xì)胞周期阻滯于G2/M期。Annexin-V/PI檢測細(xì)胞凋亡顯示隨藥物濃度增加,與對照組相比,實驗組早凋率和晚凋率、壞死率細(xì)胞均明顯增加。進一步檢測凋亡相關(guān)信號發(fā)現(xiàn)DSF-Cu可促進CNE-2Z細(xì)胞內(nèi)活性氧水平的增加及誘導(dǎo)MMP下降。AFM成像表明,與對照組相比,隨著藥物濃度增大,細(xì)胞逐漸變小,胞質(zhì)濃縮,高度增加,膜表面粗糙度降低,變得平整光滑;細(xì)胞偽足由對照組的豐富密集,逐漸變短、萎縮,甚至完全破壞。LSCM進一步觀察發(fā)現(xiàn)DSF-Cu引起F-actin熒光強度減弱,結(jié)構(gòu)重排,嚴(yán)重影響微絲的功能。結(jié)論 DSF-Cu可誘導(dǎo)CNE-2Z細(xì)胞依賴線粒體的凋亡途徑,利用AFM在單細(xì)胞水平上分析DSF-Cu對細(xì)胞膜的毒性作用,為鼻咽癌的治療提供新的思路。
【作者單位】： 暨南大學(xué)分析測試中心;暨南大學(xué)醫(yī)學(xué)院藥理學(xué)系;暨南大學(xué)醫(yī)學(xué)院生理學(xué)系;廣東省中醫(yī)院病理科;
【關(guān)鍵詞】： 雙硫侖 原子力顯微鏡 細(xì)胞骨架 活性氧 凋亡 鼻咽癌 線粒體膜電位
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項目(No 31070997,81372382) 廣東省自然科學(xué)基金資助項目(No S2013010013780,2015A030313363) 廣東省醫(yī)學(xué)科研基金項目(No A201506)
【分類號】：R739.63
【正文快照】： R979.9鼻咽癌是一種鼻咽部的鱗狀上皮細(xì)胞癌,臨床上具有發(fā)病部位較深、病變難以被早期發(fā)現(xiàn),以至就診時許多病人已是中晚期,且癌變后易發(fā)生侵潤轉(zhuǎn)移的特點[1]。目前臨床治療以放療聯(lián)合輔助化療為主,盡管聯(lián)合放化療可以提高鼻咽癌的局控率和生存率,但是兩種手段對正常細(xì)胞均有明

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