MEG3抑制視網(wǎng)膜母細胞瘤細胞增殖
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【摘要】:目的 :探討母系表達基因3(maternally expressed gene 3,MEG3)對視網(wǎng)膜母細胞瘤(retinoblastoma,RB)細胞增殖的影響。方法 :應用實時熒光定量PCR法檢測RB細胞SO-RB50和HXO-RB44及正常視網(wǎng)膜色素上皮h TERT RPE-1細胞中MEG3的表達水平。將pc DNAMEG3或si RNA-MEG3分別轉(zhuǎn)染SO-RB50或HXO-RB44細胞后,應用實時熒光定量PCR法檢測細胞中MEG3的表達水平,CCK-8法檢測細胞的增殖能力,蛋白質(zhì)印跡法檢測細胞中RB蛋白的表達水平。用不同濃度的5-氮雜-2’-脫氧胞苷(5-Aza-2’-deoxycytidine,5-Aza-Cd R)處理SO-RB50和HXO-RB44細胞后,應用實時熒光定量PCR法檢測細胞中MEG3的表達水平。CCK-8法檢測si RNA-MEG3轉(zhuǎn)染10μmol/L 5-Aza-Cd R處理組SO-RB50和HXO-RB44細胞的增殖能力。結(jié)果:RB細胞SO-RB50和HXO-RB44中MEG3的表達水平均顯著低于正常視網(wǎng)膜色素上皮h TERT RPE-1細胞(P值均0.01)。pc DNA-MEG3轉(zhuǎn)染后,SO-RB50細胞中MEG3和RB蛋白的表達水平上調(diào)(P0.01和P0.05),細胞增殖受到抑制(P0.05);si RNA-MEG3轉(zhuǎn)染后,HXO-RB44細胞中MEG3和RB蛋白的表達水平下調(diào)(P0.01和P0.05),并促進細胞增殖(P0.05)。5和10μmol/L 5-Aza-Cd R處理后,SO-RB50細胞(P0.05和P0.01)和HXO-RB44細胞(P0.05和P0.01)中MEG3的表達水平上調(diào)。si RNA-MEG3轉(zhuǎn)染10μmol/L 5-Aza-Cd R處理組SO-RB50和HXORB44細胞的增殖受到抑制(P值均0.05)。結(jié)論 :RB細胞中MEG3表達下調(diào),這可能與DNA甲基化有關(guān)。MEG3可能通過促進RB蛋白的表達而抑制RB細胞的增殖。
【作者單位】: 深圳市人民醫(yī)院眼科;
【關(guān)鍵詞】: 視網(wǎng)膜母細胞瘤 細胞增殖 成視網(wǎng)膜細胞瘤蛋白質(zhì) 長鏈非編碼RNA -氮雜-’-脫氧胞苷
【基金】:深圳市衛(wèi)生計生系統(tǒng)科研項目(編號:201507010)~~
【分類號】:R739.7
【正文快照】: 方法:應用實時熒光定量PCR法檢測RB細胞SO-RB50和HXO-RB44及正常視網(wǎng)膜色素上皮h TERT RPE-1細胞中MEG3的表達水平。將pc DNA-MEG3或si RNA-MEG3分別轉(zhuǎn)染SO-RB50或HXO-RB44細胞后,應用實時熒光定量PCR法檢測細胞中MEG3的表達水平,CCK-8法檢測細胞的增殖能力,蛋白質(zhì)印跡法檢測
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,本文編號:476051
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