PMX205干預視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞興奮性損傷的研究
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【摘要】:目的:探討補體系統(tǒng)活化產(chǎn)物C5a及其受體拮抗劑PMX205在NMDA(N-methyl-D-aspartate,N-甲基-D-天門冬氨酸)介導的視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞(RGCs)興奮性損傷模型中的作用。方法:健康成年清潔級SD大鼠65只,隨機分為空白對照組(5只)、PBS組(玻璃體腔注射PBS 20只)、NMDA組(玻璃體腔注射NMDA 20只)、PMX205+NMDA組(腹腔注射PMX205+玻璃體腔注射NMDA20只)。每組再隨機分為四小組,分別于玻璃體腔NMDA注射后1h,12h,24h,48h處死。HE染色法觀察各組視網(wǎng)膜組織形態(tài)學變化,ELISA檢測視網(wǎng)膜組織中補體成分C5a的含量變化,Real-time PCR檢測Brn3a的m RNA表達變化評估RGCs的損傷程度。結(jié)果:1.空白對照眼視網(wǎng)膜各層組織染色均勻、細胞結(jié)構(gòu)清晰、形態(tài)規(guī)整,RGCs呈圓形或橢圓形、單層排列。玻璃體腔注射NMDA后1h,RGCs水腫、核膜間距加寬、排列紊亂,隨造模時間的延長,RGCs數(shù)目明顯減少,內(nèi)叢狀層變薄。與NMDA組中相同處理時間組比較,PMX205+NMDA組RGCs排列相對規(guī)整、未見明顯丟失,內(nèi)叢狀層較厚。2.ELISA結(jié)果:視網(wǎng)膜組織中C5a含量在NMDA組處理1h即升高,12h繼續(xù)上升,24h達高峰,48h下降,NMDA組中除處理1h組與空白對照組比較差異無統(tǒng)計學意義(p=0.06)外,其余處理時間組與空白對照組比較差異均具有統(tǒng)計學意義(p0.05),PBS組中各處理時間組視網(wǎng)膜組織C5a含量分別與空白對照組比較,差異均無統(tǒng)計學意義(p0.05)。3.實時定量PCR檢測Brn3a m RNA結(jié)果:NMDA組與空白對照組比較,隨處理時間的延長,視網(wǎng)膜組織中Brn3a m RNA表達量呈進行性下降,且NMDA組中各處理時間組Brn3a m RNA表達量分別與空白對照組比較,差異均具有顯著統(tǒng)計學意義(p0.01)。與NMDA組的相同處理時間組比較,PMX205+NMDA組視網(wǎng)膜組織Brn3a m RNA表達水平均較高,NMDA組和PMX205+NMDA組中除處理1h組相比較,差異無統(tǒng)計學意義(p=0.07)外,其余3個處理時間組分別對應比較,差異均具有顯著的統(tǒng)計學意義(p0.01)。PMX205+NMDA組不同處理時間眼Brn3a m RNA的表達量分別與空白對照眼比較,差異均具有統(tǒng)計學意義(p0.01)。結(jié)論:補體系統(tǒng)活化成分C5a可能參與了NMDA介導的視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞興奮性損傷過程,而其特異性受體拮抗劑PMX205可在一定程度上阻斷此過程,起到神經(jīng)保護作用。
【關(guān)鍵詞】:N-甲基-D-天門冬氨酸 興奮性損傷 視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞 C5a PMX205
【學位授予單位】:青島大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:R775
【目錄】:
- 摘要2-3
- Abstract3-5
- 引言5-6
- 第一章 材料與方法6-15
- 1.1 實驗材料6-7
- 1.2 實驗方法7-13
- 1.3 統(tǒng)計學分析13-15
- 第二章 結(jié)果15-18
- 2.1 視網(wǎng)膜組織HE染色15
- 2.2 ELISA檢測視網(wǎng)膜組織中C5a含量結(jié)果15-16
- 2.3 RT-PCR檢測視網(wǎng)膜組織Brn3amRNA的表達結(jié)果16-18
- 第三章 討論18-23
- 結(jié)論23-24
- 參考文獻24-28
- 附圖28-30
- 綜述30-41
- 參考文獻37-41
- 攻讀學位期間的研究成果41-42
- 致謝42-43
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